Utvärdering av effekten av säsongsbundenhet på biologisk ålder hos vuxna (SeasonAGE)

Kvalitetsmått: undersökaren kommer att säkerställa skyddet av deltagarens personuppgifter och att alla rapporter, publikationer, deltagarprover och alla andra utlämnanden, förutom där det krävs enligt lag. Behandlingen av person- och medicinska data kommer att följa den schweiziska förordningen i fråga om dataskydd och i överensstämmelse med ORH-förordningen (förordningen om mänsklig forskning), art. 5. Deltagare identifieras endast med ett deltagaridentifieringsnummer och ett platsidentifieringsnummer för att upprätthålla deltagarens konfidentialitet. På CRF:erna och andra projektspecifika dokument identifieras deltagare endast med sitt unika deltagarnummer. Alla deltagares studiehandlingar kommer att förvaras säkert i ett åtkomstkontrollerat område. Identifieringskodslistor som länkar deltagarnamn till deltagaridentifieringsnummer kommer att lagras separat från deltagarnas handlingar. Datan kommer att kodas. Deltagaridentifieringslistan kommer endast att vara tillgänglig för platsgruppen och identifierbar information kommer endast att förvaras i undersökarfilen. Undersökarfilen är ett säkert och certifierat elektroniskt system (Veeva Vault) dedikerat för att skydda den studieinformationen från obehörig eller oavsiktlig utlämnande, från ändring, radering, kopiering och stöld.

Den kodade datan fångas in i Electronic Data Capture (EDC), Medidata RAVE säkerställer spårbarhet (revisionsspår). Datan som registreras i EDC är endast tillgänglig för datachefen, platspersonal och studiepersonal.

Efter analyserna av biologiska prover fångas resultaten in i ett annat system som heter LabKey på ett lösenordsskyddat sätt och är endast tillgängligt för laboratorieteknikerna som är ansvariga för analyserna. De slutgiltiga laboratoriedata kommer sedan att skickas från LabKey till den tilldelade datachefen via en säker SharePoint med revisionsspår. RAVE och LabKey, liksom de externa resultaten, integreras i LSAF, en programvara dedikerad till den statistiska analysen, som är lösenordsskyddad och endast tillgänglig för statistikern och datachefen. Varje programvaras servrar och deras backupservrar är värdbaserade, dvs. i USA (Medidata RAVE), Tyskland (LSAF) och Schweiz (LabKey). Biologiskt material i detta projekt identifieras inte med deltagarens namn utan med ett unikt deltagarnummer. Biologiskt material lagras på lämpligt sätt i ett begränsat område som endast är tillgängligt för auktoriserad personal.

Vid dataöverföring kommer Société des Produits Nestlé S.A. att upprätthålla höga standarder för konfidentialitet och skydd av deltagarnas personuppgifter. Klinisk information kommer inte att lämnas ut utan deltagarens skriftliga tillstånd, förutom för övervakning av tillsynsmyndigheter eller studiens uppdragsgivare. Huvudundersökaren eller utsedd person kommer att genomföra och upprätthålla lämpliga tekniska och organisatoriska åtgärder för att säkerställa tillgänglighet för deltagarna till sina personuppgifter och sina resultat av biologisk analys som samlats in under studien. På begäran kommer huvudundersökaren eller utsedd person att säkerställa att tillhandahålla utdrag av personuppgifter till deltagarna. Huvudundersökaren eller utsedd person kommer att genomföra lämpliga procedurer för att omedelbart informera uppdragsgivaren om någon deltagares begäran om att rätta eller radera sina personuppgifter eller biologiska prover under studien. Undersökningsplatsens filer, inklusive kodslistan, kommer att förvaras och arkiveras separat i ett säkert förvar som överensstämmer med Nestlés policyer med avseende på dataskydd av forskningsteamet i 25 år, även om kandidaten inte ingår i forskningsprojektet. Trial Master-filen kommer att förvaras separat i 25 år enligt Nestlés policy.

Förutom den aktuella studien kommer deltagarna att erbjudas att överväga att ge samtycke för "ytterligare återanvändning" av sina biologiska prover och data i den bredare omfattningen av Nestlé Center of Biological Resources (NCBR); om de samtycker till detta kommer proverna och hälsorelaterade data att hanteras enligt beskrivningen i biobanksförordningarna (CERVD-utlåtande - Req. 2020-00307).

Om de inte samtycker kommer datan endast att användas inom ramen för denna forskning. Inga data kommer att användas ytterligare utan etikkommitténs godkännande och deltagarnas samtycke.

Beräkning av urvalsstorlek:

Urvalsstorleken för denna studie baseras på tre informationskällor. Koncevičius (2024) visade att acceleration av biologisk ålder är föremål för cirkadisk rytmrelaterad variation (över en dag) på 1 års amplitud. Reed (2022) visade att inom-subjekt-korrelation av epigenetisk klocka är hög (upp till en korrelation på 0,93) över upprepningar med upp till 15 års mellanrum. Jokai (2023) visade att PhenoAge-klockans accelerationsvariabilitet hos medelålders tränade friska individer från båda könen var cirka 5,4 år (genomsnitt observerat mellan man och kvinna).

För att påvisa en 1-årsvariation mellan vinter och sommar i biologisk ålder, med antagande om en variabilitet (standardavvikelse) på 5,4 år och en inom-deltagar-korrelation på 0,93, med hjälp av ett parade t-test-tillvägagångssätt, 80% styrka och alfa satt till 0,0166 (0,05/3) för att ta hänsyn till multiplikitet inducerad av upprepningen över 3 klockor (PhenoAge, GrimAge och DuneDinPace – Bonferroni-korrigering), behöver man hamna med 46 ämnen i fullständigt analysset (FAS). Med hänsyn till en 20% avhoppsfrekvens (ämnen inkluderade men utan biologisk ålder beräknad vid någon given tidpunkt), behöver man rekrytera 46/0,8=58 ämnen (avrundat uppåt till 60 ämnen).

SAS 9.4 (LSAF v5.2.1) PROC POWER användes för beräkningarna.

Plan för statistiska analyser:

Huvudanalysen av den primära ändpunkten kommer att utvärderas på Full Analysis Set-populationen. En sensitivitetsanalys kommer att genomföras som replikerar huvudanalysen på Per Protocol-setet.

För PhenoAge och GrimAge kommer biologisk ålderacceleration att beräknas på individuell nivå med hjälp av en linjär mixed model med biologisk ålder (år) som respons och kronologisk ålder (år) som confounder. Ämnesidentifieraren kommer att inkluderas som en slumpmässig effekt för att ta hänsyn till korrelationen mellan på varandra följande mätningar av biologisk ålder inom ämnet. Kenward-Roger-metoden kommer att användas för frihetsgradsberäkningen. För en given individ, vid en given kronologisk ålder, kommer den biologiska ålderaccelerationen att vara den fasta regressionsresidualen.

DuneDinPace mäter redan en ålderacceleration, därför är den ovan nämnda transformationen inte tillämplig.

Den biologiska ålderaccelerationen antas följa en normalfördelning. Skillnaden i biologisk ålderacceleration mellan säsonger kommer att utvärderas med en linjär mixed model för att ta hänsyn till den longitudinella naturen av datan och intra-ämneskorrelation. Biologisk ålderacceleration kommer att användas som utfallsvariabel, och säsong associerad med provtagning, BMI, kön, fysisk aktivitet, rökstatus och etnicitet används som fasta confounders. Ämnets identifierare kommer att användas som slumpmässig effekt för att ta hänsyn till intra-ämneskorrelationen av utfallet. Kenward-Roger-metoden kommer att användas för beräkningen av frihetsgrader.

I avsaknad av randomisering kan modellskattningarna av säsongseffekt vara partiska av närvaron av confounders starkt korrelerade till säsong, såsom fysisk aktivitet. För att mildra potentiell bias kommer en variabelvalsmetod (elastic net) att tillämpas på den linjära mixed modellen. Slumpmässig 5-faldig korsvalidering kommer att användas för att välja den reducerade modellen och det lämpliga värdet för ridge-regressionsparametern.

Om säsongens fixa effekt behålls kommer de minsta kvadratmedlen av biologisk ålderacceleration vid varje säsong att härledas från ovanstående reducerade modell, och de parvisa skillnaderna av minsta kvadratmedel (vinter - sommar) kommer att beräknas.

P-värden associerade med den parvisa skillnaden under 0,05/3 (Bonferroni-korrigering) kommer att tolkas som indikerande på en skillnad i biologisk ålderacceleration mellan vinter och sommar för den använda klockan.

Om säsongens fixa effekt inte behålls i den reducerade modellen kommer detta att tolkas som en frånvaro av säsongsassocierad skillnad i biologisk ålderacceleration för den använda klockan.

Vid varje steg kommer den mixed linjära modellen att anpassas med hjälp av den begränsade maximala sannolikhetsalgoritmen, vilket tillåter användning av partiell information (ämnen med ofullständig bana, t.ex. 1 säsong tillgänglig av de två som behövs). Denna metod är opartisk om de saknade data saknas slumpmässigt.

I närvaro av extremvärden kommer en sensitivitetsanalys att genomföras som utesluter observation(en). Konsistens i slutsatserna mellan denna sensitivitetsanalys och huvudanalysen av den primära ändpunkten kommer att vara indikerande på frånvaron av inverkan av extremvärdena på slutsatserna.