소아 CD 환자의 간 지방증

배경 셀리악병(CD)은 글루텐(밀의 필수 성분) 섭취로 인해 유발되는 자가면역성 장병으로, 유전적 소인(인간 백혈구 항원 DQ2/DQ8)을 특징으로 합니다. 이는 위장관(설사, 복통, 유성증 등)과 전신성(무력증, 두통, 피부 증상, 빈혈, 아미노전이효소 증가 등)을 모두 특징으로 하며 전 세계적으로 약 1%의 유병률로 추정되는 광범위한 병리학입니다. 성인과 어린이 모두에게 나타나는 증상으로, 일반적으로 식단에서 글루텐을 제거하면 해결됩니다(Gluten-Free Diet, GFD). 그러나 10년 동안 CD 진단이 증가하더라도 여전히 진단이 부족한 상태로 남아 있습니다(현재까지 이탈리아의 전체 유병률은 0.37%, 시칠리아에서는 0.35%입니다).

비록 CD가 종종 흡수 장애 증상(지방변, 체중 감소, 영양 결핍 등)과 연관되어 있지만, 영향을 받는 대상의 수가 점점 더 늘어나고 있으며 과체중이거나 비만입니다. 소수/무증상 피험자에서 가장 자주 발견되는 조건 중 하나는 트랜스아미나제의 증가이며, 이는 종종 GFD 시작 후 완전히 퇴행됩니다.

최근에는 특정 간 장애가 CD로 고통받는 환자에게 특정 관련성을 보여주었고, 유럽 소아 지방변증 연구 협회(ESsCD)에서는 이를 CD 대상자에서 검사해야 할 가능한 동반 질환 중 하나로 인용했습니다. -알코올성 지방간 질환(NAFLD). 이 질환은 과체중 또는 비만 어린이의 약 34%에게 영향을 미치며 어린이와 성인 모두에서 대사 증후군의 전형적인 특징과 밀접하게 관련되어 있어 오늘날 대사 장애 관련 지방성 간 질환(Metabolic Dysfunction-Associated Steatotic Liver Disease, MASLD). 성인의 경우 CD와 NAFLD 사이의 비무작위 연관성이 입증되었으며 NAFLD 환자 중 2~14%의 CD 유병률을 보여줍니다. 소아 연령에서 이와 동일한 측면에 초점을 맞춘 연구는 거의 없지만 NAFLD 아동의 CD 유병률은 일반 소아 인구의 CD 유병률과 유사할 수 있다고 보고되었습니다. 그럼에도 불구하고, CD에 걸린 어린이 11,488명(0-19세)을 건강한 어린이(동일 연령 및 성별) 57,029명과 비교하여 실시한 연구는 소아기 CD와 NAFLD 사이의 밀접한 연관성에 대한 가설을 뒷받침합니다. 저자는 4.6(95% 신뢰 구간=2.3-9.1)을 입증했습니다. CD 환자에서 NAFLD의 상대 위험 값.

이 연관성에 책임이 있다고 추정되는 몇 가지 요인이 옹호되었습니다. 1) 지방과 설탕이 풍부하고 섬유질이 낮은 GFD 채택으로 인한 식이 불균형; 2) 장 내강에서 박테리아 물질의 전위가 증가하여 크론병 환자의 전형적인 장 투과성의 변화, 문맥 순환에 들어가자마자 간으로 직접 운반되어 중재된 염증 과정을 일으킬 수 있음 도구 유사 수용체 4(TLR4)-지질다당류(LPS)-지질다당류 결합 단백질(LPB) 복합체에 의해 활성화된 활성화된 B 세포(NF-kB)의 핵 인자 카파-경쇄 강화제에 의해 염증 유발 물질 생성 사이토카인[종양 괴사 인자(TNF)-α, 인터루킨(IL)-1β, IL-6, IL-12, IL-18); 3) 장내 미생물의 변화. 이는 영양분 흡수를 변화시킬 수 있을 뿐만 아니라 점막 손상을 증폭시킬 수도 있습니다.

목표

이 연구의 목적은 다음과 같습니다.

1차 목적: CD의 영향을 받은 소아 집단에서 NAFLD의 유병률을 소급적으로 정의하고 GFD와의 가능한 연관성을 연구합니다.

목표 1.1: 아동병원 "G. 소아과 클리닉"에서 이미 진단받은 소아 복강 집단에서 GFD 도입 전(따라서 CD 진단 전) NAFLD의 유병률을 확인합니다. Di Cristina"; 목표 1.2: 아동 병원 "G. Di Cristina"; 목표 1.3: GFD 전후 데이터를 모두 이용할 수 있는 모든 소아 복강 환자에서 GFD 도입 전후(최소 12개월)의 NAFLD 유병률을 비교합니다. 목표 1.4: 가능한 잠재적으로 걸리기 쉬운 소아 지방변증 어린이의 하위 그룹을 식별하기 위해 GFD 채택 전(표적 인구 1.1)과 후(표적 인구 1.2)의 NAFLD 존재/부재와 임상, 실험실, 면역학적, 유전적 및 조직학적 매개변수 사이의 상관관계 목표 1.5: 목표 1.3에 언급된 집단의 임상적, 실험실적, 면역학적, 유전적 및 조직학적 매개변수의 변화를 확립하고 이러한 변화와 NAFLD의 발병/퇴행 가능성 사이에 상관관계가 있는지 여부를 확립합니다.

2차 목표: CD에 걸린 어린이의 NAFLD 발병에서 장 투과성 변화 및/또는 장 점막 손상 및/또는 전염증 상태의 가능한 역할을 정의합니다.

목표 2.1: 아동 병원의 소아과 진료소 "G. 디 크리스티나' GFD(T0) 시작 전.

목표 2.2: GFD(T0)가 시작되기 전에 2.1항에 언급된 집단에서 염증의 혈액 표지자가 존재할 가능성을 확인합니다.

목표 2.3: 변형된 장 투과성 및/또는 점막 손상 및/또는 염증의 마커와 GFD 시작 전(T0) 항목 2.1에 언급된 집단에서 NAFLD의 존재 사이의 연관성 존재를 정의합니다.

목표 2.4: GFD를 엄격히 준수한 지 6개월 후 2.1에 언급된 집단에서 장 투과성 변경 및/또는 점막 손상의 혈청학적 지표의 변화를 평가합니다(T1).

목표 2.5: GFD(T1)를 6개월 동안 엄격하게 준수한 후 2.1항에 언급된 집단에서 염증의 혈액 표지자에 대한 모든 변화를 평가합니다.

목표 2.6: GFD를 엄격하게 준수한 지 6개월 후 2.1에 언급된 집단에서 장 투과성 변경 및/또는 점막 손상 및/또는 염증의 마커와 NAFLD의 존재 사이의 연관성 존재를 정의합니다(T1). .

재료 및 방법 1차 목적 연구의 1차 목적을 달성하기 위해, 아동 병원의 소아과 진료소에서 유럽 소아 위장병학 간장 및 영양 학회(ESPGHAN) 기준에 따라 이미 진단된 크론병을 앓고 있는 소아 환자의 모든 의료 기록을 " G. 디 크리스티나'를 회고적으로 분석할 예정이다.

목표 1.1, 1.2 및 1.3 목표 1.1 및 1.2를 달성하기 위해 복부 초음파로 진단된 지방증의 존재 및 정도는 GFD 시작 전(목표 1.1) 또는 GFD 도입 후 최소 12개월 후에 평가됩니다(목표 1.2).

목표 1.3을 달성하기 위해 GFD 도입 전후에 복부 초음파 검사를 받은 모든 환자에서 지방증의 존재 및 정도에 대한 하위 분석이 수행됩니다.

간 지방증은 초음파 검사로 확인되며 다음과 같이 분류됩니다: 간의 반향구조가 정상인 경우 결석(점수 0); 경도(점수 1), 간 에코 발생이 경미하고 광범위하게 증가하고 문맥 벽과 횡경막이 정상적으로 시각화되는 경우; 중등도(점수 2), 간 에코발생성이 중등도로 증가하고 문맥벽과 횡경막의 모양이 약간 변경된 경우; 중증(점수 3), 간 에코 발생이 현저하게 증가하고 문맥 벽, 횡경막 및 우간엽의 후방 부분이 제대로 보이지 않거나 보이지 않는 경우.

목표 1.4 및 1.5 목표 1.4를 달성하기 위해 임상(성별, 민족, 진단 연령, BMI, 증상, GFD 기간), 실험실(트랜스아미나스혈증, 알부민혈증, 총 콜레스테롤혈증 및 하위 클래스, 중성지방혈증, 공복 혈당증, 인슐린혈증, 항상성)을 수집합니다. 모델 평가 - 인슐린 저항성 HOMA-IR 지수), 면역학적[항글리아딘 항체(AGA), 항조직 트랜스글루타미나제 항체(tTG), 항내분비 항체(EMA)], 유전학적(HLA 구조) 및 조직학적(습지 십이지장 조직학적) 분류, 호산구성 침윤의 존재 등) GFD 도입 전(표적 집단 1.1)과 후(표적 집단 1.2) 모두 포함된 모든 환자의 데이터.

목표 1.5를 달성하기 위해 목표 1.4에서 분석된 것과 동일한 임상적, 실험실적, 면역학적, 유전적 및 조직학적 매개변수가 GFD 도입 전후 모두에서 분석될 것입니다. 목표 1.3에 언급된 집단에서 NAFLD의 발병/퇴행 가능성.

2차 목적 연구의 2차 목적을 달성하기 위해 ESPGHAN 기준에 따라 새로 진단된 CD에 영향을 받는 소아 환자를 전향적으로 아동 병원 "G. 소아과 진료소"에 등록할 것입니다. 디 크리스티나". 등록할 피험자 수는 이탈리아 시칠리아주 팔레르모 지방의 소아 인구(0~14세) 피험자 170,468명, CD 유병률 1%, 신뢰도를 고려하면 91명입니다. 수준은 95%이고 신뢰구간은 10%이다. 더욱이, 우리는 CD가 있는 소아에서 NAFLD의 정확한 유병률을 알지 못하기 때문에, GFD 이전 NAFLD 없이 등록된 피험자 간의 비율을 유지하기 위해 후향적 연구(객관적 1.1)의 결과에 의존할 것입니다("경쟁적"). 등록").

목표 2.1, 2.2, 2.3 목표 2.1을 달성하려면, 목표 1.4에 대해 분석된 동일한 임상, 실험실, 면역학적, 유전적 및 조직학적 매개변수가 있는 모든 등록된 피험자가 이용 가능해야 합니다(후자는 진단에 필요한 경우에만). 비교가 가능하며 장 투과성 변화의 혈청학적 지표[조눌린(Zo), 오클루딘(OCLN), 항-OCLN 항체, 클라우딘 1(CLDN1) 및 항-CLDN1 항체] 및 점막 손상을 식별하기 위해 혈액 샘플링을 실시하게 됩니다. [장지방산 결합 단백질 2(iFABP2)], 지질다당류(LPS), 지질다당류 결합 단백질(LPB)] GFD를 시작하기 전(T0). 혈액 샘플링은 환자의 임상상을 진단하는 데 필요한 것과 일치합니다.

목표 2.2를 달성하기 위해 등록된 모든 피험자는 GFD(T0)를 시작하기 전에 TNF-α, IL-1β, IL-6, IL-12, IL-18과 같은 염증 지표를 식별하기 위해 혈액 샘플을 받게 됩니다. 혈액 샘플링은 환자의 임상상을 진단하는 데 필요한 것과 일치합니다.

목표 2.3을 달성하기 위해, GFD(T0)를 시작하기 전에 등록된 모든 피험자는 이전에 설명한 방법에 따라 간 지방증을 연구하기 위해 복부 초음파 검사를 받게 되며 NAFLD의 유무와 NAFLD의 유무 사이에 통계적 상관 관계 분석이 수행됩니다. 목표 2.1 및 2.2에 대해 분석된 마커.

장 투과성 및 점막 손상 마커의 분석은 제조업체의 지침에 따라 상업적으로 이용 가능한 키트를 사용하여 ELISA 방법을 사용하여 수행됩니다.

염증 표지자 측정은 환자의 혈액 시료에서 추출한 말초혈액단핵세포(PBMC)를 유세포 분석법으로 세포내 염색해 실시한다.

목표 2.4, 2.5, 2.6 목표 2.4를 달성하기 위해, 비교를 가능하게 하기 위해 T0에서 분석된 동일한 임상, 실험실 및 면역학적 매개변수가 이용 가능해야 하는 모든 등록 피험자는 식별을 위해 혈액 샘플을 받게 됩니다. GFD(T1)를 엄격하게 준수한 지 6개월 후 T0(목표 2.1 참조)에서 이미 측정된 장 투과성 변경 및 점막 손상의 혈청학적 마커. 혈액 샘플링은 GFD 준수 6개월 후 환자의 임상상을 재평가하는 데 필요한 것과 일치합니다.

목표 2.5를 달성하기 위해 등록된 모든 피험자는 GFD(T1)를 6개월 동안 엄격하게 준수한 후 T0(목표 2.2 참조)에 이미 투여된 염증 마커를 확인하기 위해 혈액 샘플을 받게 됩니다. 혈액 샘플링은 GFD 준수 6개월 후 환자의 임상상을 재평가하는 데 필요한 것과 일치합니다.

목표 2.6을 달성하기 위해, 등록된 모든 피험자는 GFD(T1)를 6개월 동안 엄격히 준수한 후 이전에 설명한 방법에 따라 복부 초음파 검사를 통해 간 지방증을 연구하고 유무 사이의 통계적 상관 관계 분석을 수행합니다. NAFLD 및 목표 2.4 및 2.5에 대해 분석된 마커.

GFD 준수 평가는 어린이 및/또는 부모가 특별히 작성하고 검증한 설문지를 월별 편집을 통해 수행됩니다.