Luftveisremodellering under Mepolizumab-behandling (REMOMEPO)

1. Vitenskapelig begrunnelse og hypotese:

   Kroniske luftveisendringer, som glattmuskelhypertrofi/hyperplasi, fortykning av retikulær basalmembran, hyperplasi av begerceller karakteriserer alvorlig astma. Kronisk betennelse, og spesielt eosinofili og T2 cytokiner er involvert i disse strukturelle endringene. Økt ASM-lag har blitt assosiert med eosinofili for eksempel, men ikke RBM-fortykning, noe som tyder på at differensielle mønstre for ombygging kan observeres i henhold til inflammatoriske mønstre. Omalizumab, en anti-IgE-terapi, kan redusere enkelte funksjoner ved remodellering av luftveiene, spesielt RBM og noen parametere relatert til ASM. Ingen data er tilgjengelig om potensielle endringer i luftveisremodellering indusert av mepolizumab.

   Målet med studien er å vurdere luftveisendringer, vurdert ved bronkialbiopsier, indusert av mepolizumab hos alvorlige astmapasienter som vil motta behandlingen som en del av standardbehandlingen.

   Alle astmapasienter henvist til astmaklinikken foreslås å delta i COBRA-kohorten (fransk nasjonal astmakohort). Serum og DNA samles ved inklusjon og hver 6. måned. Fiberoptisk bronkoskopi (FOB) utføres rutinemessig som en del av standardbehandlingen for vanskelig til alvorlig astma i vårt senter i mange år, for å vurdere differensialdiagnose og inflammatorisk mønster siden Fraksjonert utåndet nitrogenoksid (FeNO) ikke rutinemessig utføres i Frankrike. BAL og 4 til 6 bronkialbiopsier utføres.

2. Studiepopulasjon:

   Pasienter med alvorlig astma, henvist til alvorlig astmasenter i Bichat og Bicetre sykehus, som får mepolizumab i henhold til franske anbefalinger (eos >300mm3 året før, >2 eksacerbasjoner, til tross for optimal trinn 4-5 behandling, inkludert daglig bruk av steroider).

3. Studiedesign og metoder:

   • Generell studiedesign Prospektiv, observasjonsstudie i ett senter for alvorlig astma: Bichat Hospital (Prof C.Taillé).

     40 pasienter vil bli prospektivt inkludert i løpet av en 32 måneders periode.

Denne studien tar sikte på å vurdere:

• Endringer i RBM-fortykning, i ASM-området etter 6 måneder og 12 måneders behandling med mepolizumab
• Endringer i BAL-nivåer av inflammatoriske og remodellerende mediatorer og av ECM-komponenter etter 6 måneder og 12 måneder med mepolizumab-behandling
• Endringer i antall PGP9-seksjoner i bronkialveggen etter 6 måneder og 12 måneders behandling med mepolizumab
• Forholdet mellom klinisk respons på mepolizumab og ombyggingsendringer etter 6 måneder og 12 måneders behandling med mepolizumab
• Demografiske og kliniske karakteristika for astma (atopi, nivå av astmakontroll, FEV1...) vil være tilgjengelig ved inkludering og oppfølging, for å vurdere klinisk effekt av mepolizumabbehandling.

Følgende vil fungere ved inkludering, 6 måneder og 12 måneder etter oppstart av mepolizumab:

• klinisk evaluering (alder, BMI, atopisk status, kronisk rhinosinusitt, daglige doser av steroider, eksaserbasjoner...)
• fordelen med mepolizumab vil bli evaluert i henhold til legens Global Evaluation of Treatment Effectiveness (GETE)
• astmakontrolltest
• lungefunksjonstest (FEV1, FEV1/VC, TLC, RV, pre/post salbutamol)
• FOB med BAL og 6 biopsier ved inklusjon, 6 måneder og 12 måneder

• Blodprøve for eosinofiltall og serumkonservering.

  • Studiegrupper/armer Gruppe 1 (prospektive): pasienter som starter en mepolizumab-behandling. Gruppe 2 (retrospektiv): for å vurdere luftveisendringer som kan "spontant" oppstå i løpet av en 12-måneders periode, en retrospektiv "historisk gruppe" av pasienter inkludert i den forrige ASMATHERM-studien som hadde 2 sett med biopsier og BAL innen 6 til 12 månedsintervall, uten eksponering for mepolizumab og uten endring i behandlingen i løpet av dette intervallet, vil bli studert som en kontrollgruppe. Kliniske data er tilgjengelige ved inklusjon og etter 12 måneder.
  • Hovedtester eller prosedyrer Alle biopsier, BAL og serumanalyser vil bli utført i UMR1152 laboratorieenheten (leder: Dr Marina Pretolani).

Biopsier fikseres i formaldehyd og behandles til parafinvoks for immunhistokjemiske (IHC) og morfometriske studier. En biopsi vil bli lagret ved -80 °C for ytterligere RNAseq-analyser.

RBM-tykkelse (morfometri), ASM-areal og frekvensen av ASM-prolifererende celler (PCNA-immunfarging) vil bli målt. PGP9-farging kan vurdere antall nerver i bronkialveggen.

Antall inflammatoriske celler (eosinofiler, nøytrofiler, mastceller, T-lymfocytter evaluert henholdsvis ved MBP, elastase, tryptase, CD4-ekspresjon) og vaskulære seksjoner vil også telles opp etter IHC. Lokalisering av eosinofiler i luftveiene vil bli beskrevet.

Cytospin-preparater fra BAL-cellepellets vil bli brukt for å vurdere andelen eosinofiler og nøytrofiler.

Parallelt vil nivåene av forskjellige pro-inflammatoriske og remodellerende mediatorer måles i BAL-alikvoter konsentrert x 10, ved spesifikke Elisa- og Luminex-analyser.

• Prøveplan

V0: visningsbesøk

V1: inkluderingsbesøk

• klinisk evaluering
• Astmakontrolltest
• Lungefunksjonstest
• Fiberoptisk fibroskopi med BAL og bronkialbiopsier (merk at hvis en fiberoptisk fibroskopi med BAL og bronkialbiopsier allerede er utført i måneden før inklusjonen, vil den ikke gjentas ved inklusjonen, og vevs- og BALprøvene vil bli hentet for analyse )
• Blodprøvetaking
• første behandling med Mepolizumab administreres på sykehuset.
• Pasientinjeksjonstrening dersom denne resepten er valgt
• Resept på Mepolizumab, gitt hjemme de neste 6 månedene

V2: 6 måneders besøk

• Klinisk responsvurdering av GETE og ACT, klinisk evaluering
• Lungefunksjonstest
• Fiberoptisk fibroskopi med BAL og bronkialbiopsier
• Blodprøvetaking
• Hvis responderer, fortsettelse av Mepolizumab-behandling
• Samsvarsevaluering (fil signert av sykepleier eller pasient etter hver injeksjon)

V3: 12 måneders besøk

• klinisk responsvurdering av GETE og ACT, klinisk evaluering
• Lungefunksjonstest
• Fiberoptisk fibroskopi med BAL og bronkialbiopsier
• Blodprøvetaking
• Samsvarsevaluering (fil signert av sykepleier eller pasient etter hver injeksjon)