Evaluación del Efecto de la Estacionalidad en la Edad Biológica en Adultos (SeasonAGE)

Medidas de calidad: el investigador garantizará la protección de los datos personales de los participantes y que todos los informes, publicaciones, muestras de participantes y cualquier otra divulgación, excepto cuando lo exijan las leyes. El procesamiento de datos personales y médicos seguirá la normativa suiza en materia de privacidad de datos, y de conformidad con la ORH (Ordenanza sobre Investigación en Humanos), Art. 5. Los participantes se identifican únicamente mediante un número de identificación de participante y un número de identificación del sitio para mantener la confidencialidad del participante. En los CRF y otros documentos específicos del proyecto, los participantes solo se identifican por su número único de participante. Todos los registros de estudio de los participantes se guardarán de forma segura en un área con control de acceso. Las listas de códigos de identificación que vinculan los nombres de los participantes con los números de identificación de los participantes se almacenarán por separado de los registros de los participantes. Los datos estarán codificados. La lista de identificación de participantes solo será accesible para el equipo del sitio y la información identificable solo se conservará en el archivo del investigador. El archivo del investigador es un sistema electrónico seguro y certificado (Veeva Vault) dedicado a proteger esa información del estudio de divulgación no autorizada o accidental, de alteración, eliminación, copia y robo.

Los datos codificados se capturan en el Electronic Data Capture (EDC), Medidata RAVE garantiza la trazabilidad (auditoría). Los datos registrados en el EDC solo son accesibles para el Gestor de Datos, el personal del sitio y los miembros del estudio.

Después de los análisis de las muestras biológicas, los resultados se capturan en otro sistema llamado LabKey de forma protegida con contraseña y solo son accesibles para los técnicos de laboratorio responsables de los análisis. Los datos de laboratorio finales se enviarán luego desde LabKey al gestor de datos asignado a través de un SharePoint seguro que contiene auditoría. RAVE y LabKey, así como los resultados externos, se integran en LSAF, un software dedicado al análisis estadístico, que está controlado por contraseña y es accesible solo para el estadístico y el Gestor de Datos. Los servidores de cada software y sus servidores de respaldo están alojados, es decir, en Estados Unidos (Medidata RAVE), Alemania (LSAF) y Suiza (LabKey). El material biológico en este proyecto no se identifica por el nombre del participante, sino por un número único de participante. El material biológico se almacena adecuadamente en un área restringida solo accesible para personal autorizado.

En caso de transferencia de datos, Société des Produits Nestlé S.A. mantendrá altos estándares de confidencialidad y protección de los datos personales de los participantes. La información clínica no se divulgará sin el permiso por escrito del participante, excepto para el monitoreo por parte de las Autoridades Reguladoras o el patrocinador del estudio. El Investigador Principal o su designado implementará y mantendrá medidas técnicas y organizativas apropiadas para garantizar la accesibilidad de los participantes a sus datos personales y a los resultados de su análisis biológico recogidos durante el estudio. A solicitud, el Investigador Principal o su designado se asegurará de proporcionar extractos de datos personales a los participantes. El Investigador Principal o su designado implementará procedimientos apropiados para informar inmediatamente al patrocinador sobre cualquier solicitud de un participante para rectificar o eliminar sus datos personales o muestras biológicas durante el estudio. Los archivos del sitio de investigación, incluida la lista de códigos, se conservarán y archivarán por separado en un repositorio seguro conforme a las políticas de Nestlé con respecto a la privacidad de datos por parte del equipo de investigación durante 25 años, incluso si el candidato no está incluido en el proyecto de investigación. El Archivo Maestro del Ensayo se conservará por separado durante 25 años según la política de Nestlé.

Además del estudio actual, se propondrá a los participantes que consideren proporcionar su consentimiento para el "reutilización posterior" de sus muestras biológicas y datos en el ámbito más amplio del Centro de Recursos Biológicos de Nestlé (NCBR); si consienten en esto, las muestras y los datos relacionados con la salud se manejarán como se describe en las regulaciones del biobanco (opinión CERVD - Req. 2020-00307).

Si no consienten, los datos se utilizarán solo en el marco de esta investigación. No se utilizarán más datos sin la aprobación del Comité de Ética y el consentimiento de los participantes.

Cálculo del tamaño de la muestra:

El tamaño de la muestra para este estudio se basa en tres fuentes de información. Koncevičius (2024) mostró que la aceleración del reloj de edad biológica está sujeta a una variación relacionada con el ritmo circadiano (a lo largo de un día) de 1 año de amplitud. Reed (2022) mostró que la correlación intra-sujeto del reloj epigenético es alta (hasta una correlación de 0,93) en repeticiones espaciadas hasta 15 años. Jokai (2023) mostró que la variabilidad de la aceleración del reloj PhenoAge en individuos sanos de mediana edad que hacían ejercicio de ambos sexos era de aproximadamente 5,4 años (promedio observado entre hombres y mujeres).

Para demostrar una variación de 1 año entre invierno y verano en la edad biológica asumiendo una variabilidad (desviación estándar) de 5,4 años y una correlación intra-participantes de 0,93, utilizando un enfoque de prueba t pareada, 80% de potencia y alfa establecido en 0,0166 (0,05/3) para tener en cuenta la multiplicidad inducida por la repetición en 3 relojes (PhenoAge, GrimAge y DuneDinPace -- corrección de Bonferroni), se necesita terminar con 46 sujetos en el conjunto de análisis completo (FAS). Teniendo en cuenta una tasa de abandono del 20% (sujetos inscritos pero sin edad biológica calculada en ningún momento dado), se necesita reclutar 46/0,8=58 sujetos (redondeado a 60 sujetos).

Se utilizó SAS 9.4 (LSAF v5.2.1) PROC POWER para los cálculos.

Plan de análisis estadístico:

El análisis principal del criterio de valoración principal se evaluará en la población del Conjunto de Análisis Completo. Se realizará un análisis de sensibilidad replicando el análisis principal en el conjunto por protocolo.

Para PhenoAge y GrimAge, la aceleración de la edad biológica se calculará a nivel individual utilizando un modelo mixto lineal con la edad biológica (años) como respuesta y la edad cronológica (años) como factor de confusión. El identificador del sujeto se incluirá como efecto aleatorio para tener en cuenta la correlación entre las medidas consecutivas de la edad biológica dentro del sujeto. Se utilizará el método de Kenward-Roger para el cálculo de los grados de libertad. Para un individuo dado, a una edad cronológica dada, la aceleración de la edad biológica será el residuo de regresión fijo.

DuneDinPace ya mide una aceleración de la edad, por lo tanto, la transformación mencionada anteriormente no es aplicable.

Se asume que la aceleración de la edad biológica sigue una distribución normal. La diferencia en la aceleración de la edad biológica entre estaciones se evaluará con un modelo mixto lineal para tener en cuenta la naturaleza longitudinal de los datos y la correlación intra-sujeto. La aceleración de la edad biológica se utilizará como variable de resultado, y la estación asociada con el muestreo, IMC, sexo, actividad física, estado de tabaquismo y etnia se utilizarán como factores de confusión fijos. El identificador del sujeto se utilizará como efecto aleatorio para tener en cuenta la correlación intra-sujeto del resultado. Se utilizará el método de Kenward-Roger para el cálculo de los grados de libertad.

En ausencia de aleatorización, las estimaciones del modelo del efecto estacional podrían estar sesgadas por la presencia de factores de confusión altamente correlacionados con la estación, como la actividad física. Para mitigar el sesgo potencial, se aplicará un método de selección de variables (elastic net) al modelo mixto lineal. Se utilizará una validación cruzada aleatoria de 5 pliegues para seleccionar el modelo reducido y el valor apropiado para el parámetro de regresión ridge.

Si se retiene el efecto fijo de la estación, las medias de mínimos cuadrados de la aceleración de la edad biológica en cada estación se derivarán del modelo reducido anterior, y se calcularán las diferencias por pares de la media de mínimos cuadrados (invierno - verano).

Los valores p asociados con la diferencia por pares inferior a 0,05/3 (corrección de Bonferroni) se interpretarán como indicativos de una diferencia en la aceleración de la edad biológica entre invierno y verano para el reloj utilizado.

Si el efecto fijo de la estación no se retiene en el modelo reducido, esto se interpretará como una ausencia de diferencia asociada a la estación en la aceleración de la edad biológica para el reloj utilizado.

En cada etapa, el modelo lineal mixto se ajustará utilizando el algoritmo de máxima verosimilitud restringida, permitiendo el uso de información parcial (sujetos con trayectoria incompleta, por ejemplo, 1 estación disponible de las dos necesarias). Este método es insesgado si los datos faltantes faltan al azar.

En presencia de valores atípicos extremos, se realizará un análisis de sensibilidad excluyendo la(s) observación(es). La consistencia en las conclusiones entre este análisis de sensibilidad y el análisis principal del criterio de valoración principal será indicativa de la ausencia de impacto de los valores atípicos en las conclusiones.