Desarrollo de biomarcadores para monitorear la menopausia en mujeres

Antecedentes: la igualdad de género y la salud equitativa han surgido como tendencias internacionales en los últimos años. A pesar de las soluciones existentes para los problemas de salud de las mujeres, muchas necesidades permanecen insatisfechas. Según las proyecciones, se espera que la población menopáusica global alcance los 1.200 millones para 2030, superando la prevalencia de las enfermedades crónicas más comunes. Actualmente, existen soluciones para síntomas menopáusicos comunes como sofocos, sudores nocturnos, fatiga, irritabilidad e incontinencia urinaria. Sin embargo, los desafíos no resueltos abarcan cambios psicológicos y sistemas de monitoreo. Por lo tanto, este proyecto tiene como objetivo desarrollar biomarcadores para la menopausia en las mujeres como un sistema de monitoreo futuro.

La mayoría de las mujeres ingresan a la menopausia entre las edades de 48 y 52. Durante este período, los folículos ováricos cesan la actividad, lo que lleva al período de un año después de la aparición de irregularidades menstruales significativas, conocidas como transición menopáusica o perimenopausia (1). A medida que la función ovárica disminuye gradualmente y la secreción de estrógenos disminuye, ocurren varios cambios sistémicos, lo que resulta en varias afecciones relacionadas con la menopausia, como la osteoporosis, las enfermedades cardiovasculares y los problemas del sistema urinario. La disminución en el estrógeno desencadena un circuito de retroalimentación negativa, causando un aumento en la secreción de hormona estimulante del folículo (FSH) y una reducción en la producción de E2 (17β-estradiol) (2). Actualmente, la terapia hormonal menopáusica (MHT) que usa estrógenos puede aliviar los síntomas menopáusicos y restaurar los niveles generales de E2, pero no disminuye el FSH a los niveles premenopáusicos (3-4). Sin embargo, aún no se ha establecido un biomarcador preciso para monitorear la menopausia. Bajo deficiencia de estrógenos, la morfología y la función mitocondriales pueden verse comprometidas, mientras que la presencia de estrógenos se relaciona con reacciones oxidativas reducidas, una función respiratoria mejorada y propiedades de membrana estables (5). Este proyecto tiene como objetivo proporcionar una visión integral a través de la metabolómica para identificar biomarcadores dentro de las mitocondrias que pueden usarse para el monitoreo de la menopausia.

Diseño del estudio: Este estudio es un estudio transversal. Se incluirán un total de 100 mujeres y se agruparán en tres categorías: 25 casos de período reproductivo, 50 casos de período de transición perimenopáusica y 25 casos de período posmenopáusico. Se recolectará la sangre periférica. Después de la extracción mitocondrial, se realizan análisis cualitativos y cuantitativos. Los marcadores de proteínas de alta confianza se identifican como moléculas candidatas que utilizan datos combinados de RNA-seq y LC/MS/MS. Estos marcadores candidatos se someterán a pruebas de validación adicionales.

Métodos: Después de la separación de Ficoll, la sangre periférica se dividirá en células mononucleares, plasma y glóbulos rojos. Se llevará a cabo una extracción adicional de mitocondrias a partir de células mononucleares y plasma. Los experimentos cuantitativos implican mediciones del hipocampo de energía metabólica y la evaluación de JC-1 de la salud mitocondrial, mientras que el número de copias de ADN mitocondrial se evaluará utilizando PCR digital. El análisis experimental cualitativo emplea la transferencia Western para evaluar marcadores como el citocromo C y Hsp60 para mitocondrias y PCNA para proteínas nucleares. Los experimentos de validación de biomarcadores candidatos utilizan datos combinados de RNA-seq y LC/MS/MS para identificar marcadores de proteínas de alta confianza como candidatos, que se validan aún más para la viabilidad utilizando el método ELISA.

Efecto:

1. Comprenda los cambios en la calidad y cantidad mitocondriales durante la transición perimenopáusica en las mujeres.
2. Desarrollar indicadores de monitoreo para la transición perimenopáusica en mujeres.