Plateletkryokonservering (PLT-CRIO)

Blodplater er essensielle blodkomponenter med sentrale roller i både hemostase og betennelse. Trombocytopeni, definert som en reduksjon i antall sirkulerende blodplater, kan skyldes nedsatt benmargproduksjon, økt forbruk, miltsekvestrering eller blødningsepiser, og håndteres vanligvis gjennom platetransfusjoner som tar sikte på å gjenopprette tilstrekkelige antall og, nødvendigvis, kontrollere blødninger. I klinisk praksis administreres flertallet av platetransfusjoner til trombocytopeniske kreftpasienter med profylaktisk intensjon, hvor hovedkravet er vedvarende platetoverlevelse for å minimere antall transfusjoner. Derimot, for pasienter med aktiv blødning, forventes platetransfusjoner å gi rask og effektiv hemostase, mens deres sirkulasjonstid er av mindre betydning. For tiden lagres platelkonsentrater ved romtemperatur (22-24 °C) under kontinuerlig omrøring i opptil fem dager, hvoretter de kastes hvis de ikke er brukt. Denne lagringsmetoden innebærer risiko for bakteriell kontaminering og induserer metabolske og strukturelle endringer som svekker platetfunksjon, et fenomen kjent som platetlagringsskade (PSL). Videre begrenser den korte holdbarheten tilgjengeligheten av plater i nødsituasjoner, som observert under SARS-CoV-2-pandemien, da etterspørselen etter profylaktiske platetransfusjoner forble konstant mens tilgangen var sterkt redusert. Som svar innførte Transfusjonsmedisinsk avdeling i Reggio Emilia frysebevaring av platelkonsentrater for å forebygge fremtidige mangel. Frysebevaring muliggjør lagring av plater i opptil to år, og tilbyr et attraktivt alternativ til konvensjonelle metoder, ikke bare ved å utvide lagringsvarighet men også ved å redusere risikoen for bakteriell kontaminering. Selv om nylige studier har vist sikkerheten og effektiviteten til frysebevarte plater hos blødende pasienter, finnes det begrenset dokumentasjon for deres bruk i profylakse hos onko-hematologiske pasienter. Hovedbekymringer inkluderer potensialet for å forverre tromboserisiko hos pasienter med kronisk hyperkoagulabilitet og frigjøring av bioaktive molekyler som vekstfaktorer og pro-inflammatoriske cytokiner under opptining, som kan ha pro-tumorige effekter. Platet-tumor-interaksjoner er kjent for å være komplekse, med både pro- og anti-tumorale påvirkninger, hvor balansen ofte favoriserer tumorprogresjon. Denne studien tar derfor sikte på å evaluere effekten av frysebevaring på platetfunksjonalitet, struktur og morfologi, samt å vurdere potensielle pro-tumorale effekter etter opptining. Ved bruk av en komparativ tilnærming ble frysebevarte plater fra apherese analysert sammen med standard romtemperaturlagrede plater, som for tiden anses som gullstandarden for profylaktisk transfusjon. Protokollen innebærer rekruttering av donorer ved Transfusjonsmedisinsk avdeling ved AUSL-IRCCS i Reggio Emilia, med platelkonsentrater preparert og frysebevart ved bruk av 6% dimetylsulfoksid (DMSO) samt alternative tilnærminger med intracellulære og ekstracellulære kjølebeskyttelsesmidler, enten individuelt eller i kombinasjon, med lavere cytotoksisitet rapportert i andre transfusjons- og kryobiologiske settinger. Plateprøver ble evaluert før frysing og etter opptining på flere tidspunkter (1, 3 og 6 timer etter rekonstituering). Analyser inkluderte gjenvinningstakt, pH-endringer, frigjøring av bioaktive faktorer, aktiveringsmarkører, hemostatisk potensial (via tromboelastografi) og morfologiske endringer vurdert ved flytsytometri, mikroskopi og synkrotronbasert Fourier-transform infrarød (FTIR) mikrospektroskopi. Videre ble den potensielle pro-tumorale aktiviteten til frysebevarte versus ferske plater undersøkt in vitro ved bruk av co-kultursystemer med brystkreft- og leukemiscellinjer, med fokus på proliferasjon og platet-celle-interaksjonstester. Hovedmålet med dette prosjektet er å fastslå effektene av kryogen lagring på platetfunksjon. Det sekundære målet er å identifisere det frysebevarte platetproduktet med det mest passende sikkerhetsprofil for profylaktisk transfusjon hos onko-hematologiske pasienter. Studien utføres av BioMetLab ved Transfusjonsmedisinsk avdeling ved AUSL-IRCCS i Reggio Emilia i samsvar med Helsingforserklæringen, etter informert samtykke fra alle donorer.