성인에서 계절성에 따른 생물학적 나이 영향 평가 (SeasonAGE)

품질 측정: 연구자는 참가자의 개인 데이터 보호를 보장하며, 법률에 의해 요구되는 경우를 제외하고 모든 보고서, 출판물, 참가자 샘플 및 기타 공개 사항을 보호합니다. 개인 및 의료 데이터 처리에는 스위스 데이터 개인정보 보호 규정 및 ORH(인간 연구 규정) 제5조에 따른 규정이 적용됩니다. 참가자 기밀 유지를 위해 참가자는 참가자 식별 번호와 사이트 식별 번호로만 식별됩니다. CRF 및 기타 프로젝트 관련 문서에서는 참가자가 고유한 참가자 번호로만 식별됩니다. 모든 참가자 연구 기록은 접근 통제 구역에 안전하게 보관됩니다. 참가자 이름과 참가자 식별 번호를 연결하는 식별 코드 목록은 참가자 기록과 별도로 저장됩니다. 데이터는 코딩됩니다. 참가자 식별 목록은 현장 팀만 접근할 수 있으며 식별 정보는 연구자 파일에만 보관됩니다. 연구자 파일은 무단 또는 우발적 공개, 변경, 삭제, 복사 및 도난으로부터 연구 정보를 보호하기 위해 전용된 안전하고 인증된 전자 시스템(Veeva Vault)입니다.

코딩된 데이터는 전자 데이터 캡처(EDC)에 기록되며, Medidata RAVE는 추적성(감사 추적)을 보장합니다. EDC에 기록된 데이터는 데이터 관리자, 현장 직원 및 연구 구성원만 접근할 수 있습니다.

생물학적 샘플 분석 후, 결과는 암호로 보호된 방식으로 LabKey라는 다른 시스템에 기록되며 분석을 담당하는 실험실 기술자만 접근할 수 있습니다. 최종 실험실 데이터는 감사 추적이 포함된 보안 SharePoint을 통해 LabKey에서 지정된 데이터 관리자에게 전송됩니다. RAVE 및 LabKey와 외부 결과는 통계 분석 전용 소프트웨어인 LSAF에 통합되며, 이는 암호로 제어되며 통계학자와 데이터 관리자만 접근할 수 있습니다. 각 소프트웨어의 서버 및 백업 서버는 미국(Medidata RAVE), 독일(LSAF), 스위스(LabKey)에 호스팅됩니다. 이 프로젝트의 생물학적 물질은 참가자 이름이 아닌 고유한 참가자 번호로 식별됩니다. 생물학적 물질은 승인된 직원만 접근할 수 있는 제한된 구역에 적절히 저장됩니다.

데이터 이전의 경우, Société des Produits Nestlé S.A.는 참가자 개인 데이터의 기밀성 및 보호에 대한 높은 기준을 유지합니다. 규제 기관 또는 연구 스폰서의 모니터링을 제외하고, 참가자의 서면 허가 없이 임상 정보는 공개되지 않습니다. 책임 연구자 또는 대리인은 연구 중 수집된 참가자의 개인 데이터 및 생물학적 분석 결과에 대한 접근성을 보장하기 위해 적절한 기술적 및 조직적 조치를 구현하고 유지합니다. 요청 시, 책임 연구자 또는 대리인은 참가자에게 개인 데이터 추출물을 제공하도록 보장합니다. 책임 연구자 또는 대리인은 연구 중 참가자의 개인 데이터 또는 생물학적 샘플 수정 또는 삭제 요청에 대해 즉시 스폰서에 알리기 위한 적절한 절차를 구현합니다. 연구 팀은 코드 목록을 포함한 연구 현장 파일을 데이터 개인정보 보호에 관한 Nestlé 정책을 준수하는 안전한 저장소에 별도로 보관 및 아카이브하며, 후보자가 연구 프로젝트에 포함되지 않은 경우에도 25년간 보관합니다. 시험 마스터 파일은 Nestlé 정책에 따라 25년간 별도로 보관됩니다.

현재 연구 외에도, 참가자는 Nestlé Center of Biological Resources(NCBR)의 광범위한 범위에서 생물학적 샘플 및 데이터의 "추가 재사용"에 대한 동의 제공을 고려하도록 제안됩니다; 이에 동의하는 경우, 샘플 및 건강 관련 데이터는 생물은행 규정(CERVD 의견 - Req. 2020-00307)에 설명된 대로 처리됩니다.

동의하지 않는 경우, 데이터는 이 연구의 범위 내에서만 사용됩니다. 윤리위원회 승인과 참가자의 동의 없이는 어떤 데이터도 추가로 사용되지 않습니다.

표본 크기 계산:

이 연구의 표본 크기는 세 가지 정보 출처를 기반으로 합니다. Koncevičius(2024)는 생물학적 나이 시계 가속도가 일주기 리듬 관련 변동(하루 동안)에 따라 1년의 진폭을 가짐을 보여주었습니다. Reed(2022)는 후성유전학적 시계의 대상 내 상관관계가 15년 간격으로 반복될 때까지 높음(최대 0.93의 상관관계)을 보여주었습니다. Jokai(2023)는 중간 운동을 하는 건강한 남녀 개인에서 PhenoAge 시계 가속도 변동성이 약 5.4년(남성과 여성 간 평균 관찰값)임을 보여주었습니다.

5.4년의 변동성(표준 편차)과 0.93의 대상 내 상관관계를 가정하고, 3개의 시계(PhenoAge, GrimAge 및 DuneDinPace – Bonferroni 보정)에 걸친 반복으로 인한 다중성을 고려하기 위해 80% 검정력과 0.0166(0.05/3)으로 설정된 알파를 사용하여, 생물학적 나이에서 겨울과 여름 간 1년 변동을 입증하기 위해 쌍체 t-검정 접근법을 사용하면, 전체 분석 집단(FAS)에 46명의 대상이 필요합니다. 20% 탈락률(등록되었지만 어느 시점에서도 생물학적 나이가 계산되지 않은 대상)을 고려하면, 46/0.8=58명의 대상을 모집해야 하며(60명으로 반올림), 60명의 대상을 모집해야 합니다.

계산에는 SAS 9.4(LSAF v5.2.1) PROC POWER가 사용되었습니다.

통계 분석 계획:

주요 종단점의 주요 분석은 전체 분석 집단 인구에 대해 평가됩니다. 주요 분석을 프로토콜 준수 집단에 대해 반복하는 민감도 분석이 수행됩니다.

PhenoAge 및 GrimAge의 경우, 생물학적 나이 가속도는 생물학적 나이(년)를 반응 변수로 하고 시간적 나이(년)를 교란 변수로 하는 선형 혼합 모델을 사용하여 개인 수준에서 계산됩니다. 대상 식별자는 대상 내 생물학적 나이의 연속 측정 간 상관관계를 설명하기 위해 무작위 효과로 포함됩니다. 자유도 계산에는 Kenward-Roger 방법이 사용됩니다. 주어진 개인에 대해, 주어진 시간적 나이에서 생물학적 나이 가속도는 고정 회귀 잔차가 됩니다.

DuneDinPace는 이미 나이 가속도를 측정하므로, 위에서 언급한 변환은 적용되지 않습니다.

생물학적 나이 가속도는 정규 분포를 따른다고 가정합니다. 계절 간 생물학적 나이 가속도 차이는 데이터의 종적 특성과 대상 내 상관관계를 설명하기 위해 선형 혼합 모델로 평가됩니다. 생물학적 나이 가속도는 결과 변수로 사용되며, 샘플링과 관련된 계절, BMI, 성별, 신체 활동, 흡연 상태 및 인종이 고정 교란 변수로 사용됩니다. 대상의 식별자는 결과의 대상 내 상관관계를 설명하기 위해 무작위 효과로 사용됩니다. 자유도 계산에는 Kenward-Roger 방법이 사용됩니다.

무작위화가 없기 때문에, 계절 효과에 대한 모델 추정치는 신체 활동과 같이 계절과 높은 상관관계를 가진 교란 변수의 존재로 인해 편향될 수 있습니다. 잠재적 편향을 완화하기 위해, 선형 혼합 모델에 변수 선택 방법(elastic net)이 적용됩니다. 축소 모델과 능선 회귀 매개변수의 적절한 값을 선택하기 위해 무작위 5-겹 교차 검증이 사용됩니다.

계절 고정 효과가 유지되는 경우, 각 계절의 생물학적 나이 가속도에 대한 최소 제곱 평균은 위의 축소 모델에서 도출되며, 최소 제곱 평균의 쌍별 차이(겨울 - 여름)가 계산됩니다.

0.05/3(Bonferroni 보정) 미만의 쌍별 차이와 관련된 p-값은 사용된 시계에 대해 겨울과 여름 간 생물학적 나이 가속도 차이를 나타내는 것으로 해석됩니다.

축소 모델에서 계절 고정 효과가 유지되지 않는 경우, 이는 사용된 시계에 대해 계절 관련 생물학적 나이 가속도 차이가 없음을 나타내는 것으로 해석됩니다.

각 단계에서, 혼합 선형 모델은 제한된 최대 우도 알고리즘을 사용하여 적합되며, 부분 정보(불완전한 궤적을 가진 대상, 예: 필요한 두 계절 중 1개 계절만 사용 가능)의 사용을 허용합니다. 이 방법은 결측 데이터가 무작위로 결측된 경우 편향되지 않습니다.

극단치가 있는 경우, 관측치를 제외하는 민감도 분석이 수행됩니다. 이 민감도 분석과 주요 종단점의 주요 분석 간 결론의 일관성은 극단치가 결론에 미치는 영향이 없음을 나타냅니다.