Szczepienie komórkami dendrytycznymi u pacjentów z zespołem Lyncha lub rakiem jelita grubego z MSI

Uzasadnienie tego badania:

Komórki dendrytyczne (DC) wytworzone ex vivo i obciążone antygenem nowotworowym są obecnie stosowane w klinicznych protokołach szczepień pacjentów z rakiem. Szczepionki DC są bezpieczne, z minimalnymi skutkami ubocznymi. Oceniając ponad 200 pacjentów leczonych w ciągu ostatnich dziesięciu lat, stwierdziliśmy, że odpowiedzi kliniczne mierzone u kilku pacjentów bezpośrednio pokrywają się ze specyficznymi odpowiedziami limfocytów T cytotoksycznych. Większość badań dotyczyła efektów terapeutycznych szczepionek DC u pacjentów z późnym stadium raka z przerzutami. U tych (intensywnie) wstępnie leczonych pacjentów układ odpornościowy jest osłabiony. Na podstawie naszych obserwacji, że specyficzna odpowiedź immunologiczna wskazuje na dobry wynik kliniczny, uważamy, że pełny potencjał tych komórek immunostymulujących należy wykorzystać u pacjentów wysokiego ryzyka z małą masą guza lub w stanie przedrakowym.

Dobrym modelem klinicznym są nosiciele mutacji germinalnej w jednym z genów naprawy niedopasowań DNA (MMR), tacy jak pacjenci z zespołem Lyncha (znanym również jako dziedziczny rak jelita grubego bez polipowatości lub HNPCC). Osoby te mają dożywotnie ryzyko wystąpienia raka jelita grubego, który rozwinął się w ciągu kilku lat od stanu przedrakowego gruczolaka, na poziomie 60-80%. Potencjalnie duże znaczenie ma układ odpornościowy, ponieważ rak jelita grubego w zespole Lyncha charakteryzuje się silnym naciekiem limfocytarnym, nawet w stadium gruczolaka. W dotkniętych zmianach nowotworowych dysfunkcja MMR powoduje mutacje przesunięcia ramki odczytu w krótkich, powtarzalnych sekwencjach DNA określanych jako mikrosatelity. W regionach kodujących te mutacje niszczą funkcję genów i wykazano, że prowadzą do produkcji neopeptydów. Te neopeptydy są: 1) swoiste dla nowotworu, ponieważ mutacje przesunięcia ramki odczytu występują tylko w komórkach nowotworowych i ich przednowotworowych progenitorach, 2) są bardzo podobne między pacjentami, ponieważ te same geny są dotknięte defektem naprawy niedopasowania i 3) immunogenne, ponieważ cytotoksyczne limfocyty T (CTL) i limfocyty T pomocnicze można indukować in vitro z krwi pacjentów z zespołem Lyncha. Podobne mechanizmy występują w sporadycznym raku jelita grubego z dysfunkcją MMR, który stanowi około 10-15% wszystkich przypadków raka jelita grubego 2.

Cele:

W tym badaniu zainicjowanym przez Radboud University Nijmegen Medical Center (RUNMC) naszym pierwszym celem jest zbadanie toksyczności (bezpieczeństwa i wykonalności) szczepienia DC obciążonym neoantygenem pochodzącym z zmiany ramki odczytu pacjentów z CRC z MSI-dodatnim CRC i osobami, o których wiadomo, że są nosicielem zarodkowej mutacji genu MMR bez objawów choroby.

Drugorzędnymi celami badania jest wykazanie, że DC obciążone peptydem może indukować lub wzmacniać odpowiedź immunologiczną na związany z nowotworem antygen CEA i specyficzne neoantygeny pochodzące z przesunięcia ramki odczytu w badanej populacji. A my chcemy badać reakcje patologiczne i kliniczne, m.in. przeżycie wolne od choroby, określone zgodnie ze standardowym protokołem.

Projekt badania:

Niniejsze badanie jest badaniem otwartym fazy I/II.

Badana populacja:

Szczepione będą dwie grupy dorosłych:

Grupa I) Pacjenci z CRC, o których wiadomo, że są nosicielami mutacji genu MMR linii zarodkowej oraz pacjenci z MSI-dodatnim CRC i jeszcze nieznanym lub ujemnym statusem mutacji genu MMR.

Grupa II) osoby, o których wiadomo, że są nosicielami mutacji genu MMR w linii zarodkowej, bez jeszcze objawów choroby. Wszyscy uczestnicy muszą być HLA-A2.1 dodatni.

Główne punkty końcowe badania:

Pierwszym celem tego badania jest toksyczność (bezpieczeństwo i wykonalność) szczepienia DC obciążonym neoantygenem pochodzącym z przesunięcia ramki odczytu. Zostanie to zmierzone poprzez rejestrację zdarzeń niepożądanych zgodnie z Common Terminology Criteria for Adverse Events w wersji 3.0.

Drugorzędnymi celami badania jest wykazanie, że DC obciążone peptydem może indukować lub wzmacniać odpowiedź immunologiczną na związany z nowotworem antygen CEA i specyficzne neoantygeny pochodzące z przesunięcia ramki odczytu w badanej populacji. Odpowiedzi immunologiczne będą oceniane jako:

• proliferacyjna i humoralna odpowiedź na KLH
• produkcja cytokin w PBMC stymulowanych przez KLH
• swoiste dla antygenu nowotworowego odpowiedzi limfocytów T we krwi obwodowej
• odpowiedzi komórek T specyficzne dla antygenu nowotworowego w biopsjach z DTH
• produkcja cytokin przez limfocyty T w biopsjach z DTH
• cytotoksyczność limfocytów T w biopsjach z DTH
• immunohistochemiczna charakterystyka limfocytów naciekających DTH

Reakcje patologiczne i kliniczne, np. przeżycie wolne od choroby zostanie określone zgodnie ze standardowym protokołem.