Кардиометаболическое здоровье детей, подвергшихся антиретровирусной терапии (АРТ) в период внутриутробного развития (ARTMOMSBABES)

I. Расчет размера выборки Количество участников, необходимое для демонстрации статистической значимости, основано на ранее опубликованных исследованиях, в которых оценивалась сосудистая функция у пациентов с ВИЧ (Agu et al., 2019). Вероятность ошибки (α) 0,05, мощность (1-β) 0,80 и средний размер эффекта (d) 0,5 использовались для расчета размера выборки (n = 64 человека). Предполагая, что показатель отсева составляет 25%, мы будем использовать N = (64 + (64*25)/100) = 80 матерей/группу, чтобы гарантировать, что у нас будет достаточный размер выборки/группа для демонстрации статистической значимости. Таким образом, общее количество участвующих матерей составит 160 (80 случаев и 80 контрольных), а их потомков - 160.

II. Этическое одобрение Этическое согласие и разрешение на проведение исследовательского проекта будут получены от Комитета по исследованиям и этике факультета медицинских наук (HRSEC) Университета Уолтера Сисулу (WSU). Цель исследования будет объяснена женщинам, посещающим дородовую клинику в больницах Umtata General и Nelson Mandela Academic Hospitals, Мтата, провинция Восточный Кейп. Беременные женщины, которые захотят участвовать, должны будут подписать формы информированного согласия на участие в исследовании и разрешить своим детям участвовать в исследовании с рождения.

III. Дизайн исследования В этом исследовании будет использован проспективный дизайн исследования случай-контроль.

IV. Критерии отбора Женщины к югу от Сахары с одноплодной неосложненной беременностью в возрасте 11-14 недель, ВИЧ-положительные для основной группы и ВИЧ-отрицательные для контрольной группы. Беременные женщины с диабетом 2 типа, гестационным диабетом, почечными и сердечно-сосудистыми заболеваниями или любым критическим состоянием здоровья будут исключены из исследования.

V. Экспериментальный план

Рабочий пакет 1 (для беременных):

Для этого исследования будут зарегистрированы три дородовых визита. Эти визиты будут проводиться в течение первого, второго и третьего триместров беременности.

Следующая информация и параметры будут оцениваться во время каждого дородового визита:

1. Исходная информация: материнский демографический, акушерский и семейный анамнез сердечно-сосудистых заболеваний во время первого визита с использованием вопросника - один раз в начале исследования.
2. Антропометрические измерения: рост и вес будут определяться в соответствии с рекомендациями NHANES, 2009 г. ИМТ будет рассчитываться по формуле вес/(рост (м) x рост (м)).
3. Измерения артериального давления: офисное артериальное давление будет измеряться, как описано Muntner et al., (2019), в трех повторностях с трехминутными интервалами после 10 минут отдыха в сидячем положении. За этим последует 24-часовое амбулаторное измерение артериального давления для определения дневного/ночного артериального давления и фенотипа падения.
4. Плацентарная морфометрия, архитектура и васкуляризация: маточные артерии, пупочная артерия и средняя мозговая артерия, а также средний пульсационный индекс маточной артерии будут определяться с помощью ультразвука. Цереброплацентарное соотношение плода будет рассчитано, когда это возможно.
5. Функциональные тесты эндотелия: толщина интимы сонной артерии, скорость пульсовой волны и замедление кровотока, а также оценка артерий сетчатки будут измеряться с использованием ультразвукового исследования и Vicorder (Ellins, 2017). Будут изучены микрососуды сетчатки для определения функции эндотелия.
6. Маркеры эндотелиальной функции: Эндокан, асимметричный диметиларгинин (АДМА) и оксид азота (NO) будут анализироваться с использованием наборов ELISA в соответствии с инструкциями производителя.
7. Маркеры окислительного стресса: перекисное окисление липидов, общую антиоксидантную способность и 8-гидроксил-2-дезоксигуанин (8-OHdG) будут определять с использованием наборов ELISA в соответствии с протоколами производителя.
8. Показатели профиля липидов: общий холестерин, триглицериды, холестерин ЛПНП и холестерин ЛПВП, а также окисленный холестерин ЛПНП будут измеряться в соответствии с протоколом производителя.
9. Резистентность к инсулину: концентрация глюкозы натощак, гликированного гемоглобина и инсулина будет определяться с использованием наборов в соответствии с методами производителя. Формула HOMA-IR будет использоваться для расчета резистентности к инсулину по быстрой глюкозе и инсулину.
10. Будут определяться показатели почечной функции: скорость клубочковой фильтрации (СКФ), креатинин и альбумин и рассчитывать отношение альбумина к креатинину.

Рабочий пакет 2 (новорожденные):

Во время родов будет собрана пуповинная кровь для оценки маркеров окислительного стресса и эндотелиальной функции, а также эпигенетических маркеров у плода. Будут собраны следующие данные:

1. Антропометрические измерения: Будут измеряться вес, длина тела, окружность черепа ребенка.
2. Измерения артериального давления: повседневное артериальное давление будет измеряться с помощью осциллометрии с использованием одноразовых манжет, соответствующих размеру руки. Артериальное давление будет измеряться трижды с пятиминутными интервалами, по крайней мере, через час после еды ребенка и во время сна ребенка (Samantha et al, 2015).
3. Маркеры эндотелиальной функции: Эндокан, асимметричный диметиларгинин (АДМА) и оксид азота (NO) будут анализироваться с использованием наборов ELISA в соответствии с инструкциями производителя.
4. Маркеры окислительного стресса: перекисное окисление липидов, общую антиоксидантную способность и 8-гидроксил-2-дезоксигуанин (8-OHdG) будут определять с использованием наборов ELISA в соответствии с протоколами производителя.
5. Показатели профиля липидов: общий холестерин, триглицериды, холестерин ЛПНП и холестерин ЛПВП, а также окисленный холестерин ЛПНП будут измеряться в соответствии с протоколом производителя.
6. Резистентность к инсулину: концентрация глюкозы и инсулина в пуповинной крови будет определяться в соответствии с методами производителя. Формула HOMA-IR будет использоваться для расчета резистентности к инсулину.
7. Будут определяться показатели функции почек: скорость клубочковой фильтрации (СКФ), креатинин и альбумин. Также будет определено отношение альбумина к креатинину.
8. Эпигенетические маркеры: концентрация 5-метил-2-дезоксицитидина и триметилгистона H3K9 в моче с использованием набора ELISA в соответствии с методами производителя.

Рабочий пакет 3 (Матери через 3 месяца после родов)

Матери будут наблюдаться через три месяца после родов. Во время этого визита у матерей не берут ни кровь, ни образцы мочи. Образцы мочи будут собираться у младенцев для измерения факторов риска сердечно-сосудистых заболеваний. Будут собраны следующие данные:

1. Антропометрические измерения: рост и вес будут определяться в соответствии с рекомендациями NHANES, 2009 г. ИМТ будет рассчитываться по формуле вес/(рост (м) x рост (м)) как для матери, так и для ребенка.
2. Измерения артериального давления: офисное артериальное давление будет измеряться, как описано Puntner et al. (2019), в трех повторностях с трехминутными интервалами после 10-минутного отдыха в сидячем положении. За этим последует 24-часовое амбулаторное измерение артериального давления для определения дневного/ночного артериального давления и фенотипа падения - мать
3. Артериальное давление будет измеряться у ребенка в положении лежа на спине.
4. Функциональные тесты эндотелия: толщина интимы сонной артерии, скорость пульсовой волны и замедление кровотока, а также оценка артерий сетчатки будут измеряться с использованием ультразвукового исследования и Vicorder (Ellins, 2017). Будут изучены микрососуды сетчатки для определения функции эндотелия у матери.
5. Функциональные тесты эндотелия: скорость пульсовой волны и замедление потока, опосредованное использованием Vicorder у ребенка (Ng et al, 2018).

Рабочий пакет 4 (ребенок):

Данные будут собираться у детей в возрасте трех, двенадцати и двадцати четырех месяцев после рождения следующим образом:

1. Антропометрические измерения: Будут измеряться вес, длина тела, окружность черепа ребенка.
2. Измерения артериального давления: повседневное артериальное давление будет измеряться с помощью осциллометрии с использованием одноразовых манжет, соответствующих размеру руки. Артериальное давление будет измеряться трижды с пятиминутными интервалами, по крайней мере, через час после еды ребенка и во время сна ребенка (Samantha et al, 2015).
3. Функциональные тесты эндотелия: скорость пульсовой волны и замедление потока с использованием Vicorder (Ng et al, 2018).
4. Маркеры эндотелиальной функции: Образцы мочи будут собираться для анализа Endocan, асимметричного диметиларгинина (ADMA) и оксида азота (NO) с использованием наборов ELISA в соответствии с инструкциями производителей.
5. Маркеры окислительного стресса: перекисное окисление липидов, общая антиоксидантная способность и 8-гидроксил-2-дезоксигуанин (8-OHdG) будут определяться в образцах мочи с использованием наборов ELISA в соответствии с протоколами производителя.
6. Показатели функции почек: определят креатинин и альбумин в моче. Также будет определено отношение альбумина к креатинину.
7. Эпигенетические маркеры: концентрация 5-метил-2-дезоксицитидина и триметилгистона H3K9 в моче с использованием набора для ELISA в соответствии с методами производителя.
8. Функциональные тесты эндотелия: скорость пульсовой волны и замедление потока с использованием Vicorder (Ng et al, 2018).