Rozwój biomarkerów do monitorowania menopauzy u kobiet

Tło ： Równość płci i sprawiedliwe zdrowie pojawiły się w ostatnich latach jako międzynarodowe trendy. Pomimo istniejących rozwiązań problemów zdrowotnych kobiet, wiele potrzeb pozostaje niezaspokojonych. Według prognoz globalna populacja menopauzy osiągnie 1,2 miliarda do 2030 r., Przekraczając rozpowszechnienie najczęstszych chorób przewlekłych. Obecnie istnieją rozwiązania dla typowych objawów menopauzy, takich jak błyski gorąca, nocne poty, zmęczenie, drażliwość i nietrzymanie moczu. Jednak nierozwiązane wyzwania obejmują zmiany psychologiczne i systemy monitorowania. Dlatego ten projekt ma na celu opracowanie biomarkerów menopauzy u kobiet jako przyszłego systemu monitorowania.

Większość kobiet wchodzi w menopauzę w wieku od 48 do 52 lat. W tym okresie pęcherzyki jajnika przestają aktywność, co prowadzi do okresu rocznego po pojawieniu się znacznych nieregularności menstruacyjnych, zwanych przejściem menopauzalnym lub okołomenopauzą (1). Ponieważ funkcja jajników stopniowo spada, a wydzielanie estrogenu zmniejsza się, zachodzą różne zmiany ogólnoustrojowe, co powoduje kilka stanów związanych z menopauzą, takimi jak osteoporoza, choroby sercowo-naczyniowe i problemy z układem moczowym. Spadek estrogenu powoduje ujemne pętlę sprzężenia zwrotnego, powodując wzrost wydzielania hormonu stymulującego pęcherzyk (FSH) i zmniejszenie produkcji E2 (17β-estradiolu) (2). Obecnie terapia hormonów menopauzy (MHT) z wykorzystaniem estrogenu może złagodzić objawy menopauzy i przywrócić ogólne poziomy E2, ale nie obniża poziomów FSH do poziomów przedmieścia (3-4). Jednak precyzyjny biomarker monitorowania menopauzy nie został jeszcze ustalony. Zgodnie z niedoborem estrogenu morfologia i funkcja mitochondrialna może być zagrożona, podczas gdy obecność estrogenu odnosi się do zmniejszonych reakcji oksydacyjnych, zwiększonej funkcji oddechowej i stabilnych właściwości błony (5). Ten projekt ma na celu dostarczenie kompleksowego poglądu za pośrednictwem metabolomiki w celu identyfikacji biomarkerów w mitochondriach, które można wykorzystać do monitorowania menopauzy.

Projekt badania ： Badanie to jest badaniem przekrojowym. W sumie 100 kobiet zostanie uwzględnionych i pogrupowanych w trzy kategorie: 25 przypadków okresu reprodukcyjnego, 50 przypadków okresu przejścia okołomenopauzalnego i 25 przypadków okresu po menopauzie. Krew obwodowa zostanie zebrana. Po ekstrakcji mitochondrialnej przeprowadzane są zarówno analizy jakościowe, jak i ilościowe. Markery białek o wysokiej pewności siebie są identyfikowane jako cząsteczki kandydujące z wykorzystaniem połączonych danych z RNA-Seq i LC/MS/MS. Te markery kandydatów przejdą dalsze testy walidacji.

Metody ： Po rozdzieleniu ficolla krew obwodowa zostanie podzielona na komórki jednojądrzaste, osocze i czerwone krwinki. Dalsza ekstrakcja mitochondriów zostanie przeprowadzona zarówno z komórek jednojądrzastych, jak i osocza. Eksperymenty ilościowe obejmują pomiary hipokampa energii metabolicznej i oceny JC-1 dla zdrowia mitochondrialnego, podczas gdy liczba kopii mitochondriów DNA zostanie oceniona przy użyciu cyfrowego PCR. Jakościowa analiza eksperymentalna wykorzystuje Western blotting do oceny markerów, takich jak cytochrom C i HSP60 dla mitochondriów i PCNA dla białek jądrowych. Eksperymenty walidacji biomarkerów kandydujących wykorzystują połączone dane z RNA-Seq i LC/MS/MS w celu zidentyfikowania markerów białek o wysokiej pewności siebie jako kandydatów, które są dalej zatwierdzone pod kątem wykonalności przy użyciu metody ELISA.

Efekt:

1. Zrozum zmiany jakości i ilości mitochondriów podczas przejścia okołomenopauzalnego u kobiet.
2. Opracuj wskaźniki monitorowania przejścia okołomenopauzalnego u kobiet.