Nye biomarkører i bukspyttkjertelkreft ved bruk av EXPEL-konsept (PANEXPEL)

Biomarkører som er lett påvisbare i væskebiopsier er av ytterste viktighet for diagnose og prediksjon av terapeutisk respons hos alle kreftpasienter. Pankreas duktalt adenokarsinom (PDAC) er et eksempel på en dødelig malignitet som diagnostiseres veldig sent på grunn av mangel på sensitive og pålitelige markører [1]. Forekomsten og dødeligheten av PDAC vil dobles i løpet av de neste 15 årene, noe som er enestående blant alle krefttyper [2]. Sekundær kreftforebygging gjennom tidlig diagnose av PDAC vil derfor være et viktig beredskapsmiddel for å møte den enorme helsebyrden.

Oppdagelse av diagnostiske biomarkører avhenger i hovedsak av tilgjengeligheten av pasientmateriale som ideelt sett samles inn på forskjellige tidspunkt under sykdomsprogresjonen (f. tidlig lesjon, før behandling og etter tilbakefall). Dessverre er det svært vanskelig å få tilgang til ferske biopsier fra pre-maligne lesjoner for forskningsformål. Disse trengs i sin helhet for histo-patologisk vurdering og diagnose. Evnen til å bruke flytende biopsier (f. serum, urin, spytt) ga løftet om å omgå dette problemet, og åpnet tilgang til mange forskjellige biomolekyler som sirkulerende DNA og proteiner. Men ved frigjøring fra svulsten blir disse molekylene fortynnet opptil flere milliarder ganger i blod med molekylarter som stammer fra sunt vev [3-4]. Dette hindrer de novo oppdagelsen av biomarkører for å diagnostisere og forstå sykdommen.

For å omgå disse begrensningene, utviklet etterforskerne nylig en ny tilnærming til oppdagelse av biomarkører som er ikke-destruktiv og fullt ut kompatibel med OMICS-profilering så vel som rutinemessige kliniske prosedyrer (5). Sistnevnte tilnærming – kalt EXPEL – utvinner den interstitielle vevsvæsken som er den rikeste kilden til løselige, ufortynnede og uforurensede biomarkører. Metoden gir spesielt tilgang til proteiner, metabolitter, RNA, DNA og eksosomer, og muliggjør dermed holistisk oppdagelse av biomarkører. På grunn av sin ikke-destruktive natur gir EXPEL for første gang både klinikere og forskere muligheten til å analysere identisk materiale, samtidig som de praktisk talt ikke har noen ulemper i sine respektive oppgaver. Etterforskerne har nylig vist metoden vårs evne til å finne nye markører i sammenheng med dyrebare prøver av tykktarmskreft hos mennesker. Dermed er etterforskerne overbevist om at EXPEL kan brukes med hell på kreft i bukspyttkjertelen. I tillegg, med kjennskap til den viktige andelen stroma i PDAC (vanligvis 2/3 av tumormassen), forventes sekretomet til kreft i bukspyttkjertelen å være mye rikere på løselige "kommunikasjonsfaktorer" som utveksles mellom kreftceller og vertsvev.

I klinisk praksis gjennomgår de fleste pasienter endoskopisk ultralyd med finnålsaspirasjon/biopsi av bukspyttkjertelmassen for å bekrefte diagnosen PDAC. Nålen skylles i en konserveringsvæske Cytolyt® (metanol 30% og vann 50%) og sendes til patologene. Mikrobiopsi fikseres i parafin og deretter analyseres og væske cytofiltreres for å beholde potensielle tumorceller. Resten av Cytolyt®-væsken kastes systematisk.

Denne studien er basert på hypotesen om at denne væsken, tidligere i kontakt med tumorvev, kan inneholde vevssekretomet og tillate en omfattende OMICS-analyse av PDAC (alle stadier forvirret) ved å bruke en "modifisert EXPEL"-prosedyre. Dette er ideelle forhold for EXPEL-tilnærming som i tillegg til å finne nye biomarkører også vil kaste lys over komplekse nettverk av kreftcelle-stroma-interaksjoner.

For dette formålet tar etterforskerne sikte på å utføre proteomisk analyse av konserveringsvæsken (Cytolyt) hos pasienter som gjennomgikk endoskopisk ultralyd med finnålsaspirasjon/biopsi for mistenkelig bukspyttkjertelmasse ved CHU de Montpellier mellom januar 2018 og januar 2019.