体内人黑素细胞中紫外线和可见光诱导基因的单细胞转录组鉴定 (melatrans)

医学状况和病理学研究了皮肤色素沉着。 研究的理由/基本原理 紫外线既是皮肤色素沉着的生理刺激，也是黑色素瘤的主要病因。 最近，可见光（蓝光）也被描述为诱发皮肤色素沉着，但没有任何明显的致癌作用。 已经进行了研究以确定黑色素细胞中紫外线诱导的基因，并了解光诱导皮肤色素沉着的机制。 然而，这些细胞在表皮中的稀有性（占细胞的 3%）迄今为止一直是实现这一目标的不可逾越的障碍。 可见光也是如此，其数据更加零散。 单细胞或单核水平转录组分析技术的出现将使我们能够克服这一障碍，并确定紫外线和蓝光在原位黑色素细胞以及其他皮肤细胞（角质形成细胞、成纤维细胞）中的转录效应。 了解黑色素细胞和其他细胞中紫外线和蓝光调节的分子机制将揭示皮肤色素沉着的新关键步骤。 我们研究的数据将用于开发新的光保护剂以及色素病变的新疗法。 主要目标描述在体内人类黑素细胞中由太阳紫外线 (UV) 辐射或蓝光诱导的基因表达变化。 次要目标描述其他皮肤细胞中由紫外线 (UV) 辐射阳光或蓝光引起的基因表达变化。 评估标准 单细胞转录组分析 皮肤切片的免疫标记 人群和内含物数量 健康男性志愿者，菲茨帕特里克量表照片类型 III，年龄 25 + 5 岁，肥胖程度相似（体重指数在 20 和 28 之间）。 2 研究持续时间 研究总持续时间：12 个月 纳入阶段持续时间：1 个月 患者参与持续时间：11 天 方法论 两名健康志愿者的前臂区域将暴露在紫外线或可见光下。 抽吸水泡，将在测试区域进行皮肤活检，抽吸泡用于转录组，活检用于免疫组化。 将使用 10X 基因组学方法，通过单细胞 RNA-Seq 对不同细胞类型中的基因表达进行研究。 最后，将通过使用特定抗体或 RNA-Scope 进行免疫染色来验证结果。 研究过程 - 第 1 天：研究从确定每个受试者前臂区域的最小红斑剂量 (MED) 开始。 该测定将通过在六个选定的测试区域（每个 1.3 平方厘米）上以 25% 的 UVB + UVA 射线（模拟太阳紫外线光谱）的递增阶段施用六种不同剂量来进行。 暴露区域将在第 2 天暴露后 24 + 2 小时进行评估，红斑将在第 2 天进行评估：读取 DEM，并在前臂区域的两个区域分别使用 2 DEM UV 和 48J/ cm2 在可见光下。 第三个未照射区域将用作对照。 第 3 天：将在三个测试区域中的每一个区域进行皮肤水泡和活组织检查。 收集在水泡液中的细胞将用于转录组和活检，以通过免疫组织化学进行验证。第 11 天：在采样日后八天，即第 11 天，将再次看到受试者，以拆除缝线并监测愈合情况。 在同一天，将通过视觉和比色法对每个测试区域引起的紫外线色素沉着水平进行评估。