CD34+ 세포에서 1 차 골수 섬유증 환자의 중간 엽 기질 세포 유래 세포 외 소포의 역할

1 차 골수 섬유증 (PMF)은 CD34+ 전구체 세포의 클론 증식을 특징으로하는 만성 골수 증식 성 신 생물이다. JAK2, MPL 또는 CALR 유전자에서 기능 돌연변이의 획득으로 인해 JAK-Stat 경로의 구성 적 활성화는 관련 병원성 역할을한다. 또한, 만성 염증 상태는 질병 과정에 영향을 미칩니다. 현재, JAK 억제제 Ruxolitinib을 사용한 치료는 병리학 적 세포 클론에 영향을 미치지 않고 질병의 증상을 개선합니다. 조혈 전구체 세포 (HPC) 이식은 유일한 치료법이다. 연구자들은 이전에 PMF 환자의 중간 엽 간질 세포 (MSC)가 기능적 및 유전 적 이상 (낮은 증식 가능성, 조숙 한 노화, 분화 가능성 감소)을 나타 냈다고 발표했다. Ruxolitinib와 관련하여, JAK-Stat 신호의 억제, 건강한 공여자 (HD)-및 PMF-MSC의 성장 및 섬유증 관련 유전자 발현의 감소와 같은 MSC에 대한 직접적인 영향이 기술되었다. Ruxolitinib은 또한 염증성 사이토 카인 MCP-1 및 IL-6의 MSC 분비를 감소시키는 것으로보고되었으며, 이는 골수 (BM) 미세 환경을 변형 시키는데이 약물의 역할을 시사한다. PMF에서, 다른 혈액 학적 악성 종양에서와 같이, MSC는 미세 환경과 CD34+ 세포 사이의 의사 소통에 참여한다. 최근의 연구는 다른 병리학에서 MSC- 유래 세포 외 소포 (EVS) 및 부모 MSC가 유사한 영향을 미친다는 것을 보여 주었다. 실제로, mRNA, microRNA, 지질 및 단백질을 함유하는 EV는 수용자 세포에 포함되어 그들의 기능을 변형시킬 수있다. 정상적인 조혈에서, CD34+ 세포에서의 MSC-EV 혼입은 증가 된 수준의 포스 포 -STAT5를 통해 JAK-Stat 경로의 활성화를 유도하는 것으로 나타났다; 또한, 아 pop 토 시스의 현저한 감소 및 더 높은 콜로니 형성 단위 육아 세포/대 식세포 클론 성 잠재력이보고되었다.

이 연구의 목표는 다음과 같습니다.

• PMF 환자 및 HDS의 BM에서 MSC를 분리합니다. MSC는 Ruxolitinib와 함께 배양 될 것이다. EV는 MSC 기아 및 초 원심 분리 후에 얻어지고 -80 ° C에서 저장됩니다.
• 아 pop 토 시스 및 활성화 경로, ROS 생성 및 클론 제닉 용량의 평가에 의해 HD-CD34+ 또는 JAK2V617F+ SET2 세포에 대한 EV 효과를 평가하기 위해. 이와 관련하여, 확인 실험은 ruxolitinib를 받거나받지 않는 환자로부터 JAK2- 돌연변이 CD34+ 세포로 수행 될 것이다.
• EV와 함께 배양 한 후 CD34+ 및 Set2 세포에서 유전자 발현 프로파일을 수행한다.
• EV 바이오 카르고를 조사하기 위해 QRT-PCR 및 Proteomics는 Ruxolitinib와의 배양 전후에 MSC- 유래 EVS에서 수행 될 것이다.

예상되는 영향은 HD-MSC-EV에 대한 PMF-MSC-EVS와의 인큐베이션 후 CD34+ 또는 SET2 세포의 기능적 활성에서 변형의 확인을 포함하여, HPC에 대한 변경된 미세 환경의 효과를 반영한다. 연구자들은 또한 다른 공급원으로부터 EV를 포함하는 CD34+ 또는 SET2 세포에서 유전자 발현 프로파일을 평가함으로써 질병의 중증도/진행의 중요한 표적의 인식을 기대한다.

또한, PMF BM 미세 환경에 대한 Ruxolitinib 효과의 확인이 명확해질 수있다.

이 연구는 새로운 질병 진행의 목표에 작용하거나 건강한 CD34+ 세포의 생존을 선호하는 비 세포 요법으로서 HD-EVS의 미래 사용을 지원하거나 클론 대응 물에 대한 작용을 지원할 수 있습니다.