혈소판 동결보존 (PLT-CRIO)

혈소판은 지혈 및 염증 과정에서 핵심적인 역할을 하는 필수 혈액 성분입니다. 순환 혈소판 수의 감소로 정의되는 혈소판감소증은 골수 생산 저하, 소비 증가, 비장 격리, 또는 출혈 에피소드로 인해 발생할 수 있으며, 일반적으로 적정 수치를 회복하고 필요한 경우 출혈을 조절하기 위한 혈소판 수혈을 통해 관리됩니다. 임상 실무에서 대부분의 혈소판 수혈은 예방적 목적으로 혈소판감소증이 있는 암 환자에게 시행되며, 주요 요구사항은 수혈 횟수를 최소화하기 위한 지속적인 혈소판 생존입니다. 반면, 활발히 출혈 중인 환자의 경우 혈소판 수혈은 빠르고 효율적인 지혈을 제공할 것으로 기대되며, 그 순환 시간은 상대적으로 덜 중요합니다. 현재, 혈소판 농축액은 실온(22-24°C)에서 지속적인 교반 하에 최대 5일간 보관되며, 이후 사용되지 않으면 폐기됩니다. 이 보관 방법은 박테리아 오염의 위험을 수반하며 혈소판 기능을 저해하는 대사적 및 구조적 변화를 유발하는데, 이 현상을 혈소판 보관 손상(PSL)이라고 합니다. 또한, 짧은 유통기한은 응급 상황에서 혈소판 가용성을 제한하며, SARS-CoV-2 팬데믹 동안 예방적 혈소판 수혈 수요는 일정했지만 공급이 심각하게 부족했던 상황에서 관찰되었습니다. 이에 대응하여 Reggio Emilia의 수혈의학과는 향후 부족을 방지하기 위해 혈소판 농축액의 동결보존을 도입했습니다. 동결보존은 혈소판을 최대 2년간 보관할 수 있게 하여, 기존 방법에 비해 매력적인 대안을 제공하며, 보관 기간을 연장할 뿐만 아니라 박테리아 오염 위험도 줄입니다. 비록 최근 연구들이 출혈 환자에서 동결보존 혈소판의 안전성과 효능을 입증했지만, 혈액종양 환자에서의 예방적 사용에 대한 증거는 제한적입니다. 주요 우려사항으로는 만성적인 고응고성 환자에서 혈전 위험 악화 가능성과 해동 과정 중 성장 인자 및 전염증성 사이토카인과 같은 생체활성 분자의 방출이 있으며, 이는 종양 촉진 효과를 가질 수 있습니다. 혈소판-종양 상호작용은 복잡한 것으로 알려져 있으며, 종양 억제 및 촉진 영향을 모두 미치나, 종종 종양 진행을 favore하는 균형을 보입니다. 따라서 본 연구는 동결보존이 혈소판 기능, 구조 및 형태에 미치는 영향을 평가하고, 해동 후 잠재적인 종양 촉진 효과를 평가하는 것을 목표로 합니다. 비교 접근법을 사용하여, 혈소판분석법으로 얻은 동결보존 혈소판을 현재 예방적 수혈의 금표준으로 간주되는 표준 실온 보관 혈소판과 함께 분석했습니다. 연구 프로토콜은 Reggio Emilia AUSL-IRCCS 수혈의학과에서 기증자 모집을 포함하며, 혈소판 농축액은 6% 디메틸 설폭사이드(DMSO)를 사용하여 준비 및 동결보존되고, 다른 수혈 및 동결생물학 환경에서 낮은 세포독성이 보고된 세포내 및 세포외 동결보호제를 단독 또는 조합하여 사용하는 대체 접근법도 함께 시행됩니다. 혈소판 샘플은 동결 전과 해동 후 여러 시간점(재구성 후 1, 3, 6시간)에서 평가되었습니다. 분석에는 회수율, pH 변화, 생체활성 인자 방출, 활성화 표지자, 지혈 잠재력(혈탄성도계 via), 유세포 분석, 현미경 검사 및 싱크로트론 기반 푸리에 변환 적외선(FTIR) 분광법으로 평가된 형태학적 변화가 포함되었습니다. 더 나아가, 동결보존 혈소판 대 신선 혈소판의 잠재적 종양 촉진 활성을 유방암 및 백혈병 세포주와의 공동 배양 시스템을 사용하여 증식 및 혈소판-세포 상호작용 테스트에 초점을 맞춰 시험관 내에서 조사했습니다. 이 프로젝트의 주요 목적은 극저온 보관이 혈소판 기능에 미치는 영향을 규명하는 것입니다. 부차적 목적은 혈액종양 환자에서 예방적 수혈에 가장 적합한 안전성 프로필을 가진 동결보존 혈소판 제품을 확인하는 것입니다. 본 연구는 헬싱키 선언을 준수하며 Reggio Emilia AUSL-IRCCS 수혈의학과의 BioMetLab에서 수행되었으며, 모든 기증자로부터 사전 동의를 얻은 후 진행되었습니다.