Utvikling av biomarkører for overvåking av overgangsalder hos kvinner

Bakgrunn ： likestilling og rettferdig helse har dukket opp som internasjonale trender de siste årene. Til tross for eksisterende løsninger for kvinners helseproblemer, forblir mange behov uoppfylte. I følge anslag forventes den globale overgangsalderen å nå 1,2 milliarder innen 2030, og overgå forekomsten av de vanligste kroniske sykdommene. For tiden eksisterer løsninger for vanlige menopausale symptomer som hetetokter, nattesvette, tretthet, irritabilitet og urininkontinens. Uoppløste utfordringer omfatter imidlertid psykologiske endringer og overvåkningssystemer. Derfor har dette prosjektet som mål å utvikle biomarkører for overgangsalder hos kvinner som et fremtidig overvåkingssystem.

De fleste kvinner går inn i overgangsalderen mellom 48 og 52 år. I løpet av denne perioden opphører eggstokkene aktiviteter, noe som fører til ettårsperioden etter utseendet til betydelige menstruasjonsregelmessigheter, kjent som overgangsovergangen eller perimenopause (1). Etter hvert som eggstokkfunksjonen gradvis avtar og østrogensekresjonen reduseres, oppstår forskjellige systemiske endringer, noe som resulterer i flere overgangsalderrelaterte forhold som osteoporose, hjerte- og karsykdommer og urinsystemproblemer. Nedgangen i østrogen utløser en negativ tilbakemeldingssløyfe, noe som forårsaker en økning i follikkelstimulerende hormon (FSH) sekresjon og en reduksjon i E2 (17β-østradiol) produksjon (2). For øyeblikket kan overgangsalderhormonbehandling (MHT) ved bruk av østrogen lindre menopausale symptomer og gjenopprette de totale E2-nivåene, men senker ikke FSH til premenopausal nivåer (3-4). En presis biomarkør for overvåking av overgangsalderen er imidlertid ennå ikke etablert. Under østrogenmangel kan mitokondriell morfologi og funksjon bli kompromittert, mens østrogen -tilstedeværelse angår reduserte oksidative reaksjoner, forbedret luftveisfunksjon og stabile membranegenskaper (5). Dette prosjektet tar sikte på å gi et omfattende syn gjennom metabolomics for å identifisere biomarkører innen mitokondrier som kan brukes til overgangsovervåking.

Studiedesign ： Denne studien er en tverrsnittsstudie. Totalt 100 kvinner vil bli inkludert og gruppert i tre kategorier: 25 tilfeller av reproduktiv periode, 50 tilfeller av perimenopausal overgangsperiode og 25 tilfeller av postmenopausal periode. Det perifere blodet vil bli samlet. Etter mitokondriell ekstraksjon gjennomføres både kvalitative og kvantitative analyser. Proteinmarkører med høy tillit er identifisert som kandidatmolekyler ved bruk av kombinerte data fra RNA-Seq og LC/MS/MS. Disse kandidatmarkørene vil gjennomgå ytterligere valideringstesting.

Metoder ： Etter ficoll -separasjon vil perifert blod bli delt inn i mononukleære celler, plasma og røde blodlegemer. Ytterligere ekstraksjon av mitokondrier vil bli utført fra både mononukleære celler og plasma. Kvantitative eksperimenter involverer hippocampale målinger av metabolsk energi og JC-1-vurdering av mitokondriell helse, mens mitokondriell DNA-kopienummer vil bli evaluert ved bruk av digital PCR. Kvalitativ eksperimentell analyse bruker Western blotting for å vurdere markører som cytokrom C og Hsp60 for mitokondrier og PCNA for nukleære proteiner. Kandidatbiomarkørvalideringseksperimenter bruker kombinert data fra RNA-Seq og LC/MS/MS for å identifisere proteinmarkører med høy tillit som kandidater, som ytterligere er validert for gjennomførbarhet ved bruk av ELISA-metoden.

Effekt:

1. Forstå endringene i mitokondriell kvalitet og mengde under perimenopausal overgang hos kvinner.
2. Utvikle overvåkningsindikatorer for perimenopausal overgang hos kvinner.