Desenvolvimento de biomarcadores para monitorar a menopausa em mulheres

Antecedentes ： A igualdade de gênero e a saúde eqüitativa surgiram como tendências internacionais nos últimos anos. Apesar das soluções existentes para os problemas de saúde das mulheres, muitas necessidades permanecem não atendidas. Segundo as projeções, espera -se que a população global da menopausa atinja 1,2 bilhão até 2030, superando a prevalência das doenças crônicas mais comuns. Atualmente, existem soluções para sintomas comuns da menopausa, como ondas de calor, suores noturnos, fadiga, irritabilidade e incontinência urinária. No entanto, desafios não resolvidos abrangem mudanças psicológicas e sistemas de monitoramento. Portanto, este projeto visa desenvolver biomarcadores para a menopausa nas mulheres como um sistema de monitoramento futuro.

A maioria das mulheres entra na menopausa entre 48 e 52 anos. Durante esse período, os folículos ovarianos cessam a atividade, levando ao período de um ano após o aparecimento de irregularidades menstruais significativas, conhecidas como transição ou perimenopausa da menopausa (1). À medida que a função ovariana diminui gradualmente e a secreção de estrogênio diminui, várias alterações sistêmicas ocorrem, resultando em várias condições relacionadas à menopausa, como osteoporose, doenças cardiovasculares e problemas de sistema urinário. O declínio no estrogênio desencadeia um loop de feedback negativo, causando um aumento na secreção de hormônio folículo-estimulador (FSH) e uma redução na produção de E2 (17β-estradiol) (2). Atualmente, a terapia hormonal da menopausa (MHT) usando estrogênio pode aliviar os sintomas da menopausa e restaurar os níveis gerais de E2, mas não diminui o FSH para os níveis pré-menopausa (3-4). No entanto, um biomarcador preciso para o monitoramento da menopausa ainda não foi estabelecido. Sob deficiência de estrogênio, a morfologia e a função mitocondrial podem ser comprometidas, enquanto a presença de estrogênio se refere a reações oxidativas reduzidas, função respiratória aprimorada e propriedades estáveis ​​da membrana (5). Este projeto tem como objetivo fornecer uma visão abrangente através da metabolômica para identificar biomarcadores nas mitocôndrias que podem ser usadas para o monitoramento da menopausa.

Desenho do estudo: Este estudo é um estudo transversal. Um total de 100 mulheres será incluído e agrupado em três categorias: 25 casos de período reprodutivo, 50 casos de período de transição perimenopausal e 25 casos de período pós -menopausa. O sangue periférico será coletado. Após a extração mitocondrial, são realizadas análises qualitativas e quantitativas. Os marcadores de proteína de alta confiança são identificados como moléculas candidatas usando dados combinados de RNA-seq e LC/MS/MS. Esses marcadores candidatos passarão por testes adicionais de validação.

Métodos: Após a separação do ficoll, o sangue periférico será dividido em células mononucleares, plasma e glóbulos vermelhos. A extração adicional das mitocôndrias será realizada a partir de células mononucleares e plasma. Experimentos quantitativos envolvem medições do hipocampo da energia metabólica e avaliação JC-1 da saúde mitocondrial, enquanto o número de cópia do DNA mitocondrial será avaliado usando PCR digital. A análise experimental qualitativa emprega o Western blotting para avaliar marcadores como o citocromo C e o HSP60 para mitocôndrias e PCNA para proteínas nucleares. Os experimentos de validação de biomarcadores candidatos usam dados combinados de RNA-seq e LC/MS/MS para identificar marcadores de proteínas de alta confiança como candidatos, que são validados ainda mais para viabilidade usando o método ELISA.

Efeito:

1. Entenda as mudanças na qualidade e quantidade mitocondrial durante a transição da perimenopausa em mulheres.
2. Desenvolva indicadores de monitoramento para a transição da perimenopausa em mulheres.