Kardiometabolsk helse hos barn utsatt for antiretroviral terapi (ART) i utero (ARTMOMSBABES)

I. Beregning av prøvestørrelse Antall deltakere som kreves for å vise statistisk signifikans er basert på tidligere publiserte studier der vaskulær funksjon ble vurdert hos HIV-pasienter (Agu et al., 2019). En feilsannsynlighet (α) på 0,05, og power (1- β) på 0,80 og en gjennomsnittlig effektstørrelse (d) på 0,5 ble brukt for å beregne utvalgsstørrelsen (n= 64 personer). Forutsatt en frafallsrate på 25 %, vil vi bruke N = (64 + (64*25)/100) = 80 mødre/gruppe for å sikre at vi vil ha nok utvalgsstørrelse/gruppe til å vise statistisk signifikans. Totalt antall deltakende mødre vil derfor være 160 (80 tilfeller og 80 kontroller) og deres avkom - 160.

II. Etisk godkjenning Etisk samtykke og tillatelse til å gjennomføre forskningsprosjektet vil bli innhentet fra Fakultet for helsevitenskapelig forskning og etikk (HRSEC) ved Walter Sisulu University (WSU). Hensikten med studien vil bli forklart til kvinner som går på svangerskapsklinikken i Umtata General og Nelson Mandela Academic Hospital, Mthatha, Eastern Cape Province. Gravide kvinner som vil være villige til å delta vil bli pålagt å signere informerte samtykkeskjemaer for å delta i studien og for å la barna delta i studien fra fødselen.

III. Studiedesign Et prospektivt case-kontrollstudiedesign vil bli brukt i denne studien.

IV. Utvalgskriterier Kvinner sør for Sahara med singleton ukompliserte 11-14 uker gamle svangerskap, være HIV-positive for casegruppen og HIV-negative for kontrollgruppen. Gravide kvinner med type 2 diabetes, svangerskapsdiabetes, nyre- og kardiovaskulære sykdommer eller enhver kritisk helsetilstand vil bli ekskludert fra studien

V. Forsøksplan

Arbeidspakke 1 (Gravide kvinner):

Tre svangerskapsbesøk vil bli registrert for denne studien - Disse besøkene vil bli gjort i løpet av første, andre og tredje trimester av svangerskapet.

Følgende informasjon og parametere vil bli vurdert under hvert svangerskapsbesøk:

1. Baselineinformasjon: Mors demografiske, obstetriske og familiehistorie med hjerte- og karsykdommer under det første besøket ved hjelp av et spørreskjema - en gang fri ved starten av studien.
2. Antropometriske mål: Høyde og vekt vil bli bestemt i henhold til anbefalingene fra NHANES, 2009-anbefalingene. BMI vil bli beregnet ved hjelp av formelen vekt/(høyde (m) x høyde (m)).
3. Blodtrykksmålinger: Kontorblodtrykk vil bli målt som beskrevet av Muntner et al., (2019) i tre eksemplarer med tre minutters mellomrom etter 10 minutters hvile i sittende stilling. Dette vil bli fulgt av 24 timers ambulatorisk blodtrykksmåling for bestemmelse av dagtid/nattblodtrykk og dyppefenotype.
4. Placental morfometri, arkitektur og vaskularisering: Livmorarterier, navlearterie og midtre cerebral arterie og livmorarteriens gjennomsnittlige pulserende indeks vil bli bestemt ved ultralyd. Føtal cerebroplacental ratio vil bli beregnet når det er mulig.
5. Endotelfunksjonstester: Carotis intima media tykkelse, pulsbølgehastighet og strømningsmediert nedbremsing og retinal arterievurdering vil bli målt ved hjelp av ultralyd og Vicorder (Ellins, 2017). Retinal mikrovaskulatur vil bli studert for å bestemme endotelial funksjon.
6. Markører for endotelfunksjon: Endokan, asymmetrisk dimetylarginin (ADMA) og nitrogenoksid (NO) vil bli analysert med ELISA-sett i henhold til produsentens instruksjoner.
7. Markører for oksidativt stress: Lipidperoksidasjon, total antioksidantkapasitet og 8-hydrokyl-2-deoksyguanin (8-OHdG) vil bli bestemt ved å bruke ELISA-sett i henhold til produsentens protokoller.
8. Lipidprofilindekser: Totalkolesterol, triglyserid, LDL-kolesterol og HDL-kolesterol, og oksidert LDL-kolesterol vil bli målt i henhold til produsentens protokoll.
9. Insulinresistens: Fastende glukose, glykert hemoglobin og insulinkonsentrasjoner vil bli bestemt ved hjelp av sett i henhold til produsentens metoder. HOMA-IR-formelen vil bli brukt til å beregne insulinresistens fra rask glukose og insulin.
10. Nyrefunksjonsindekser: glomerulær filtrasjonshastighet (GFR), kreatinin og albumin vil bli bestemt og forholdet mellom albumin og kreatinin beregnes.

Arbeidspakke 2 (nyfødte):

Under fødselen vil det samles navlestrengsblod for vurdering av markører for oksidativt stress og endotelfunksjon og epigenetiske markører hos fosteret. Følgende data vil bli samlet inn:

1. Antropometriske mål: Vekten, lengden, kranieomkretsen til barnet vil bli målt.
2. Blodtrykksmålinger: Tilfeldig blodtrykk vil bli målt ved hjelp av oscillometri ved bruk av passende mansjetter i armstørrelse. Blodtrykket måles i triplikater med fem minutters intervaller minst én time etter babyens måltid og når babyen sover (Samantha et al, 2015).
3. Markører for endotelfunksjon: Endokan, asymmetrisk dimetylarginin (ADMA) og nitrogenoksid (NO) vil bli analysert med ELISA-sett i henhold til produsentens instruksjoner.
4. Markører for oksidativt stress: Lipidperoksidasjon, total antioksidantkapasitet og 8-hydrokyl-2-deoksyguanin (8-OHdG) vil bli bestemt ved å bruke ELISA-sett i henhold til produsentens protokoller.
5. Lipidprofilindekser: Totalkolesterol, triglyserid, LDL-kolesterol og HDL-kolesterol, og oksidert LDL-kolesterol vil bli målt i henhold til produsentens protokoll.
6. Insulinresistens: glukose og insulinkonsentrasjoner i navlestrengsblod vil bli bestemt i henhold til produsentens metoder. HOMA-IR-formelen vil bli brukt til å beregne insulinresistens.
7. Nyrefunksjonsindekser: glomerulær filtrasjonshastighet (GFR), kreatinin og albumin vil bli bestemt. Albumin til kreatinin-forholdet vil også bli bestemt.
8. Epigenetiske markører: Urinkonsentrasjoner av 5-metyl-2-deoksycytidin og trimetylhiston H3K9 ved bruk av Elisa-sett i henhold til produsentens metoder.

Arbeidspakke 3 (mødre ved 3 måneders oppfølging etter fødsel)

Mødre vil følges opp tre måneder etter fødsel. Under dette besøket vil det ikke bli tatt blod eller urinprøver fra mødrene. Urinprøver vil bli samlet inn fra babyer for måling av CVD-risikoskapere. Følgende data vil bli samlet inn:

1. Antropometriske mål: Høyde og vekt vil bli bestemt i henhold til anbefalingene fra NHANES, 2009-anbefalingene. BMI vil bli beregnet ved hjelp av formelen vekt/(høyde (m) x høyde (m)) for både mor og baby.
2. Blodtrykksmålinger: Kontorblodtrykk vil bli målt som beskrevet av Puntner et al., (2019) i tre eksemplarer med tre minutters mellomrom etter 10 minutters hvile i sittende stilling. Dette vil bli fulgt av 24 timers ambulatorisk blodtrykksmåling for bestemmelse av dagtid/nattblodtrykk og dyppefenotype - mor
3. Blodtrykket vil bli målt i babyen i ryggleie.
4. Endotelfunksjonstester: Carotis intima media tykkelse, pulsbølgehastighet og strømningsmediert nedbremsing og retinal arterievurdering vil bli målt ved hjelp av ultralyd og Vicorder (Ellins, 2017). Netthinnens mikrovaskulatur vil bli studert for å bestemme endotelfunksjonen hos mor.
5. Endotelfunksjonstester: pulsbølgehastighet og strømningsmediert bremse ved bruk av Vicorder i babyen (Ng et al, 2018).

Arbeidspakke 4 (barn):

Data vil bli samlet inn fra barn tre, tolv og tjuefire måneder etter fødselen som følger:

1. Antropometriske mål: Vekten, lengden, kranieomkretsen til barnet vil bli målt.
2. Blodtrykksmålinger: Tilfeldig blodtrykk vil bli målt ved hjelp av oscillometri ved bruk av passende mansjetter i armstørrelse. Blodtrykket måles i triplikater med fem minutters intervaller minst én time etter babyens måltid og når babyen sover (Samantha et al, 2015).
3. Endotelfunksjonstester: pulsbølgehastighet og strømningsmediert nedbremsing ved bruk av Vicorder (Ng et al, 2018).
4. Markører for endotelfunksjon: Urinprøver vil bli samlet inn for Endocan, asymmetrisk dimetylarginin (ADMA) og nitrogenoksid (NO) analyser ved bruk av ELISA-sett i henhold til produsentens instruksjoner.
5. Markører for oksidativt stress: Lipidperoksidasjon, total antioksidantkapasitet og 8-hydrokyl-2-deoksyguanin (8-OHdG) vil bli bestemt i urinprøver ved å bruke ELISA-sett i henhold til produsentens protokoller.
6. Nyrefunksjonsindekser: Urinkreatinin og albumin vil bli bestemt. Albumin til kreatinin-forholdet vil også bli bestemt.
7. Epigenetiske markører: Urinkonsentrasjoner av 5-metyl-2-deoksycytidin og trimetyl Histone H3K9 ved bruk av elisa-sett i henhold til produsentens metoder.
8. Endotelfunksjonstester: pulsbølgehastighet og strømningsmediert nedbremsing ved bruk av Vicorder (Ng et al, 2018).