Oznaczanie uszkodzeń RNA/DNA związanych ze stresem oksydacyjnym u pacjentów z zapaleniem przyzębia

Periodontitis to przewlekła choroba zapalna prowadząca do postępującego niszczenia tkanek podtrzymujących zęby. Stres oksydacyjny odgrywa kluczową rolę w jej patogenezie, ponieważ nadmierna produkcja reaktywnych form tlenu (RFT) może uszkadzać struktury komórkowe, w tym lipidy, białka i kwasy nukleinowe. Wśród biomarkerów związanych ze stresem oksydacyjnym, 8-hydroksy-2'-deoksyguanozyna (8-OHdG) i 8-hydroksyguanozyna (8-OHG) są powszechnie uznawanymi wskaźnikami uszkodzeń odpowiednio DNA i RNA. Te biomarkery odzwierciedlają biochemiczne konsekwencje stresu oksydacyjnego i są coraz częściej wykorzystywane do oceny odpowiedzi gospodarza w chorobie przyzębia.

Palenie papierosów jest jednym z najsilniejszych środowiskowych czynników ryzyka periodontitis i wiadomo, że nasila stres oksydacyjny poprzez wiele mechanizmów. Jednak połączony wpływ palenia i zaawansowanego periodontitis na oksydacyjne uszkodzenia DNA i RNA w ślinie nie został w pełni wyjaśniony. Jednoczesna ocena zarówno 8-OHdG, jak i 8-OHG może zapewnić głębszy wgląd w szlaki molekularne łączące palenie, stan zapalny i niszczenie tkanek przyzębia.

To badanie zostało zaprojektowane w celu oceny poziomów oksydacyjnego uszkodzenia kwasów nukleinowych w ślinie u osób z periodontitis w stadium III, które palą lub nie palą, a także u periodontologicznie zdrowych osób z grupy kontrolnej. Badanie miało również na celu zbadanie związku między tymi biomarkerami a klinicznymi pomiarami periodontologicznymi. Poprzez równoczesne badanie oksydacji DNA i RNA, badanie dążyło do zapewnienia wielowymiarowego zrozumienia oksydacyjnej odpowiedzi gospodarza w periodontitis.

Wszyscy uczestnicy przeszli pełne badanie periodontologiczne jamy ustnej przeprowadzone przez skalibrowanego klinicystę. Pobrano próbki niepobudzonej śliny w standaryzowanych warunkach porannych, przetworzono je przez wirowanie w celu usunięcia zanieczyszczeń komórkowych i przechowywano w temperaturze -80°C do analizy biochemicznej. Poziomy 8-OHdG i 8-OHG oznaczono ilościowo przy użyciu wysokoczułej metody ELISA zdolnej do wykrywania wielu utlenionych pochodnych guaniny.

Wyniki biochemiczne wykazały, że poziomy oksydacyjnego uszkodzenia DNA i RNA były wyższe u osób z periodontitis w porównaniu ze zdrową grupą kontrolną, przy czym palacze wykazywali ogólnie najwyższe poziomy. Poziomy biomarkerów oksydacyjnych wykazywały pozytywne korelacje z kluczowymi parametrami periodontologicznymi, w tym głębokością sondowania, utratą przyczepu klinicznego, nagromadzeniem płytki, zapaleniem dziąseł i krwawieniem przy sondowaniu. Wyniki te sugerują, że obciążenie zapalne periodontitis nasila stres oksydacyjny na poziomie kwasów nukleinowych i że palenie przyczynia się do dodatkowego obciążenia biologicznego.

Oprócz oceny biochemicznej, próbki błony śluzowej policzka oceniono cytologicznie przy użyciu barwienia hematoksyliną i eozyną. Wszystkie preparaty wykazały odpowiednią komórkowość i nie zaobserwowano istotnych różnic w dysplazji nabłonkowej między grupami badawczymi. Może to być związane z przewagą powierzchownych komórek nabłonkowych w pobranych próbkach.

Podsumowując, to badanie zapewnia zintegrowaną ocenę biochemiczną i cytomorfologiczną stresu oksydacyjnego w periodontitis. Wyniki wspierają potencjalne wykorzystanie ślinowych 8-OHdG i 8-OHG jako nieinwazyjnych biomarkerów do monitorowania choroby i dostarczają nowych dowodów dotyczących interakcji między paleniem, stresem oksydacyjnym a zapaleniem przyzębia.