Разработка биомаркеров для мониторинга менопаузы у женщин

Предпосылки: Гендерное равенство и справедливое здоровье стали международными тенденциями в последние годы. Несмотря на существующие решения для проблем со здоровьем женщин, многие потребности остаются неудовлетворенными. Согласно прогнозам, к 2030 году глобальное население в менопаузе достигнет 1,2 миллиарда, что превзойдет распространенность наиболее распространенных хронических заболеваний. В настоящее время существуют решения для общих симптомов менопаузы, таких как горячие вспышки, ночные поты, усталость, раздражительность и недержание мочи. Однако нерешенные проблемы охватывают психологические изменения и системы мониторинга. Поэтому этот проект направлен на разработку биомаркеров для менопаузы у женщин в качестве будущей системы мониторинга.

Большинство женщин вступают в менопаузу в возрасте от 48 до 52 лет. В течение этого периода фолликулы яичников прекращают активность, что приводит к однолетнему периоду после появления значительных менструальных нарушений, известных как переход менопаузала или перименопауза (1). По мере того, как функция яичников постепенно снижается, и секреция эстрогена уменьшается, происходят различные системные изменения, что приводит к нескольким условиям, связанным с менопаузой, таким как остеопороз, сердечно-сосудистые заболевания и проблемы мочи. Снижение эстрогена запускает отрицательную петлю обратной связи, вызывая увеличение секреции стимулирующих фолликулов (FSH) и снижение продукции E2 (17β-эстрадиола) (2). В настоящее время менопаузальная гормональная терапия (MHT) с использованием эстрогена может облегчить симптомы менопаузы и восстановить общие уровни E2, но не снижает уровень FSH до пременопаузы (3-4). Тем не менее, точный биомаркер для мониторинга менопаузы еще не установлен. При дефиците эстрогена могут быть скомпрометированы морфология митохондрий и функция, в то время как присутствие эстрогена связано с пониженными окислительными реакциями, усилением дыхательной функции и стабильных мембранных свойствах (5). Этот проект направлен на то, чтобы обеспечить комплексное представление с помощью метаболомики для выявления биомаркеров в митохондриях, которые можно использовать для мониторинга менопаузы.

Дизайн исследования: Это исследование является перекрестным исследованием. В общей сложности будет включено 100 женщин и сгруппировано в три категории: 25 случаев репродуктивного периода, 50 случаев переходного периода перименопаузы и 25 случаев постменопаузального периода. Периферическая кровь будет собрана. После экстракции митохондриальных, проводится как качественный, так и количественный анализ. Маркеры белков с высокой достоверностью идентифицируются как молекулы-кандидаты с использованием комбинированных данных из RNA-Seq и LC/MS/MS. Эти маркеры кандидатов будут проходить дальнейшие проверки проверки.

Методы: После разделения фиколла периферическая кровь будет разделена на мононуклеарные клетки, плазму и эритроциты. Дальнейшая экстракция митохондрий будет проводиться как из мононуклеарных клеток, так и из плазмы. Количественные эксперименты включают измерения гиппокампа метаболической энергии и оценку JC-1 здоровья митохондрий, в то время как количество копий митохондриальной ДНК будет оцениваться с использованием цифровой ПЦР. Качественный экспериментальный анализ использует вестерн -блоттинг для оценки таких маркеров, как цитохром C и Hsp60 для митохондрий и PCNA для ядерных белков. Эксперименты по проверке биомаркеров-кандидатов используют комбинированные данные из RNA-Seq и LC/MS/MS для идентификации маркеров белков с высокой достоверностью в качестве кандидатов, которые дополнительно подтверждены для выполнимости с использованием метода ELISA.

Эффект:

1. Поймите изменения в качеством и количестве митохондрий во время перехода по перименопаузе у женщин.
2. Разработать индикаторы мониторинга для перехода перименопаузы у женщин.