Bewertung der Auswirkung von Saisonalität auf das biologische Alter bei Erwachsenen (SeasonAGE)

Qualitätsmaßnahmen: Der Prüfarzt stellt den Schutz der personenbezogenen Daten der Teilnehmer sicher und dass alle Berichte, Veröffentlichungen, Teilnehmerproben und sonstige Offenlegungen, außer wenn gesetzlich vorgeschrieben, geschützt werden. Die Verarbeitung personenbezogener und medizinischer Daten erfolgt gemäß der Schweizer Datenschutzverordnung und in Übereinstimmung mit der Verordnung über die Forschung am Menschen (Humanforschungsverordnung, HFV), Art. 5. Teilnehmer werden nur durch eine Teilnehmeridentifikationsnummer und eine Standortidentifikationsnummer identifiziert, um die Vertraulichkeit der Teilnehmer zu wahren. Auf den CRFs und anderen projektspezifischen Dokumenten werden Teilnehmer nur durch ihre eindeutige Teilnehmernummer identifiziert. Alle Teilnehmerstudienunterlagen werden sicher in einem zugangskontrollierten Bereich aufbewahrt. Identifikationscodelisten, die Teilnehmernamen mit Teilnehmeridentifikationsnummern verknüpfen, werden getrennt von Teilnehmerunterlagen gespeichert. Die Daten werden kodiert. Die Teilnehmeridentifikationsliste ist nur für das Standortteam zugänglich, und identifizierbare Informationen werden nur in der Prüfarztakte aufbewahrt. Die Prüfarztakte ist ein sicheres und zertifiziertes elektronisches System (Veeva Vault), das speziell dafür ausgelegt ist, diese Studieninformationen vor unbefugter oder versehentlicher Offenlegung, Änderung, Löschung, Vervielfältigung und Diebstahl zu schützen.

Die kodierten Daten werden in das Electronic Data Capture (EDC) erfasst, Medidata RAVE gewährleistet die Nachverfolgbarkeit (Audit Trail). Die in das EDC aufgezeichneten Daten sind nur für den Datenmanager, das Standortpersonal und Studienmitglieder zugänglich.

Nach den Analysen der biologischen Proben werden die Ergebnisse auf passwortgeschützte Weise in ein anderes System namens LabKey erfasst und sind nur für die für die Analysen verantwortlichen Labortechniker zugänglich. Die endgültigen Labordaten werden dann von LabKey über eine gesicherte SharePoint-Umgebung mit Audit Trail an den zugewiesenen Datenmanager gesendet. RAVE und LabKey sowie die externen Ergebnisse werden in LSAF integriert, eine Software, die speziell für die statistische Analyse entwickelt wurde, die passwortgeschützt ist und nur für den Statistiker und den Datenmanager zugänglich ist. Die Server jeder Software und ihre Back-up-Server sind gehostet, z.B. in den Vereinigten Staaten (Medidata RAVE), Deutschland (LSAF) und der Schweiz (LabKey). Biologisches Material in diesem Projekt wird nicht durch den Teilnehmernamen, sondern durch eine eindeutige Teilnehmernummer identifiziert. Biologisches Material wird angemessen in einem eingeschränkten Bereich gelagert, der nur für autorisiertes Personal zugänglich ist.

Im Falle einer Datenübertragung wird die Société des Produits Nestlé S.A. hohe Standards der Vertraulichkeit und des Schutzes personenbezogener Daten der Teilnehmer aufrechterhalten. Klinische Informationen werden ohne schriftliche Genehmigung des Teilnehmers nicht weitergegeben, außer für die Überwachung durch Aufsichtsbehörden oder den Studienförderer. Der Hauptprüfarzt oder sein Vertreter wird geeignete technische und organisatorische Maßnahmen implementieren und aufrechterhalten, um den Teilnehmern den Zugang zu ihren personenbezogenen Daten und den Ergebnissen der biologischen Analyse, die während der Studie gesammelt wurden, zu gewährleisten. Auf Anfrage wird der Hauptprüfarzt oder sein Vertreter sicherstellen, dass Auszüge der personenbezogenen Daten an die Teilnehmer bereitgestellt werden. Der Hauptprüfarzt oder sein Vertreter wird geeignete Verfahren implementieren, um den Sponsor unverzüglich über jede Anfrage eines Teilnehmers zur Berichtigung oder Löschung seiner personenbezogenen Daten oder biologischen Proben während der Studie zu informieren. Die Prüfstandortakten, einschließlich der Codeliste, werden vom Forschungsteam für 25 Jahre getrennt in einem sicheren Repository aufbewahrt und archiviert, das den Nestlé-Richtlinien zum Datenschutz entspricht, selbst wenn der Kandidat nicht in das Forschungsprojekt einbezogen wurde. Die Trial Master File wird gemäß Nestlé-Richtlinie getrennt für 25 Jahre aufbewahrt.

Zusätzlich zur aktuellen Studie wird den Teilnehmern vorgeschlagen, eine Einwilligung für die „weitere Wiederverwendung“ ihrer biologischen Proben und Daten im weiteren Rahmen des Nestlé Center of Biological Resources (NCBR) in Betracht zu ziehen; wenn sie hierin einwilligen, werden die Proben und gesundheitsbezogenen Daten gemäß den Biobank-Regelungen behandelt (CERVD-Stellungnahme - Req. 2020-00307).

Wenn sie nicht einwilligen, werden die Daten nur im Rahmen dieser Forschung verwendet. Ohne Genehmigung der Ethikkommission und Einwilligung der Teilnehmer werden keine Daten weiterverwendet.

Berechnung der Stichprobengröße:

Die Stichprobengröße für diese Studie basiert auf drei Informationsquellen. Koncevičius (2024) zeigte, dass die Beschleunigung der biologischen Altersuhr einer zirkadianen Rhythmus-bedingten Variation (über einen Tag) von 1 Jahr Amplitude unterliegt. Reed (2022) zeigte, dass die Korrelation innerhalb des Subjekts der epigenetischen Uhr hoch ist (bis zu einer Korrelation von 0,93) über Wiederholungen, die bis zu 15 Jahre auseinander liegen. Jokai (2023) zeigte, dass die Variabilität der PhenoAge-Uhr-Beschleunigung bei mittelmäßig trainierten gesunden Personen beider Geschlechter etwa 5,4 Jahre betrug (Durchschnitt beobachtet zwischen Männern und Frauen).

Um eine 1-Jahres-Variation zwischen Winter und Sommer im biologischen Alter nachzuweisen, unter der Annahme einer Variabilität (Standardabweichung) von 5,4 Jahren und einer Korrelation innerhalb der Teilnehmer von 0,93, unter Verwendung eines gepaarten t-Test-Ansatzes, 80% Power und Alpha auf 0,0166 (0,05/3) gesetzt, um die durch die Wiederholung über 3 Uhren (PhenoAge, GrimAge und DuneDinPace – Bonferroni-Korrektur) induzierte Multiplizität zu berücksichtigen, müssen 46 Probanden in der Full Analysis Set (FAS) enden. Unter Berücksichtigung einer Ausfallrate von 20% (eingeschriebene Probanden, aber ohne berechnetes biologisches Alter zu einem beliebigen Zeitpunkt), müssen 46/0,8=58 Probanden rekrutiert werden (aufgerundet auf 60 Probanden).

Für die Berechnungen wurde SAS 9.4 (LSAF v5.2.1) PROC POWER verwendet.

Statistischer Analyseplan:

Die Hauptanalyse des primären Endpunkts wird an der Full Analysis Set-Population ausgewertet. Eine Sensitivitätsanalyse wird durchgeführt, indem die Hauptanalyse am Per Protocol Set repliziert wird.

Für PhenoAge und GrimAge wird die biologische Altersbeschleunigung auf individueller Ebene unter Verwendung eines linearen gemischten Modells mit biologischem Alter (Jahre) als Response und chronologischem Alter (Jahre) als Confounder berechnet. Die Subjektkennung wird als zufälliger Effekt einbezogen, um die Korrelation zwischen aufeinanderfolgenden Messungen des biologischen Alters innerhalb des Subjekts zu berücksichtigen. Die Kenward-Roger-Methode wird für die Berechnung der Freiheitsgrade verwendet. Für ein gegebenes Individuum zu einem gegebenen chronologischen Alter ist die biologische Altersbeschleunigung der feste Regressionsresiduum.

DuneDinPace misst bereits eine Altersbeschleunigung, daher ist die oben genannte Transformation nicht anwendbar.

Es wird angenommen, dass die biologische Altersbeschleunigung einer Normalverteilung folgt. Die Differenz in der biologischen Altersbeschleunigung zwischen den Jahreszeiten wird mit einem linearen gemischten Modell ausgewertet, um der longitudinalen Natur der Daten und der Intra-Subjekt-Korrelation Rechnung zu tragen. Die biologische Altersbeschleunigung wird als Ergebnisvariable verwendet, und die mit der Probenahme verbundene Jahreszeit, BMI, Geschlecht, körperliche Aktivität, Raucherstatus und Ethnizität werden als feste Confounder verwendet. Die Subjektkennung wird als zufälliger Effekt verwendet, um die Intra-Subjekt-Korrelation des Ergebnisses zu berücksichtigen. Die Kenward-Roger-Methode wird für die Berechnung der Freiheitsgrade verwendet.

In Abwesenheit von Randomisierung könnten die Modellschätzungen des Saisoneffekts durch das Vorhandensein von Confoundern, die stark mit der Jahreszeit korrelieren, wie körperliche Aktivität, verzerrt sein. Um potenzielle Verzerrungen zu mildern, wird eine Variablenselektionsmethode (elastic net) auf das lineare gemischte Modell angewendet. Zufällige 5-fache Kreuzvalidierung wird für die Auswahl des reduzierten Modells und den geeigneten Wert für den Ridge-Regressionsparameter verwendet.

Wenn der Saison-Fixed-Effekt beibehalten wird, werden die kleinsten Quadratmittel der biologischen Altersbeschleunigung in jeder Saison aus dem obigen reduzierten Modell abgeleitet, und die paarweisen Differenzen der kleinsten Quadratmittel (Winter - Sommer) werden berechnet.

P-Werte, die mit der paarweisen Differenz unter 0,05/3 (Bonferroni-Korrektur) verbunden sind, werden als Hinweis auf einen Unterschied in der biologischen Altersbeschleunigung zwischen Winter und Sommer für die verwendete Uhr interpretiert.

Wenn der Saison-Fixed-Effekt im reduzierten Modell nicht beibehalten wird, wird dies als Fehlen eines saisonassoziierten Unterschieds in der biologischen Altersbeschleunigung für die verwendete Uhr interpretiert.

In jeder Phase wird das gemischte lineare Modell unter Verwendung des Restricted Maximum Likelihood-Algorithmus angepasst, was die Verwendung partieller Informationen (Subjekte mit unvollständiger Trajektorie, z.B. 1 Saison verfügbar von den zwei benötigten) ermöglicht. Diese Methode ist unverzerrt, wenn die fehlenden Daten zufällig fehlen.

Bei Vorhandensein von Ausreißern wird eine Sensitivitätsanalyse durchgeführt, die die Beobachtung(en) ausschließt. Konsistenz in den Schlussfolgerungen zwischen dieser Sensitivitätsanalyse und der Hauptanalyse des primären Endpunkts wird als Hinweis auf das Fehlen eines Einflusses der Ausreißer auf die Schlussfolgerungen interpretiert.