생체 내 인간 멜라닌 세포에서 UV 및 가시광선 유도 유전자의 단일 세포 Transcriptome 식별 (melatrans)

의학적 상태 및 병리학은 피부 색소 침착을 연구했습니다. UV 연구의 타당성/근거는 피부 색소침착에 대한 생리학적 자극이자 흑색종의 주요 병인학적 요인입니다. 최근 가시광선(파란색)도 명백한 발암성 효과 없이 피부 색소 침착을 유발하는 것으로 설명되었습니다. 멜라닌 세포에서 UV에 의해 유도된 유전자를 확인하고 광유도 피부 색소 침착의 원인이 되는 메커니즘을 이해하기 위한 연구가 수행되었습니다. 그러나 표피에 있는 이러한 세포의 희소성(세포의 3%)은 지금까지 이 목표를 달성하는 데 극복할 수 없는 장애물이었습니다. 데이터가 훨씬 더 고르지 않은 가시 광선에 대해서도 마찬가지입니다. 단일 세포 또는 단일 핵 수준에서 전사체 분석 기술의 출현으로 우리는 이 장애물을 극복하고 다른 피부 세포(각화 세포, 섬유아세포)뿐만 아니라 멜라닌 세포에서 UV 및 청색광의 전사 효과를 식별할 수 있습니다. 멜라닌 세포 및 기타 세포에서 UV 및 청색광에 의해 조절되는 분자 메커니즘을 이해하면 피부 색소 침착의 새로운 핵심 단계를 밝힐 수 있습니다. 우리 연구의 데이터는 색소 병리학에 대한 새로운 치료법뿐만 아니라 새로운 광 보호제를 개발하는 데 사용될 것입니다. 일차 목적 태양 자외선(UV) 방사 또는 생체 내 인간 멜라닌 세포의 청색광에 의해 유도된 유전자 발현의 변화를 설명합니다. 2차 목표 자외선(UV) 방사선 햇빛 또는 다른 피부 세포의 청색광에 의해 유도된 유전자 발현의 변화를 설명합니다. 평가 기준 단일 세포 전사체 분석 피부 절편에 대한 면역 표지 인구 및 포함 수 건강한 남성 지원자, Fitzpatrick 척도의 사진형 III, 연령 25+5세 및 유사 비만(체질량 지수 20~28). 2개 포함 연구 기간 총 연구 기간: 12개월 포함 단계 기간: 1개월 환자 참여 기간: 11일 방법론 건강한 지원자 2명이 팔뚝 부위의 UV 또는 가시광선에 노출됩니다. 흡인 물집 및 피부 생검은 테스트 영역에서 수행되며 전사체를 위한 흡인 거품, 면역조직화학을 위한 생검이 수행됩니다. 다양한 세포 유형에서 유전자 발현에 대한 연구는 10X 유전체학 접근법을 사용하여 단일 세포에서 RNA-Seq에 의해 수행됩니다. 마지막으로 결과의 검증은 특정 항체 또는 RNA-Scope로 면역염색을 통해 수행됩니다. 연구 과정 - 1일차: 연구는 팔뚝 부위의 각 피험자에 대한 최소 홍반 투여량(MED)을 결정하는 것으로 시작됩니다. 이 결정은 6개의 선택된 테스트 영역(각 1.3 cm²)에서 UVB + UVA 광선(시뮬레이션된 태양 자외선 스펙트럼)의 25% 증가 단계에서 6개의 다른 선량을 투여하여 수행됩니다. 노출 부위는 2일 노출 후 24 + 2시간에 평가하고, 홍반은 2일에 평가합니다: DEM 판독, 팔뚝 부위의 두 영역에 각각 2 DEM UV 및 48J/ 가시광선에서 cm2. 세 번째 비조사 영역은 컨트롤 역할을 합니다. 3일차: 피부 수포 및 생검이 3개의 테스트 영역 각각에서 수행됩니다. 수포액에 수집된 세포는 전사체 및 면역조직화학에 의한 확인을 위한 생검에 사용됩니다. 11일: 대상체는 샘플링일로부터 8일 후, 즉 봉합사 제거 및 치유 모니터링을 위해 11일에 다시 보게 될 것이다. 같은 날, 각 테스트 영역에서 유도된 UV 색소 침착 수준에 대한 평가는 육안 및 비색법으로 수행됩니다.