Evaluatie van het effect van seizoensinvloeden op biologische leeftijd bij volwassenen (SeasonAGE)

Kwaliteitsmaatregelen: de onderzoeker zal de bescherming van de persoonlijke gegevens van de deelnemer waarborgen en dat alle rapporten, publicaties, deelnemermonsters en andere openbaarmakingen, behalve wanneer vereist door wetten. De verwerking van persoonlijke en medische gegevens zal de Zwitserse regelgeving inzake gegevensbescherming volgen, en in overeenstemming met de ORH (Verordening Mensgebonden Onderzoek), art. 5. Deelnemers worden alleen geïdentificeerd door een deelnemeridentificatienummer en site-identificatienummer om de vertrouwelijkheid van de deelnemer te handhaven. Op de CRF's en andere projectspecifieke documenten worden deelnemers alleen geïdentificeerd door hun unieke deelnemernummer. Alle studiedossiers van deelnemers worden veilig bewaard in een toegangsgecontroleerd gebied. Identificatiecodelijsten die deelnemersnamen koppelen aan deelnemeridentificatienummers worden apart van de deelnemerdossiers opgeslagen. De gegevens worden gecodeerd. De deelnemeridentificatielijst is alleen toegankelijk voor het siteteam en identificeerbare informatie wordt alleen bewaard in het onderzoekersdossier. Het onderzoekersdossier is een veilig en gecertificeerd elektronisch systeem (Veeva Vault) dat is bedoeld om die studie-informatie te beschermen tegen ongeoorloofde of accidentele openbaarmaking, tegen wijziging, verwijdering, kopiëren en diefstal.

De gecodeerde gegevens worden vastgelegd in het Electronic Data Capture (EDC), Medidata RAVE zorgt voor traceerbaarheid (audit trail). De in het EDC vastgelegde gegevens zijn alleen toegankelijk voor de datamanager, sitepersoneel en studieleden.

Na de analyses van biologische monsters worden de resultaten vastgelegd in een ander systeem genaamd LabKey op een wachtwoordbeveiligde manier en alleen toegankelijk voor de laboratoriumtechnici die verantwoordelijk zijn voor analyses. De definitieve laboratoriumgegevens worden vervolgens vanuit LabKey naar de toegewezen datamanager gestuurd via een beveiligde SharePoint met audit trail. RAVE en LabKey, evenals de externe resultaten, worden geïntegreerd in LSAF, een software die is toegewijd aan de statistische analyse, die wachtwoordbeveiligd is en alleen toegankelijk voor de statisticus en de datamanager. De servers van elke software en hun back-upservers zijn gehost in de Verenigde Staten (Medidata RAVE), Duitsland (LSAF) en Zwitserland (LabKey). Biologisch materiaal in dit project wordt niet geïdentificeerd door deelnemersnaam maar door een uniek deelnemernummer. Biologisch materiaal wordt op de juiste manier opgeslagen in een beperkt gebied dat alleen toegankelijk is voor geautoriseerd personeel.

In geval van gegevensoverdracht zal Société des Produits Nestlé S.A. hoge normen van vertrouwelijkheid en bescherming van de persoonlijke gegevens van de deelnemer handhaven. Klinische informatie wordt niet vrijgegeven zonder schriftelijke toestemming van de deelnemer, behalve voor monitoring door regelgevende instanties of de studiefinancier. De hoofdonderzoeker of gemachtigde zal passende technische en organisatorische maatregelen implementeren en handhaven om toegankelijkheid voor deelnemers van hun persoonlijke gegevens en hun resultaten van biologische analyse verzameld tijdens de studie te waarborgen. Op verzoek zal de hoofdonderzoeker of gemachtigde ervoor zorgen dat uittreksels van persoonlijke gegevens aan deelnemers worden verstrekt. De hoofdonderzoeker of gemachtigde zal passende procedures implementeren om de sponsor onmiddellijk te informeren over elk verzoek van een deelnemer om hun persoonlijke gegevens of biologische monsters tijdens de studie te rectificeren of te verwijderen. De onderzoekssitedossiers, inclusief de codelijst, worden bewaard en afzonderlijk gearchiveerd in een veilige repository die voldoet aan het Nestlé-beleid met betrekking tot gegevensbescherming door het onderzoeksteam gedurende 25 jaar, zelfs als de kandidaat niet is opgenomen in het onderzoeksproject. Het Trial Master File wordt afzonderlijk bewaard gedurende 25 jaar volgens het Nestlé-beleid.

Naast de huidige studie zal de deelnemers worden voorgesteld om toestemming te overwegen voor "verdere hergebruik" van hun biologische monsters en gegevens in de bredere scope van het Nestlé Center of Biological Resources (NCBR); als zij hiermee instemmen, worden de monsters en gezondheidsgerelateerde gegevens behandeld zoals beschreven in de biobankregelgeving (CERVD-advies - Req. 2020-00307).

Als zij niet instemmen, worden de gegevens alleen gebruikt in het kader van dit onderzoek. Geen gegevens worden verder gebruikt zonder goedkeuring van de ethische commissie en toestemming van de deelnemers.

Berekening steekproefomvang:

De steekproefomvang voor deze studie is gebaseerd op drie informatiebronnen. Koncevičius (2024) toonde aan dat biologische leeftijdsversnelling onderhevig is aan circadiane ritme-gerelateerde variatie (gedurende een dag) van 1 jaar amplitude. Reed (2022) toonde aan dat binnen-subject correlatie van epigenetische klok hoog is (tot een correlatie van 0,93) over herhalingen gespreid tot 15 jaar uit elkaar. Jokai (2023) toonde aan dat PhenoAge-klokversnellingsvariabiliteit in middelmatig getrainde gezonde individuen van beide geslachten ongeveer 5,4 jaar was (gemiddeld waargenomen tussen mannelijk en vrouwelijk).

Om een variatie van 1 jaar tussen winter en zomer in biologische leeftijd aan te tonen, uitgaande van een variabiliteit (standaarddeviatie) van 5,4 jaar en een binnen-deelnemers correlatie van 0,93, gebruikmakend van een gepaarde t-test benadering, 80% power en alpha ingesteld op 0,0166 (0,05/3) om rekening te houden met de multipliciteit veroorzaakt door de herhaling over 3 klokken (PhenoAge, GrimAge en DunedinPace -- Bonferroni-correctie), moet men eindigen met 46 proefpersonen in de volledige analyseset (FAS). Rekening houdend met een uitvalpercentage van 20% (proefpersonen ingeschreven maar zonder biologische leeftijd berekend op enig tijdstip), moet men 46/0,8=58 proefpersonen werven (afgerond naar 60 proefpersonen).

SAS 9.4 (LSAF v5.2.1) PROC POWER werd gebruikt voor de berekeningen.

Statistisch analyseplan:

De hoofdanalyse van het primaire eindpunt zal worden geëvalueerd op de Full Analysis Set-populatie. Een gevoeligheidsanalyse zal worden uitgevoerd door de hoofdanalyse te repliceren op de Per Protocol-set.

Voor PhenoAge en GrimAge zal biologische leeftijdsversnelling op individueel niveau worden berekend met behulp van een lineair gemengd model met biologische leeftijd (jaren) als respons en chronologische leeftijd (jaren) als confounder. De proefpersoonidentificatie zal worden opgenomen als een random effect om rekening te houden met de correlatie tussen opeenvolgende metingen van biologische leeftijd binnen de proefpersoon. De Kenward-Roger-methode zal worden gebruikt voor de berekening van de vrijheidsgraden. Voor een gegeven individu, op een gegeven chronologische leeftijd, zal de biologische leeftijdsversnelling de vaste regressieresidu zijn.

DunedinPace meet reeds een leeftijdsversnelling, daarom is de bovengenoemde transformatie niet van toepassing.

Er wordt aangenomen dat de biologische leeftijdsversnelling een normale verdeling volgt. Het verschil in biologische leeftijdsversnelling tussen seizoenen zal worden geëvalueerd met een lineair gemengd model om rekening te houden met de longitudinale aard van de gegevens en intra-subject correlatie. Biologische leeftijdsversnelling zal worden gebruikt als de uitkomstvariabele, en seizoen geassocieerd met de bemonstering, BMI, geslacht, fysieke activiteit, rookstatus en etniciteit gebruikt als vaste confounders. De proefpersoonidentificatie zal worden gebruikt als random effect om rekening te houden met de intra-subject correlatie van de uitkomst. Kenward-Roger-methode zal worden gebruikt voor de berekening van de vrijheidsgraden.

Bij afwezigheid van randomisatie kunnen de modelschattingen van seizoenseffect bevooroordeeld zijn door de aanwezigheid van confounders sterk gecorreleerd aan seizoen, zoals fysieke activiteit. Om potentiële bias te mitigeren, zal een variabelenselectiemethode (elastic net) worden toegepast op het lineair gemengd model. Willekeurige 5-voudige kruisvalidatie zal worden gebruikt voor het selecteren van het gereduceerde model en de geschikte waarde voor de ridge-regressieparameter.

Als het seizoenseffect wordt behouden, zullen de kleinste-kwadraten gemiddelden van biologische leeftijdsversnelling per seizoen worden afgeleid uit het bovenstaande gereduceerde model, en de paarsgewijze verschillen van kleinste-kwadraten gemiddelden (winter - zomer) zullen worden berekend.

P-waarden geassocieerd met het paarsgewijze verschil kleiner dan 0,05/3 (Bonferroni-correctie) zullen worden geïnterpreteerd als indicatief voor een verschil in biologische leeftijdsversnelling tussen winter en zomer voor de gebruikte klok.

Als het seizoenseffect niet wordt behouden in het gereduceerde model, zal dit worden geïnterpreteerd als een afwezigheid van seizoensgeassocieerd verschil in biologische leeftijdsversnelling voor de gebruikte klok.

In elke fase zal het gemengde lineaire model worden gefit met het restricted maximum likelihood-algoritme, waardoor het gebruik van gedeeltelijke informatie mogelijk is (proefpersonen met onvolledige traject, bv. 1 seizoen beschikbaar van de twee nodig). Deze methode is onbevooroordeeld als de ontbrekende gegevens missing at random zijn.

In de aanwezigheid van verre uitschieters zal een gevoeligheidsanalyse worden uitgevoerd waarbij de observatie(s) worden uitgesloten. Consistentie in de conclusies tussen deze gevoeligheidsanalyse en de hoofdanalyse van het primaire eindpunt zal indicatief zijn voor de afwezigheid van impact van de uitschieters op de conclusies.