Remodeling der Atemwege während der Behandlung mit Mepolizumab (REMOMEPO)

1. Wissenschaftliche Begründung & Hypothese:

   Chronische Atemwegsveränderungen wie Hypertrophie/Hyperplasie der glatten Muskulatur, Verdickung der retikulären Basalmembran, Hyperplasie der Becherzellen charakterisieren schweres Asthma. Chronische Entzündungen und insbesondere Eosinophilie und T2-Zytokine sind an diesen strukturellen Veränderungen beteiligt. Eine erhöhte ASM-Schicht wurde beispielsweise mit Eosinophilie in Verbindung gebracht, jedoch nicht mit einer RBM-Verdickung, was darauf hindeutet, dass unterschiedliche Muster der Remodellierung gemäß Entzündungsmustern beobachtet werden können. Omalizumab, eine Anti-IgE-Therapie, kann einige Merkmale des Atemwegsumbaus reduzieren, insbesondere RBM und einige Parameter im Zusammenhang mit ASM. Es liegen keine Daten zu möglichen durch Mepolizumab induzierten Veränderungen der Atemwegsumgestaltung vor.

   Das Ziel der Studie ist die Beurteilung von Atemwegsveränderungen, die durch Bronchialbiopsien festgestellt wurden und durch Mepolizumab bei Patienten mit schwerem Asthma, die die Behandlung als Teil ihrer Standardversorgung erhalten, induziert werden.

   Allen Asthmapatienten, die an die Asthmaklinik überwiesen werden, wird die Teilnahme an der COBRA-Kohorte (französische nationale Asthmakohorte) vorgeschlagen. Serum und DNA werden beim Einschluss und alle 6 Monate gesammelt. Fiberoptische Bronchoskopie (FOB) wird in unserem Zentrum seit vielen Jahren routinemäßig als Teil der Standardversorgung bei schwer schwerem Asthma durchgeführt, um die Differentialdiagnose und das Entzündungsmuster zu beurteilen, da fraktioniertes ausgeatmetes Stickstoffmonoxid (FeNO) in Frankreich nicht routinemäßig durchgeführt wird. BAL und 4 bis 6 Bronchialbiopsien werden durchgeführt.

2. Studienpopulation:

   Patienten mit schwerem Asthma, die an das Zentrum für schweres Asthma in den Krankenhäusern Bichat und Bicetre überwiesen wurden und Mepolizumab gemäß den französischen Empfehlungen erhielten (eos > 300 mm3 im Vorjahr, > 2 Exazerbationen trotz optimaler Therapie der Schritte 4-5, einschließlich täglicher Anwendung von Steroiden).

3. Studiendesign & Methoden:

   • Allgemeines Studiendesign Prospektive Beobachtungsstudie in einem Zentrum für schweres Asthma: Bichat Hospital (Prof. C. Taillé).

     40 Patienten werden prospektiv über einen Zeitraum von 32 Monaten eingeschlossen.

Diese Studie zielt darauf ab, Folgendes zu bewerten:

• Veränderungen der RBM-Verdickung im ASM-Bereich nach 6 Monaten und 12 Monaten Mepolizumab-Behandlung
• Veränderungen der BAL-Spiegel von Entzündungs- und Umbaumediatoren und von ECM-Komponenten nach 6 Monaten und 12 Monaten Behandlung mit Mepolizumab
• Veränderungen in der Anzahl der PGP9-Schnitte in der Bronchialwand nach 6 Monaten und 12 Monaten Behandlung mit Mepolizumab
• Zusammenhang zwischen klinischem Ansprechen auf Mepolizumab und Remodeling-Veränderungen nach 6 Monaten und 12 Monaten Mepolizumab-Behandlung
• Demografische und klinische Merkmale von Asthma (Atopie, Grad der Asthmakontrolle, FEV1…) werden bei Aufnahme und Nachsorge verfügbar sein, um die klinische Wirkung der Behandlung mit Mepolizumab zu beurteilen.

Folgendes wird bei der Aufnahme, 6 Monate und 12 Monate nach Beginn der Mepolizumab-Behandlung durchgeführt:

• klinische Bewertung (Alter, BMI, atopischer Status, chronische Rhinosinusitis, tägliche Dosen von Steroiden, Exazerbationen…)
• Der Nutzen von Mepolizumab wird gemäß der Global Evaluation of Treatment Effectiveness (GETE) des Arztes bewertet.
• Asthma-Kontrolltest
• Lungenfunktionstest (FEV1, FEV1/VC, TLC, RV, vor/nach Salbutamol)
• FOB mit BAL und 6 Biopsien bei Einschluss, 6 Monate und 12 Monate

• Bluttest für Eosinophilenzahl und Serumkonservierung.

  • Studiengruppen/Arme Gruppe 1 (prospektiv): Patienten, die eine Behandlung mit Mepolizumab beginnen. Gruppe 2 (retrospektiv): Zur Beurteilung von Atemwegsveränderungen, die „spontan“ während eines Zeitraums von 12 Monaten auftreten können, eine retrospektive „historische Gruppe“ von Patienten, die in die vorherige ASMATHERM-Studie aufgenommen wurden und bei denen innerhalb von 6 bis 12 2 Sätze Biopsien und BAL durchgeführt wurden Monatsintervall ohne Mepolizumab-Exposition und ohne Änderung ihrer Behandlung während dieses Intervalls als Kontrollgruppe untersucht. Klinische Daten sind bei Aufnahme und nach 12 Monaten verfügbar.
  • Haupttests oder -verfahren Alle Biopsien, BAL- und Serumanalysen werden in der Laboreinheit UMR1152 (Leiterin: Dr. Marina Pretolani) durchgeführt.

Biopsien werden in Formaldehyd fixiert und für immunhistochemische (IHC) und morphometrische Untersuchungen zu Paraffinwachs verarbeitet. Eine Biopsie wird für weitere RNAseq-Analysen bei -80 °C gelagert.

Die RBM-Verdickung (Morphometrie), die ASM-Fläche und die Rate der ASM-proliferierenden Zellen (PCNA-Immunfärbung) werden gemessen. Die PGP9-Färbung kann die Anzahl der Nerven in der Bronchialwand beurteilen.

Die Anzahl der Entzündungszellen (Eosinophile, Neutrophile, Mastzellen, T-Lymphozyten, bewertet jeweils durch MBP, Elastase, Tryptase, CD4-Expression) und Gefäßschnitte wird ebenfalls nach IHC aufgezählt. Die Lokalisierung von Eosinophilen in den Atemwegen wird beschrieben.

Cytospin-Präparate aus BAL-Zellpellets werden verwendet, um den Anteil an Eosinophilen und Neutrophilen zu bestimmen.

Parallel dazu werden die Konzentrationen verschiedener entzündungsfördernder und umgestaltender Mediatoren in 10-fach konzentrierten BAL-Aliquoten durch spezifische Elisa- und Luminex-Assays gemessen.

• Versuchsplan

V0: Screening-Besuch

V1: Inklusionsbesuch

• klinische Bewertung
• Asthmakontrolltest
• Lungenfunktionstest
• Faseroptische Fibroskopie mit BAL und Bronchialbiopsien (beachten Sie, dass, wenn bereits im Monat vor dem Einschluss eine Fiberoptische Fibroskopie mit BAL und Bronchialbiopsien durchgeführt wurde, diese beim Einschluss nicht wiederholt wird und die Gewebe- und BAL-Proben zur Analyse entnommen werden )
• Blutprobe
• Die Erstbehandlung mit Mepolizumab erfolgt im Krankenhaus.
• Patienteninjektionsschulung, wenn diese Verschreibung gewählt wird
• Rezept für Mepolizumab, das für die nächsten 6 Monate zu Hause gegeben wird

V2: 6-monatiger Besuch

• Bewertung des klinischen Ansprechens durch GETE und ACT, klinische Bewertung
• Lungenfunktionstest
• Faseroptische Fibroskopie mit BAL und Bronchialbiopsien
• Blutprobe
• Bei Ansprechen Fortsetzung der Behandlung mit Mepolizumab
• Compliance-Bewertung (Datei, die nach jeder Injektion von der Krankenschwester oder dem Patienten unterzeichnet wird)

V3: 12-monatiger Besuch

• Bewertung des klinischen Ansprechens durch GETE und ACT, klinische Bewertung
• Lungenfunktionstest
• Faseroptische Fibroskopie mit BAL und Bronchialbiopsien
• Blutprobe
• Compliance-Bewertung (Datei, die nach jeder Injektion von der Krankenschwester oder dem Patienten unterzeichnet wird)