Novos Biomarcadores em Câncer de Pâncreas Usando o Conceito EXPEL (PANEXPEL)

Os biomarcadores que são prontamente detectáveis ​​em biópsias de fluidos são de extrema importância para o diagnóstico e previsão da resposta terapêutica em todos os pacientes com câncer. O adenocarcinoma ductal pancreático (PDAC) é um exemplo de malignidade mortal que é diagnosticado muito tarde devido à falta de marcadores sensíveis e confiáveis ​​[1]. A incidência e a mortalidade do PDAC dobrarão nos próximos 15 anos, o que é inédito entre todos os tipos de câncer [2]. A prevenção secundária do câncer por meio do diagnóstico precoce do PDAC será, portanto, um recurso de preparação essencial para enfrentar a imensa carga de saúde.

A descoberta de biomarcadores diagnósticos depende essencialmente da disponibilidade de material do paciente idealmente coletado em diferentes momentos durante a progressão da doença (p. lesão precoce, antes do tratamento e após a recidiva). Infelizmente, é muito difícil acessar biópsias recentes de lesões pré-malignas para fins de pesquisa. Estes são necessários em sua totalidade para avaliação e diagnóstico histopatológico. A capacidade de usar biópsias líquidas (por exemplo, soro, urina, saliva) trazia a promessa de contornar esse problema, abrindo acesso a diversas biomoléculas como DNA circulante e proteínas. No entanto, ao serem liberadas do tumor, essas moléculas são diluídas até vários bilhões de vezes no sangue com espécies moleculares originárias de tecidos saudáveis ​​[3-4]. Isso dificulta a descoberta de novos biomarcadores para diagnosticar e compreender a doença.

Para contornar essas limitações, os pesquisadores criaram recentemente uma nova abordagem de descoberta de biomarcadores que é não destrutiva e totalmente compatível com o perfil OMICS, bem como com os procedimentos clínicos de rotina (5). A última abordagem - denominada EXPEL - extrai o fluido do tecido intersticial que é a fonte mais rica de biomarcadores solúveis, não diluídos e não contaminados. O método dá acesso a proteínas, metabólitos, RNA, DNA e exossomos, permitindo assim a descoberta holística de biomarcadores. Devido à sua natureza não destrutiva, o EXPEL oferece pela primeira vez aos clínicos e pesquisadores a oportunidade de analisar materiais idênticos, sem praticamente nenhuma desvantagem em suas respectivas tarefas. Os investigadores demonstraram recentemente a capacidade de nossa metodologia para encontrar novos marcadores no contexto de amostras preciosas de câncer colorretal humano. Assim, os investigadores estão convencidos de que o EXPEL pode ser aplicado com sucesso ao câncer pancreático. Além disso, conhecendo a importante proporção de estroma no PDAC (geralmente 2/3 da massa tumoral), espera-se que o secretoma do câncer pancreático seja muito mais rico em "fatores de comunicação" solúveis trocados entre as células cancerígenas e o tecido hospedeiro.

Na prática clínica, a maioria dos pacientes realiza ultrassonografia endoscópica com agulha fina aspirativa/biópsia da massa pancreática para confirmar o diagnóstico de PDAC. A agulha é lavada em um líquido de conservação Cytolyt® (Metanol 30% e água 50%) e enviada aos patologistas. As microbiópsias são fixadas em parafina e depois analisadas e o líquido é citofiltrado para manter as células tumorais em potencial. O líquido remanescente do Cytolyt® é sistematicamente descartado.

O presente estudo baseia-se na hipótese de que esse líquido, previamente em contato com o tecido tumoral, poderia conter o secretoma tecidual e permitir uma análise OMICS abrangente do PDAC (todos os estágios confundidos) usando um procedimento "EXPEL modificado". Estas são condições ideais para a abordagem EXPEL que, além de encontrar novos biomarcadores, também lançará luz sobre a complexa rede de interações entre células cancerígenas e estroma.

Para tanto, os pesquisadores pretendem realizar análises proteômicas no líquido de conservação (Cytolyt) em pacientes submetidos a ultrassom endoscópico com aspiração por agulha fina/biópsia para massa pancreática suspeita no CHU de Montpellier entre janeiro de 2018 e janeiro de 2019.