Nuovi biomarcatori nel carcinoma pancreatico utilizzando il concetto EXPEL (PANEXPEL)

I biomarcatori facilmente rilevabili nelle biopsie fluide sono della massima importanza per la diagnosi e la previsione della risposta terapeutica in tutti i pazienti oncologici. L'adenocarcinoma duttale pancreatico (PDAC) è un esempio di tumore maligno mortale che viene diagnosticato molto tardi a causa della mancanza di marcatori sensibili e affidabili [1]. L'incidenza e la mortalità del PDAC raddoppieranno nei prossimi 15 anni, il che non ha precedenti tra tutti i tipi di cancro [2]. La prevenzione secondaria del cancro attraverso la diagnosi precoce del PDAC sarà quindi una risorsa essenziale per affrontare l'immenso onere sanitario.

La scoperta di biomarcatori diagnostici dipende essenzialmente dalla disponibilità di materiale del paziente idealmente raccolto in momenti diversi durante la progressione della malattia (ad es. lesione precoce, prima del trattamento e dopo la recidiva). Sfortunatamente, è molto difficile accedere a nuove biopsie da lesioni pre-maligne per scopi di ricerca. Questi sono necessari nella loro interezza per la valutazione istopatologica e la diagnosi. La possibilità di utilizzare biopsie liquide (ad es. siero, urina, saliva) ha portato la promessa di aggirare questo problema, aprendo l'accesso a molte biomolecole diverse come il DNA circolante e le proteine. Tuttavia, dopo il loro rilascio dal tumore, queste molecole vengono diluite fino a diversi miliardi di volte nel sangue con specie molecolari originate da tessuti sani [3-4]. Ciò ostacola la scoperta de novo di biomarcatori per la diagnosi e la comprensione della malattia.

Per aggirare queste limitazioni, i ricercatori hanno recentemente progettato un nuovo approccio alla scoperta di biomarcatori non distruttivo e pienamente compatibile con la profilazione OMICS e con le procedure cliniche di routine (5). Quest'ultimo approccio, chiamato EXPEL, estrae il fluido del tessuto interstiziale che è la fonte più ricca di biomarcatori solubili, non diluiti e incontaminati. Il metodo fornisce in particolare l'accesso a proteine, metaboliti, RNA, DNA ed esosomi, consentendo così la scoperta di biomarcatori olistici. Grazie alla sua natura non distruttiva, EXPEL offre per la prima volta sia ai medici che ai ricercatori l'opportunità di analizzare materiale identico, pur non avendo praticamente alcuno svantaggio nei rispettivi compiti. I ricercatori hanno recentemente dimostrato la capacità della nostra metodologia di trovare nuovi marcatori nel contesto di preziosi campioni di cancro colorettale umano. Pertanto, i ricercatori sono convinti che EXPEL possa essere applicato con successo al cancro del pancreas. Inoltre, conoscendo l'importante proporzione di stroma nel PDAC (di solito 2/3 della massa tumorale), si prevede che il secretoma del cancro pancreatico sia molto più ricco di "fattori di comunicazione" solubili scambiati tra le cellule tumorali e il tessuto ospite.

Nella pratica clinica, la maggior parte dei pazienti viene sottoposta ad ecografia endoscopica con agoaspirato/biopsia della massa pancreatica per confermare la diagnosi di PDAC. L'ago viene lavato in un liquido di conservazione Cytolyt® (Metanolo 30% et acqua 50%) e inviato ai patologi. La microbiopsia viene fissata in paraffina, quindi analizzata e il liquido viene citofiltrato per mantenere potenziali cellule tumorali. Il liquido Cytolyt® rimanente viene sistematicamente cestinato.

Il presente studio si basa sull'ipotesi che questo liquido, precedentemente a contatto con il tessuto tumorale, possa contenere il secretoma tissutale e consentire un'analisi OMICS completa del PDAC (tutti gli stadi confusi) utilizzando una procedura "EXPEL modificata". Queste sono le condizioni ideali per l'approccio EXPEL che, oltre a trovare nuovi biomarcatori, farà anche luce sulla complessa rete di interazioni cellula tumorale - stroma.

A tal fine, i ricercatori mirano a eseguire analisi proteomiche sul liquido di conservazione (Cytolyt) in pazienti sottoposti a ecografia endoscopica con aspirazione/biopsia con ago sottile per massa pancreatica sospetta presso il CHU de Montpellier tra gennaio 2018 e gennaio 2019.