Sviluppo di biomarcatori per il monitoraggio della menopausa nelle donne

Contesto ： L'uguaglianza di genere e l'equa salute sono emersi come tendenze internazionali negli ultimi anni. Nonostante le soluzioni esistenti per i problemi di salute delle donne, molte esigenze rimangono insoddisfatte. Secondo le proiezioni, la popolazione globale della menopausa dovrebbe raggiungere 1,2 miliardi entro il 2030, superando la prevalenza delle malattie croniche più comuni. Attualmente esistono soluzioni per sintomi di menopausa comuni come vampate di calore, sudore notturna, affaticamento, irritabilità e incontinenza urinaria. Tuttavia, le sfide irrisolte comprendono cambiamenti psicologici e sistemi di monitoraggio. Pertanto, questo progetto mira a sviluppare biomarcatori per la menopausa nelle donne come futuro sistema di monitoraggio.

La maggior parte delle donne entra in menopausa di età compresa tra 48 e 52 anni. Durante questo periodo, i follicoli ovarici cessano l'attività, portando al periodo di un anno in seguito alla comparsa di significative irregolarità mestruali, nota come transizione o perimenopausa menopausa (1). Man mano che la funzione ovarica diminuisce gradualmente e la secrezione di estrogeni diminuisce, si verificano vari cambiamenti sistemici, con conseguenti diverse condizioni legate alla menopausa come l'osteoporosi, le malattie cardiovascolari e i problemi del sistema urinario. Il declino dell'estrogeno innesca un circuito di feedback negativo, causando un aumento della secrezione di ormoni stimolanti i follicoli (FSH) e una riduzione della produzione E2 (17β-estradiolo) (2). Attualmente, la terapia dell'ormone menopausale (MHT) che usa gli estrogeni può alleviare i sintomi della menopausa e ripristinare i livelli complessivi di E2 ma non abbassa i livelli di FSH a premenopausa (3-4). Tuttavia, non è stato ancora stabilito un biomarcatore preciso per il monitoraggio della menopausa. Sotto la carenza di estrogeni, la morfologia e la funzione mitocondriale possono essere compromesse, mentre la presenza degli estrogeni si riferisce a una ridotta reazioni ossidative, una maggiore funzione respiratoria e proprietà di membrana stabili (5). Questo progetto mira a fornire una visione completa attraverso la metabolomica per identificare i biomarcatori all'interno dei mitocondri che possono essere utilizzati per il monitoraggio della menopausa.

Progettazione dello studio ： Questo studio è uno studio trasversale. Un totale di 100 donne saranno incluse e raggruppate in tre categorie: 25 casi di periodo riproduttivo, 50 casi di periodo di transizione perimenopausale e 25 casi di periodo postmenopausale. Il sangue periferico verrà raccolto. Dopo l'estrazione mitocondriale, vengono condotte analisi qualitative e quantitative. I marcatori proteici ad alta fiducia sono identificati come molecole candidate utilizzando dati combinati da RNA-Seq e LC/MS/MS. Questi marcatori candidati subiranno ulteriori test di convalida.

Metodi ： Dopo la separazione di Ficoll, il sangue periferico sarà diviso in cellule mononucleate, plasma e globuli rossi. Un'ulteriore estrazione di mitocondri sarà effettuata da cellule mononucleari e plasma. Gli esperimenti quantitativi coinvolgono misurazioni ippocampali dell'energia metabolica e la valutazione JC-1 della salute mitocondriale, mentre il numero di copie del DNA mitocondriale verrà valutato utilizzando la PCR digitale. L'analisi sperimentale qualitativa impiega Western blotting per valutare marcatori come il citocromo C e HSP60 per mitocondri e PCNA per proteine ​​nucleari. Gli esperimenti di validazione dei biomarcatori candidati utilizzano dati combinati da RNA-Seq e LC/MS/MS per identificare i marcatori di proteine ​​ad alta fiducia come candidati, che sono ulteriormente validati per la fattibilità usando il metodo ELISA.

Effetto:

1. Comprendere i cambiamenti nella qualità e nella quantità mitocondriale durante la transizione perimenopausa nelle donne.
2. Sviluppare indicatori di monitoraggio per la transizione perimenopausa nelle donne.