Valutazione dell'effetto della stagionalità sull'età biologica negli adulti (SeasonAGE)

Misure di qualità: l'investigatore garantirà la protezione dei dati personali del partecipante e che tutti i report, pubblicazioni, campioni dei partecipanti e qualsiasi altra divulgazione, tranne dove richiesto dalle leggi. L'elaborazione dei dati personali e medici seguirà la regolamentazione svizzera in materia di privacy dei dati, e in conformità con la regolamentazione ORH (Ordinanza sulla ricerca umana), Art. 5. I partecipanti sono identificati solo da un numero di identificazione del partecipante e un numero di identificazione del sito per mantenere la riservatezza del partecipante. Sui CRF e altri documenti specifici del progetto, i partecipanti sono identificati solo dal loro numero unico di partecipante. Tutti i registri di studio dei partecipanti saranno conservati in modo sicuro in un'area ad accesso controllato. Gli elenchi di codici di identificazione che collegano i nomi dei partecipanti ai numeri di identificazione dei partecipanti saranno archiviati separatamente dai registri dei partecipanti. I dati saranno codificati. L'elenco di identificazione dei partecipanti sarà accessibile solo dal team del sito e le informazioni identificabili saranno conservate solo nel file dell'investigatore. Il file dell'investigatore è un sistema elettronico sicuro e certificato (Veeva Vault) dedicato a proteggere tali informazioni di studio da divulgazioni non autorizzate o accidentali, da alterazioni, cancellazioni, copie e furti.

I dati codificati vengono acquisiti nell'Electronic Data Capture (EDC), Medidata RAVE garantisce la tracciabilità (audit trail). I dati registrati nell'EDC sono accessibili solo al Data Manager, al personale del sito e ai membri dello studio.

Dopo le analisi dei campioni biologici, i risultati vengono acquisiti in un altro sistema chiamato LabKey in modo protetto da password e accessibili solo dai tecnici di laboratorio responsabili delle analisi. I dati di laboratorio finali verranno quindi inviati da LabKey al data manager assegnato tramite un SharePoint sicuro contenente l'audit trail. RAVE e LabKey, così come i risultati esterni, sono integrati in LSAF, un software dedicato all'analisi statistica, che è controllato da password e accessibile solo allo statistico e al Data Manager. I server di ciascun software e i loro server di backup sono ospitati, ad esempio, negli Stati Uniti (Medidata RAVE), Germania (LSAF) e Svizzera (LabKey). Il materiale biologico in questo progetto non è identificato dal nome del partecipante ma da un numero unico di partecipante. Il materiale biologico è adeguatamente conservato in un'area ristretta accessibile solo al personale autorizzato.

In caso di trasferimento di dati, Société des Produits Nestlé S.A. manterrà elevati standard di riservatezza e protezione dei dati personali dei partecipanti. Le informazioni cliniche non saranno divulgate senza il permesso scritto del partecipante, eccetto per il monitoraggio da parte delle Autorità Regolatorie o dello sponsor dello studio. L'Investigatore Principale o il delegato implementerà e manterrà misure tecniche e organizzative appropriate per garantire l'accessibilità ai partecipanti dei loro dati personali e dei risultati delle analisi biologiche raccolti durante lo studio. Su richiesta, l'Investigatore Principale o il delegato garantirà di fornire estratti dei dati personali ai partecipanti. L'Investigatore Principale o il delegato implementerà procedure appropriate per informare immediatamente lo sponsor su qualsiasi richiesta del partecipante di rettificare o cancellare i propri dati personali o campioni biologici durante lo studio. I file del sito investigativo, inclusi l'elenco dei codici, saranno conservati e archiviati separatamente in un repository sicuro conforme alle politiche di Nestlé riguardo alla privacy dei dati dal team di ricerca per 25 anni, anche se il candidato non è incluso nel progetto di ricerca. Il Trial Master file sarà conservato separatamente per 25 anni secondo la politica Nestlé.

Oltre allo studio attuale, ai partecipanti sarà proposto di considerare di fornire il consenso per il "riutilizzo ulteriore" dei loro campioni biologici e dati nell'ambito più ampio del Nestlé Center of Biological Resources (NCBR); se acconsentono a ciò, i campioni e i dati relativi alla salute saranno gestiti come descritto nelle normative della biobanca (parere CERVD - Req. 2020-00307).

Se non acconsentono, i dati saranno utilizzati solo nell'ambito di questa ricerca. Nessun dato sarà ulteriormente utilizzato senza l'approvazione del Comitato Etico e il consenso dei partecipanti.

Calcolo della dimensione del campione:

La dimensione del campione per questo studio si basa su tre fonti di informazione. Koncevičius (2024) ha mostrato che l'accelerazione dell'orologio dell'età biologica è soggetta a variazioni legate al ritmo circadiano (in un giorno) di 1 anno di ampiezza. Reed (2022) ha mostrato che la correlazione intra-soggetto dell'orologio epigenetico è alta (fino a una correlazione di 0,93) tra ripetizioni distanziate fino a 15 anni. Jokai (2023) ha mostrato che la variabilità dell'accelerazione dell'orologio PhenoAge in individui sani di mezza età di entrambi i sessi era di circa 5,4 anni (media osservata tra Maschio e Femmina).

Per dimostrare una variazione di 1 anno tra Inverno ed Estate nell'età biologica assumendo una variabilità (deviazione standard) di 5,4 anni e una correlazione intra-partecipanti di 0,93, utilizzando un approccio di test t accoppiato, potenza dell'80% e alfa impostato a 0,0166 (0,05/3) per tenere conto della molteplicità indotta dalla ripetizione su 3 orologi (PhenoAge, GrimAge e DuneDinPace -- correzione di Bonferroni), si deve arrivare a 46 soggetti nel full analysis set (FAS). Tenendo conto di un tasso di abbandono del 20% (soggetti arruolati ma senza età biologica calcolata in qualsiasi momento), si devono reclutare 46/0,8=58 soggetti (arrotondato a 60 soggetti).

SAS 9.4 (LSAF v5.2.1) PROC POWER è stato utilizzato per i calcoli.

Piano delle analisi statistiche:

L'analisi principale dell'endpoint primario sarà valutata sulla popolazione Full Analysis Set. Un'analisi di sensibilità sarà condotta replicando l'analisi principale sul set Per Protocol.

Per PhenoAge e GrimAge, l'accelerazione dell'età biologica sarà calcolata a livello individuale utilizzando un modello misto lineare con l'età biologica (anni) come risposta e l'età cronologica (anni) come confonditore. L'identificatore del soggetto sarà incluso come effetto casuale per tenere conto della correlazione tra misure consecutive dell'età biologica all'interno del soggetto. Il metodo Kenward-Roger sarà utilizzato per il calcolo dei gradi di libertà. Per un dato individuo, a una data età cronologica, l'accelerazione dell'età biologica sarà il residuo fisso della regressione.

DuneDinPace misura già un'accelerazione dell'età, quindi la trasformazione sopra menzionata non è applicabile.

Si assume che l'accelerazione dell'età biologica segua una distribuzione normale. La differenza nell'accelerazione dell'età biologica tra le stagioni sarà valutata con un modello misto lineare per tenere conto della natura longitudinale dei dati e della correlazione intra-soggetto. L'accelerazione dell'età biologica sarà utilizzata come variabile di outcome, e la stagione associata al campionamento, BMI, sesso, attività fisica, stato di fumo ed etnia utilizzati come confonditori fissi. L'identificatore del soggetto sarà utilizzato come effetto casuale per tenere conto della correlazione intra-soggetto dell'outcome. Il metodo Kenward-Roger sarà utilizzato per il calcolo dei gradi di libertà.

In assenza di randomizzazione, le stime dell'effetto stagionale del modello potrebbero essere distorte dalla presenza di confonditori altamente correlati alla stagione, come l'attività fisica. Per mitigare potenziali distorsioni, un metodo di selezione delle variabili (elastic net) sarà applicato al modello misto lineare. Una validazione incrociata casuale a 5 fold sarà utilizzata per selezionare il modello ridotto e il valore appropriato per il parametro di regressione ridge.

Se l'effetto fisso della stagione è mantenuto, le medie dei minimi quadrati dell'accelerazione dell'età biologica in ciascuna stagione saranno derivate dal modello ridotto sopra, e le differenze pairwise delle medie dei minimi quadrati (inverno - estate) saranno calcolate.

I p-value associati alla differenza pairwise inferiori a 0,05/3 (correzione di Bonferroni) saranno interpretati come indicativi di una differenza nell'accelerazione dell'età biologica tra inverno ed estate per l'orologio utilizzato.

Se l'effetto fisso della stagione non è mantenuto nel modello ridotto, questo sarà interpretato come un'assenza di differenza associata alla stagione nell'accelerazione dell'età biologica per l'orologio utilizzato.

In ogni fase, il modello lineare misto sarà adattato utilizzando l'algoritmo della massima verosimiglianza ristretta, consentendo l'uso di informazioni parziali (soggetti con traiettoria incompleta, ad es. 1 stagione disponibile su due necessarie). Questo metodo è imparziale se i dati mancanti sono mancanti a caso.

In presenza di outlier estremi, un'analisi di sensibilità sarà condotta escludendo l'osservazione/i. La coerenza nelle conclusioni tra questa analisi di sensibilità e l'analisi principale dell'endpoint primario sarà indicativa dell'assenza di impatto degli outlier sulle conclusioni.