자가 면역 질환에서 자가 입양 T 조절 세포 전이.

자가면역질환은 자기항원에 대한 내성이 무너져 발생하는 만성질환이다.

; 하나의 가설은 Treg(CD4+CD25+FpxP3CD127-T-조절) 세포 수 감소 또는 기능 장애와 관련된 중추 및 말초 내성의 실패를 포함합니다(6).

전임상 연구에서 인간 CD4+CD25+CD127- Treg 세포는 이식편대숙주병(GvHD)(7, 23), 자가면역 질환(13,22) 및 이식편 거부반응 지연(19, 26)에 효과적인 것으로 나타났습니다. ).

긍정적인 결과는 Treg 세포를 인간 질병 치료에 적용하는 근거를 제공했으며, 2009년에 발표된 Treg 세포 연구자를 대상으로 한 첫 번째 임상 시험 결과를 발표했습니다(24).

이 연구는 무엇을 추가합니까? 이것은 연구소에서 이용 가능한 기본 치료 치료에 반응하지 않는 불응성 자가면역 질환 환자를 위한 치료 시험으로서 이집트에서 입양 Treg 세포 전달에 대한 첫 번째 중재 연구입니다. 이 Treg 세포의 분리는 이집트 환자에서 수행되었지만 기술 연구로만 수행되었습니다(아래 언급됨).

연구자들은 비용이 많이 들기 때문에 연구 자금을 확보하기 위해 성공의 기회를 주기 위해 두 가지 질병을 선택합니다. 연구자들은 이 두 가지 질병(성인의 난치성 루푸스 신염 및 1형 당뇨병, 국제 출판에서 가장 흔한 임상시험임)을 선택했습니다.

조사자들은 불응성 자가면역 질환(불응성 루푸스 신염 및 성인 1형 진성 당뇨병) 환자에 대한 자가 입양 Treg(CD4CD25FoxP3 CD127 낮은 규제) 세포 전달의 안전성과 효능을 평가할 것입니다.

2.연구 질문/목표/목적 연구자들은 불응성 루푸스 신염이 있는 SLE 환자와 성인 1형 진성 당뇨병 환자에게 자가 입양 Treg(CD4CD25FoxP3 CD127낮은 조절) 세포 이전의 안전성과 효능을 평가할 것입니다.

AE의 모니터링 계획은 CTCAE(5)를 사용하여 전신 및 국소 유해 사례를 확인하는 프로토콜에 문서화되어 있습니다. 안전성 평가는 유해 사례(AE)의 지속적인 모니터링 및 보고로 구성됩니다(월간 방문 또는 모바일 연락 또는 외부로 임상적으로 지시됨). 환자 방문); 활력 징후 모니터링, 신체 검사 및 검사실 평가. 발생할 수 있는 모든 AE에 대해 정확한 문서화 및 적절한 관리가 수행됩니다(표시된 대로 외래 환자 및 입원 환자 단위에서). 환자는 부작용을 감지하기 위해 매월 진찰을 받거나 Mobil 담당자가 임상적으로 평가합니다. 다음이 평가됩니다.

1. 백혈구 수(WBC)와 차등 수 , 적혈구 수(RBC), 혈소판 수(PLT), 헤모글로빈(Hb) 및 헤마토크리트(Hct).

2. 간 기능, 신장 기능 검사 및 전해질 측정.

   입양 Treg 세포 전달의 효능:

   • 임상 평가: 기본 데이터와 비교하기 위해 질병 활동 점수(임상 및 실험실) 평가와 함께 전체 병력 수집 및 철저한 임상 검사.

   • 자가면역질환 유형에 따른 검사실 검사:

     1. 질병 악화 감지를 위한 실험실 테스트,
     2. CD4CD25FoxP3,CD127말초혈액 시료의 낮은 세포수,
     3. 혈청 사이토카인 검출(INF-gama,TNF-alpha,IL1,IL2,TGF-beta,IL-10,IL-17)

   • 자가면역질환의 종류에 따라 필요한 경우 방사선학적 평가:

     1. 초음파
     2. CT 스캔
   • 연구원들은 투여 3개월 후, 6개월 후 및 1년 후 T reg 세포 주입의 효능을 감지할 것입니다.
3. 방법론:

연구 유형: 비무작위 공개 라벨 1상 파일럿 연구 연구 설정: 책임 표(표 1): 아래 참조 연구 기간: 2년.

연구 모집단:

• 불응성 루푸스 신염이 있는 10명의 전신성 홍반성 루푸스(SLE) 환자: 포함 및 제외 기준
• 10명의 제1형 당뇨병 환자: 포함 및 제외 기준

샘플링 방법:

미리 설정된 포함 및 제외 기준을 따르는 목적이 있는 샘플.

표본의 크기:

연구자들은 파일럿 연구로 각 자가면역 질환에 10명의 환자를 포함할 것입니다.

연구 절차:

• 초진: ASU 병원 내과에서 위에서 언급한 기준에 따라 류마티스내과 팀과 내분비내과 팀이 환자를 선택합니다. 전체 실험실 및 면역학적 조사는 ASU 병원 중앙 실험실에서 수행됩니다. ASU 병원의 내과 외래 환자 클리닉의 간호사는 모든 사례에서 혈액 샘플을 채취합니다. 환자는 ASU 병원의 무선 진단 부서에서 필요한 모든 이미징 양식을 수행합니다. Rheumatology 팀과 Endocrinology 팀은 연구에 포함된 모든 환자로부터 서면 동의를 받을 것입니다.
• 2차 방문: 1차 방문 후 1주일 이내. 환자는 내과로 올 것입니다. 모든 환자는 질병의 중증도 또는 활동성을 감지하기 위해 지시된 대로 임상, 검사실 및 방사선학적으로 평가됩니다. 환자는 Treg 세포 분리를 위해 무균 상태에서 말초 혈액 샘플링을 위해 의학 연구 센터로 이동합니다. 연구센터와 진료과의 거리는 약 200m 입니다. 병원이송차량은 환자(골프카) 50m 도보 후 150m 이동합니다.
• 세 번째 방문: (두 번째 방문 후 6주 후): 환자는 T reg 세포 주입 투여를 위해 알레르기 및 면역학 팀의 감독하에 의학 연구 센터 입원을 위해 올 것입니다. 알레르기 및 면역학 팀은 주입 후 24시간 동안 환자를 추적할 것입니다.
• 유해 사례의 탐지는 매월 확인됩니다. 모든 부작용을 기록하기 위해 환자와 류마티스, 내분비 및 임상 면역학 팀 간의 모바일 접촉이 유지됩니다.
• 네 번째 방문: (세 번째 방문 3개월 후):의료팀은 T reg 주입 3개월 후 ASU 중앙 실험실 및 ASU 방사선과에서 전체 실험실, 면역학적 및 방사선학적 후속 조치를 수행할 것입니다. 질병의 활성 및 중증도의 임상 점수화 및 검출이 기록될 것이다.
• 주입 6개월 후 다섯 번째 방문. 방문 4와 동일하게 수행됩니다.
• 부작용을 감지하기 위해 1년 후 최종 방문.
• 윤리 위원회는 면역학 류마티스학 및 내분비학 팀이 기록한 대로 T reg 세포 주입을 받은 각 환자의 마지막 6단계에 대한 모든 임상 및 실험실 데이터를 포함한 전체 보고서를 통해 통보를 받습니다. 그림 2는 절차 및 후속 조치에 대한 계획을 보여줍니다.

모든 환자는 다음의 대상이 됩니다.

첫 방문 시

• 자가면역질환 유형에 따른 중증도 평가 및 임상적 질병 활성도 평가를 포함한 전체 병력 청취 및 임상 검사.
• 차등 WBCS 카운트, 총 림프구, 적혈구 카운트(RBC), 혈소판 카운트(PLT), 헤모글로빈(Hb) 및 헤마토크리트(Hct)를 사용한 전처리 조사 CBC
• 간 기능, 신장 기능 검사 및 전해질(Na, K 및 Ca) 평가.
• 간 기능 검사: 혈청 알부민, PT 및 INR .빌리루빈 총 및 직접 .AST ,ALT, Alkaline phosphatase, 혈청 알부민.
• 신장 기능 검사(혈청 크레아티닌, BUN) 및 전해질(혈청 Na, K 및 Ca)
• ESR 및 CRP.
• 유동세포계수법에 의한 개입 전, 개입 3개월 후 및 6개월 후 CD4+CD25+FoxP3+CD127- 세포 수의 평가.
• 모든 환자에 대한 혈청 검사: INF-감마, TNF-알파, IL-17, IL-2, IL-10 및 TGF-베타. 모든 사이토카인은 입양 T reg 수혈 전, 수혈 3개월 후 및 6개월 후 ELISA 테스트로 수행됩니다.
• 자가면역질환의 유형에 따라 그리고 필요한 경우 방사선과 검사.
• 자가면역 질환에 따른 실험실 테스트:

SLE 환자:

• 공복 및 식후 2시간 혈당, 전체 혈구 수(CBC), 전체 소변 분석,
• 24시간 소변 내 단백질 측정(g/24시간).
• 항핵항체(ANA) 역가 및 패턴 및 항이중가닥 DNA 항체(항dsDNA 측정은 면역형광법으로 수행되며 역가가 1/40 이상인 경우 양성으로 간주됨)
• 혈청 보체 수준(C3 및 C4).

T1D 환자:

• 단식 C-펩티드 수치,
• 공복 혈당, HbA1c 및
• T1D 자가항체[글루탐산 데카르복실라제 자가항체(항-GAD65), 인슐린 자가항체(IAA), 인슐린 항원 2 항체(IA2) 또는 아연 수송체 8 자가항체(항-ZnT8)] 수준을 측정합니다.

혈액 샘플 관련: 혈액 샘플의 빈도와 양에 관한 당사의 계획은 다음과 같습니다.

A- 주파수:

• 중재 3개월 후 및 6개월 후 CBC, KFT, LFT, 전해질에 대한 기준선.
• 주입 전, 3개월 후 및 6개월 후 T reg 카운트 검출
• 2등급 이상 이상반응의 경우.

B 금액:

• 기준선 평가 및 준비용: 6ml(2ml * 튜브 3개). T reg 주입 3개월 후와 6개월 후 동일한 양.
• T reg 카운트의 검출: 혈액학 및 화학을 위한 4 ml(2ml* 2 튜브).
• T reg 세포의 분리 배양 및 확장을 위해: ( 400ml )
• 부작용의 경우: 임상적으로 지시된 대로 2ml에서 4ml로. 조절 T 세포(Treg) 식별 및 계수(10) 인간 Treg에 대한 유세포 분석법을 사용한 식별 및 계수는 양성 및 음성 세포 마커 모두를 기반으로 하며 인간 Treg는 (CD4+, CD25+, CD127-, Foxp3+)입니다.

확장된 Treg의 동결 보존:

세포 제품을 여러 번 주입할 수 있도록 하기 위해 Treg 동결 보존 가능성을 사용할 것입니다. Treg의 동결 보존은 임상 경로를 지원하기 위한 투여의 유연성을 허용하고 필요한 모든 방출 분석의 완료를 용이하게 합니다. ( 10 ) T reg 세포의 투여 및 부작용의 추적 혈액 화학 및 혈액학의 결과를 검토하고 세포 주입 전에 최근 질병 또는 발열의 병력을 얻을 것입니다. 환자는 파라세타몰과 디펜히드라민으로 사전 투약을 받게 됩니다. Poly t regs는 10~30분에 걸쳐 말초 정맥 주사 라인을 통해 주입됩니다.

활력징후는 주입 전후에, 최소 1시간 동안은 15분마다, 그 다음 처음 4시간 동안은 매시간, 20시간 동안은 4시간마다 측정됩니다. 다음 날 임상 연구 단위에서 퇴원하기 전에 화학 및 감별 혈구 수를 포함한 전체 혈구 수를 반복합니다. 주입 후 4일째, 4주 동안 매주, 13주 후, 26주 후에 후속 평가를 위해 환자를 볼 것입니다. 부작용에 대한 전화 모니터링은 주입 후 1년 동안 계속되고 최종 클리닉 방문이 이어집니다.

생체 외 확장 T reg의 용량은 모든 환자에게 동일합니다. 그것은 5x10^6-1x10^8 세포 IV 주입 IV 주입의 증가하는 용량으로 투여될 것입니다. 안전성을 달성하기 위한 이전 국제 치료 코호트의 최소 용량입니다(14).

윤리적 고려

1. 위험 및 위험 최소화:

   • 초음파 의료 이미징의 가능한 위험: 초음파 의료 이미징은 위험을 나타내지 않고 부작용을 일으키지 않는 환자를 평가하는 빠르고 안전한 방법입니다. 그들은 환자의 원래 상태에 어떤 변화도 일으키지 않지만 통증이나 타박상과 같은 드문 문제가 있을 수 있습니다.
   • 정맥 천자의 합병증: 혈종 형성, 신경 손상, 통증, 혈액 농축, 혈관외 유출, 의원성 빈혈, 동맥 천자, 점상출혈, 감염, 실신 및 기절, 과도한 출혈, 부종 및 혈전. 이러한 위험을 최소화하기 위해 자격을 갖춘 간호사가 무균 상태에서 복용합니다.

   • 감염 위험: T reg 세포 분리 및 확장은 엄격한 멸균 환경에서 수행됩니다. 확장 및 품질 관리 동안 빈번한 멸균 기술을 따를 것이며, 입양 T 세포 전달 전에 릴리스 분석을 수행할 것입니다.

     ● 환자에게서 400cc의 혈액을 채취할 때의 부작용: 헌혈과 같이 드물게 정맥에서 바늘을 제거할 때 국소 외상성 혈종이 발생합니다. 국소 압력을 유지하고 얼음 또는 냉찜질을 해당 부위에 적용하면 혈종의 발생 또는 진행을 예방하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이러한 혈종은 일반적으로 작으며 큰 문제를 일으키지 않습니다. 현기증, 발한, 실신도 발생할 수 있으며, 환자가 몇 분 동안 기대어진 자세로 앉도록 요구하고 가능하면 천천히 직립 자세로 이동하여 주사를 놓을 장소로 이동함으로써 피할 수 있습니다. 먹고 마실 것. 혈액을 채취한 후 몇 시간 동안 수분 섭취량을 늘리는 것이 좋습니다. Treg 분리를 위해 혈액을 빼기 전에 환자의 Hb 수치는 11g/dl 이상이어야 합니다. 조사관은 임상적으로 필요한 경우 제공하기 위해 채혈 전에 포장된 RBC를 준비할 것입니다.

   • 감염/염증 위험: Treg 세포 분리 및 확장은 엄격한 멸균 환경에서 수행됩니다. 확장 및 품질 관리 중에 빈번한 무균 기술을 따르고 입양 T 세포 이전 전에 릴리스 분석을 수행합니다. 승인된 릴리스 기준에는 다음이 포함됩니다.

2. 중단 기준(연구 및 등록 종료) 개별 피험자에 대한 안전 중단 규칙

   다음 중 하나를 경험하는 모든 피험자에서 치료가 중단됩니다.

   • 임의의 SAE, 또는 임상적으로 유의한 등급 4 AE 또는 T reg 주입과 관련될 합리적인 가능성이 있는 것으로 조사자가 간주하는 개별 피험자에 대한 확인된 등급 4 실험실 이상. 심한 두통과 같은 주요 장기 기능 장애를 반영하지 않는 주관적인 임상 증상은 연구자의 판단에 따라 치료 중단을 정당화할 수도 있고 그렇지 않을 수도 있습니다.
   • 피험자는 언제든지 자발적으로 치료를 중단하거나 연구를 중단할 수 있습니다.
   • 또한 조사자가 연구를 계속하면 피험자에게 상당한 안전 위험이 발생할 것이라고 판단하는 경우 언제든지 연구에서 제거될 수 있습니다.
   • 프로토콜 요구 사항을 지속적으로 준수하지 않음 연구 치료를 조기에 중단한 피험자는 주요 연구 결과 데이터에 대한 지속적인 후속 조치에 대해 설명된 것과 동일한 프로토콜 일정 및 평가를 유지하도록 권장해야 합니다.

   연구 중단 규칙

   이 임상 시험은 다음과 같은 이유로 일시 중지됩니다.

   • 조사관에 의해 사망 ​​원인이 연구 중재와 관련된 합리적인 가능성이 있다고 판단되는 모든 피험자의 사망.
   • 등록된 피험자의 >20%가 임상적으로 유의한 등급 3/4 AE 또는 확인된 등급 3/4 실험실 이상을 조사자가 고려하여 연구 중재와 관련된 타당한 가능성이 있는 것으로 간주합니다.
   • 조사관은 연구에 포함된 각 환자의 모든 세부 정보를 윤리 위원회에 알립니다.조사관 윤리 위원회가 위원회 규칙에 따라 중단하라고 통보하면 연구를 중단할 것입니다.

3. 이익:

   환자를 위한 직접적인 혜택:

   • 주입된 T 조절 세포에 의해 직접 환자의 자가면역 질환의 완화. 질병의 중증도와 활동도 점수를 파악하고 후속 조사를 통해 확인합니다.
   • 입양 T 세포 이식은 불응성 자가면역 질환 환자에게 통제 기회를 제공할 것입니다.

   간접적 혜택

   • 입양 T reg 세포 전달은 면역억제 약물에 의한 면역계의 전반적인 억제 없이 자가면역 질환 제어를 가능하게 합니다.
   • Treg 전이는 자가면역 질환 조절에 도움이 되며 만성 진행성 이환율 및 사망률로부터 환자를 보호합니다.
   • 다른 치료 옵션에 비해 비싸지 않아 경제성을 확보할 수 있습니다.
   • 입양 Treg 세포는 부작용에 덜 취약한 자가 세포입니다(안전성 달성).
   • 기존의 이용 가능한 치료법에 반응하지 않고 국제 가이드라인에 나열된 다른 이용 불가능한 치료 옵션에 도달할 수 없는 진행성 자가면역 질환 환자에게 큰 희망이 됩니다. 이러한 진행 단계에서 입양 T 세포는 환자의 삶의 질, 내약성 및 순응도를 더 향상시킬 수 있습니다.
   • 이 연구의 긍정적인 결과는 이집트 시민의 복지에 크게 기여합니다.
   • 저렴한 치료를 통해 진행성 자가면역질환 환자의 상당수를 도와 이집트 정부의 재정 부담을 줄일 수 있습니다.
   • 자가면역 환자를 위한 이러한 혁신적인 치료 라인을 제공함으로써 전 세계 국가 대학의 순위를 높일 것입니다.
   • 이 분야에서 폭넓은 단계를 진행하면 질병 진단 기준을 완료하기 전에 자가면역 질환을 예방하거나 중추 관용을 보존하고 이러한 질병의 발생을 예방하기 위해 입양 T 세포 이식을 사용하는 역에 도달할 수 있습니다. 이것은 자가면역질환 분야에서 큰 도약으로 여겨질 것입니다.
4. 개인정보 및 기밀성 조사관은 완전한 기밀을 유지하며, 주 연구원을 제외하고는 그 누구도 우리 환자의 의료 정보를 읽을 권리가 없습니다. 연구가 완료되면 환자의 연구 결과와 환자의 건강 상태에 관한 추가 정보가 통보됩니다. 개인의 기밀은 연구에서 나온 모든 출판 및 서면 데이터에서 유지됩니다.

5. 참여 대안:

   환자는 언제든지 연구를 거부하거나 철회할 권리가 있습니다. 이 연구 참여를 거부하는 경우 환자는 후속 조치를 취하고 계획대로 치료를 받게 됩니다. 환자는 환자의 의료 서비스가 부족하거나 손실되지 않고 언제든지 연구 참여를 중단할 수 있습니다.

6. 동의 절차:

류마티스 및 내분비학 조사관(ASU) 병원은 서면 동의를 얻습니다. 동의는 첫 번째 방문 중에 언급된 조사관이 환자에게 수행합니다. 글을 읽을 수 있는 개인은 동의서를 읽고 언급된 조사관의 설명을 읽을 수 있으며, 글을 모르는 개인은 동의서를 읽고 설명을 듣게 됩니다.