Szczepienie przeciw grypie pacjentów z twardziną skóry

W badaniu weźmie udział 50 pacjentów z twardziną skóry i 30 zdrowych, dopasowanych wiekowo osób z grupy kontrolnej.

Po podpisaniu świadomej zgody wszyscy uczestnicy zostaną zaszczepieni zalecaną jesienią tego roku przez WHO inaktywowaną szczepionką z rozszczepionym wirionem.

Pacjenci będą oceniani w tygodniu 0 i 6 tygodni później. Ocena kliniczna będzie oparta na zmodyfikowanej skali Rodnana, liczbie owrzodzeń niedokrwiennych palców, obecności objawów żołądkowo-jelitowych i oddechowych, liczbie obrzękniętych i bolesnych stawów, ogólnej ocenie wizualnej lekarza, OB i CRP Krew do pobrania w dniu szczepienia i 6 tygodni później.

Immunogenność szczepionki zostanie zbadana za pomocą testu hamowania hemaglutynacji (HI).

Wirus grypy ma dwie ważne glikoproteiny powierzchniowe: hemaglutyninę (HA) i neuraminidazę (NA). Klasyfikacja antygenowa i podtypy wirusów grypy opierają się na tych dwóch glikoproteinach. HA odgrywa kluczową rolę we wnikaniu wirusa do komórki poprzez wiązanie się z receptorami na powierzchni komórki, które znajdują się również na krwinkach czerwonych niektórych gatunków. Wiązanie z krwinkami czerwonymi powoduje hemaglutynację, którą można zaobserwować jako dywan aglutynowanych krwinek czerwonych na dnie probówki lub studzienki do mikromiareczkowania. W teście HI przeciwciała skierowane przeciwko hemaglutyninom wirusowym blokują wiązanie się wirusa z komórkami krwi, a tym samym hamują reakcję hemaglutynacji.

Przeciwciała HI przed i po immunizacji były badane w Centralnym Laboratorium Wirusologicznym izraelskiego Ministerstwa Zdrowia przy użyciu testu HI zgodnie ze standardową procedurą WHO 16. Surowice oddzielono, oznaczono kodem i przechowywano w temperaturze -20°C do czasu przetestowania. Surowice traktowano przesączem z enzymu cholery niszczącego receptory w celu usunięcia nieswoistych inhibitorów oraz krwinkami czerwonymi indyka w celu usunięcia niespecyficznych aglutynin. Traktowane surowice testowano testem HI na trzy antygeny zawarte w szczepionce: A/California (CAL), A/Wisconsin i B/Malaysia. Rozcieńczenie robocze (dawka testowa) każdego antygenu zawierało cztery jednostki hemaglutyniny w 25 ul antygenu. Dawki testowe rozcieńczono w soli fizjologicznej buforowanej fosforanami (PBS) i dodano do seryjnego rozcieńczenia surowicy odpornościowej. Miano hamowania hemaglutyniny określono jako największe rozcieńczenie surowicy, które całkowicie hamuje hemaglutynację krwinek czerwonych.

Miano surowicy odpornościowej niewykazującej żadnego hamowania zostanie zapisane jako <10. Odpowiedź humoralna zostanie zdefiniowana jako czterokrotny lub większy wzrost miana przeciwciał lub wzrost miana przeciwciał HI z nieochronnego poziomu wyjściowego <1/40 do 1/40 cztery tygodnie po szczepieniu 17,18. W celu oceny odporności całej grupy zostaną obliczone średnie geometryczne mian przeciwciał.

Pierwszorzędowy punkt końcowy badania: odsetek pacjentów, którzy osiągnęli miano przeciwciał powyżej 1/40, przeciwko każdemu antygenowi zawartemu w szczepionce. Drugorzędowy punkt końcowy: bezpieczeństwo szczepionki.