Bloedplaatjescryopreservatie (PLT-CRIO)

Bloedplaatjes zijn essentiële bloedcomponenten met cruciale rollen in zowel hemostase als ontsteking. Trombocytopenie, gedefinieerd als een vermindering van het circulerende aantal bloedplaatjes, kan het gevolg zijn van verminderde beenmergproductie, verhoogde consumptie, miltsequestratie of bloedingen, en wordt vaak behandeld door bloedplaatjestransfusies gericht op het herstellen van voldoende aantallen en, indien nodig, het beheersen van bloedingen. In de klinische praktijk worden de meeste bloedplaatjestransfusies toegediend aan trombocytopenische kankerpatiënten met een profylactische intentie, waarbij de primaire vereiste een langdurige overleving van bloedplaatjes is om het aantal transfusies te minimaliseren. Daarentegen wordt van bloedplaatjestransfusies bij actief bloedende patiënten verwacht dat ze snelle en efficiënte hemostase bieden, terwijl hun circulatietijd minder relevant is. Momenteel worden bloedplaatjesconcentraten opgeslagen bij kamertemperatuur (22-24 °C) onder continue agitatie voor maximaal vijf dagen, waarna ze worden weggegooid als ze ongebruikt zijn. Deze opslagmethode brengt het risico van bacteriële besmetting met zich mee en induceert metabolische en structurele veranderingen die de bloedplaatjesfunctie aantasten, een fenomeen dat bekend staat als bloedplaatjesopslagletsel (PSL). Bovendien beperkt de korte houdbaarheid de beschikbaarheid van bloedplaatjes in noodsituaties, zoals waargenomen tijdens de SARS-CoV-2-pandemie, toen de vraag naar profylactische bloedplaatjestransfusies constant bleef terwijl de aanbod ernstig onder druk stond. Als reactie hierop introduceerde de Eenheid Transfusiegeneeskunde in Reggio Emilia het cryopreserveren van bloedplaatjesconcentraten om toekomstige tekorten te voorkomen. Cryopreservering maakt opslag van bloedplaatjes mogelijk voor maximaal twee jaar, wat een aantrekkelijk alternatief biedt voor conventionele methoden, niet alleen door de opslagduur te verlengen maar ook door het risico op bacteriële besmetting te verminderen. Hoewel recente studies de veiligheid en effectiviteit van gecryopreserveerde bloedplaatjes bij bloedende patiënten hebben aangetoond, is er beperkt bewijs voor hun gebruik bij profylaxe bij onco-hematologische patiënten. Grote zorgen zijn onder meer het potentieel voor verergering van het tromboserisico bij patiënten met chronische hypercoagulabiliteit en de afgifte van bioactieve moleculen zoals groeifactoren en pro-inflammatoire cytokines tijdens het ontdooien, wat pro-tumorigene effecten zou kunnen hebben. Bloedplaatjes-tumorinteracties zijn bekend complex, met zowel pro- als anti-tumorale invloeden, waarbij de balans vaak ten gunste van tumorprogressie uitvalt. Deze studie heeft daarom tot doel de impact van cryopreservering op bloedplaatjesfunctionaliteit, structuur en morfologie te evalueren, evenals mogelijke pro-tumorale effecten na ontdooiing te beoordelen. Met een vergelijkende aanpak werden gecryopreserveerde bloedplaatjes verkregen door aferese geanalyseerd naast standaard bij kamertemperatuur opgeslagen bloedplaatjes, momenteel beschouwd als de gouden standaard voor profylactische transfusie. Het protocol omvat werving van donors bij de Eenheid Transfusiegeneeskunde van de AUSL-IRCCS van Reggio Emilia, waarbij bloedplaatjesconcentraten worden bereid en gecryopreserveerd met 6% dimethylsulfoxide (DMSO) evenals alternatieve benaderingen met intracellulaire en extracellulaire cryoprotectanten, afzonderlijk of in combinatie, waarbij lagere cytotoxiciteit is gerapporteerd in andere transfusie- en cryobiologiecontexten. Bloedplaatjesmonsters werden geëvalueerd vóór invriezen en na ontdooien op meerdere tijdstippen (1, 3 en 6 uur na reconstitutie). Analyses omvatten herstelpercentage, pH-veranderingen, afgifte van bioactieve factoren, activatiemarkers, hemostatisch potentieel (via tromboelastografie) en morfologische veranderingen beoordeeld door middel van flowcytometrie, microscopie en synchrotron-gebaseerde Fourier-transformatie-infrarood (FTIR) microspectroscopie. Bovendien werd het mogelijke pro-tumorale activiteit van gecryopreserveerde versus verse bloedplaatjes in vitro onderzocht met behulp van co-cultuursystemen met borstkanker- en leukemiecelijnen, gericht op proliferatie en bloedplaatjes-celinteractietesten. Het primaire doel van dit project is het bepalen van de effecten van cryogene opslag op bloedplaatjesfunctie. Het secundaire doel is het identificeren van het gecryopreserveerde bloedplaatjesproduct met het meest geschikte veiligheidsprofiel voor profylactische transfusie bij onco-hematologische patiënten. De studie wordt uitgevoerd door het BioMetLab bij de Eenheid Transfusiegeneeskunde van AUSL-IRCCS van Reggio Emilia in overeenstemming met de Verklaring van Helsinki, na geïnformeerde toestemming van alle donors.