Metabolizm mitochondrialny i stres oksydacyjny w funkcji ćwiczeń fizycznych i poradnictwa żywieniowego w T2DM (MITOX)

Brak interwencji: ND-INAKT

Uczestnicy, którzy nie otrzymali ani interwencji żywieniowej, ani programu ćwiczeń. Zostali poinstruowani, aby utrzymać swoje normalne nawyki życiowe dotyczące aktywności fizycznej i diety.

Aktywny komparator: Trening o umiarkowanej intensywności w trybie ciągłym (ND-MICT)

Uczestnicy, którzy nie otrzymali interwencji żywieniowej, ale zostali zapisani do programu ćwiczeń o umiarkowanej intensywności w formie ciągłego treningu.

Inny: Trening ciągły o umiarkowanej intensywności (MICT)

Uczestnicy przydzieleni do grupy MICT wykonywali 3 sesje treningowe tygodniowo, z 1-2 dniami odpoczynku między sesjami, na ergometrze rowerowym przez 12 tygodni.

MICT składał się z 50 minut ciągłego pedałowania o intensywności około 10% powyżej progu mleczanowego, z kadencją między 60-80 obr/min. Obciążenie treningowe (TL) zwiększano o 10%, jeśli spełnione były dwa warunki: 1) brak wzrostu tętna o co najmniej 2 uderzenia od 20. do 40. minuty sesji treningowej oraz 2) poziom mleczanów poniżej 2 mmol/L w 48. minucie sesji. TL dla pierwszej sesji określono za pomocą testu dostosowawczego, składającego się z testu przyrostowego z pięcioma kolejnymi 10-minutowymi fazami przy stałej kadencji (60-80 obr/min) od 90% do 130% mocy progowej wentylacyjnej, obliczonej na podstawie wcześniej wykonanych danych testu FatOx, z 10% przyrostami na każdym etapie. TL określano na podstawie fazy, w której tętno wzrosło o ≥ 3 uderzeń między fazami, a poziom mleczanu we krwi wzrósł o ≥ 1 mmol/L w porównaniu z poprzednią fazą.

Aktywny komparator: Trening interwałowy o wysokiej intensywności (ND-HIIT)

Uczestnicy, którzy nie otrzymali interwencji żywieniowej, ale zostali zapisani do programu ćwiczeń interwałowych o wysokiej intensywności.

Inny: Trening Interwałowy o Wysokiej Intensywności (HIIT)

Uczestnicy przypisani do HIIT wykonywali 3 sesje tygodniowo, z 1-2 dniami odpoczynku między sesjami, na ergometrze rowerowym przez 12 tygodni.

Obciążenie treningowe (TL) określono na podstawie testu przyrostowego aż do dobrowolnego wyczerpania z jednominutowymi interwałami pracy (od 85% do 165% maksymalnej mocy wyjściowej z wcześniej wykonanego testu VO2max [Wmax] i z 10% przyrostami) oddzielonymi 1,5-minutowymi przerwami (przy 20% Wmax).

Program składał się z 3-minutowej rozgrzewki z pierwszymi 2 minutami przy 20% i ostatnią minutą przy 40% TL, po czym następowało 10 serii trwających 1 minutę przy 90% TL, z 1 minutą odpoczynku między seriami przy 40% TL i zakończeniem 2-minutowym schłodzeniem przy 20% TL (szacowany całkowity czas sesji: 25 minut). 5% wzrost obciążenia zastosowano, gdy przez dwie kolejne sesje pierwsze trzy interwały nie przekroczyły 85%, a ostatnie pięć nie osiągnęło 90% maksymalnego HR. Uczestników poproszono o utrzymanie kadencji powyżej 80 obr./min.

Aktywny komparator: Interwencja żywieniowa (D-INACT)

Uczestnicy, którzy otrzymali interwencję żywieniową, ale nie program ćwiczeń.

Behawioralne: Interwencja żywieniowa

Interwencja żywieniowa była prowadzona poprzez odbywające się co dwa tygodnie (± 3 dni) konsultacje osobiste z dietetykiem przez cały okres 12 tygodni. Po pierwsze, przeanalizowano dietę pacjenta. Następnie uczestnicy byli kierowani do stosowania diety opartej na wzorcu śródziemnomorskim i lekko ograniczonej kalorycznie, z głównym celem osiągnięcia 5% redukcji masy ciała i obniżenia poziomu glukozy we krwi. Plany żywieniowe zostały stworzone przy użyciu oprogramowania Nutrium®, spersonalizowane do stylu życia i preferencji żywieniowych każdego uczestnika, i były przeglądane podczas każdej konsultacji co dwa tygodnie. Plan żywieniowy obejmował co najmniej 4 posiłki dziennie, zapewniając dobrze rozłożone spożycie węglowodanów, zrównoważony rozkład makro- i mikroelementów oraz włączenie żywności bogatej w prebiotyki i probiotyki. Ponadto, udzielono niektórych sugestii dotyczących łączenia żywności i technik kulinarnych. Tylko jedna sesja w trakcie interwencji mogła być przeprowadzona telefonicznie.

Eksperymentalny: Interwencja żywieniowa Trening ciągły o umiarkowanej intensywności (D-MICT)

Uczestnicy, którzy otrzymali interwencję żywieniową i zostali zapisani do programu ćwiczeń z umiarkowaną intensywnością treningu ciągłego.

Inny: Trening ciągły o umiarkowanej intensywności (MICT)

Uczestnicy przydzieleni do grupy MICT wykonywali 3 sesje treningowe tygodniowo, z 1-2 dniami odpoczynku między sesjami, na ergometrze rowerowym przez 12 tygodni.

MICT składał się z 50 minut ciągłego pedałowania o intensywności około 10% powyżej progu mleczanowego, z kadencją między 60-80 obr/min. Obciążenie treningowe (TL) zwiększano o 10%, jeśli spełnione były dwa warunki: 1) brak wzrostu tętna o co najmniej 2 uderzenia od 20. do 40. minuty sesji treningowej oraz 2) poziom mleczanów poniżej 2 mmol/L w 48. minucie sesji. TL dla pierwszej sesji określono za pomocą testu dostosowawczego, składającego się z testu przyrostowego z pięcioma kolejnymi 10-minutowymi fazami przy stałej kadencji (60-80 obr/min) od 90% do 130% mocy progowej wentylacyjnej, obliczonej na podstawie wcześniej wykonanych danych testu FatOx, z 10% przyrostami na każdym etapie. TL określano na podstawie fazy, w której tętno wzrosło o ≥ 3 uderzeń między fazami, a poziom mleczanu we krwi wzrósł o ≥ 1 mmol/L w porównaniu z poprzednią fazą.

Behawioralne: Interwencja żywieniowa

Interwencja żywieniowa była prowadzona poprzez odbywające się co dwa tygodnie (± 3 dni) konsultacje osobiste z dietetykiem przez cały okres 12 tygodni. Po pierwsze, przeanalizowano dietę pacjenta. Następnie uczestnicy byli kierowani do stosowania diety opartej na wzorcu śródziemnomorskim i lekko ograniczonej kalorycznie, z głównym celem osiągnięcia 5% redukcji masy ciała i obniżenia poziomu glukozy we krwi. Plany żywieniowe zostały stworzone przy użyciu oprogramowania Nutrium®, spersonalizowane do stylu życia i preferencji żywieniowych każdego uczestnika, i były przeglądane podczas każdej konsultacji co dwa tygodnie. Plan żywieniowy obejmował co najmniej 4 posiłki dziennie, zapewniając dobrze rozłożone spożycie węglowodanów, zrównoważony rozkład makro- i mikroelementów oraz włączenie żywności bogatej w prebiotyki i probiotyki. Ponadto, udzielono niektórych sugestii dotyczących łączenia żywności i technik kulinarnych. Tylko jedna sesja w trakcie interwencji mogła być przeprowadzona telefonicznie.

Eksperymentalny: Interwencja żywieniowa Trening interwałowy o wysokiej intensywności (D-HIIT)

Uczestnicy, którzy otrzymali interwencję żywieniową i zostali zapisani na program ćwiczeń interwałowych o wysokiej intensywności.

Inny: Trening Interwałowy o Wysokiej Intensywności (HIIT)

Uczestnicy przypisani do HIIT wykonywali 3 sesje tygodniowo, z 1-2 dniami odpoczynku między sesjami, na ergometrze rowerowym przez 12 tygodni.

Obciążenie treningowe (TL) określono na podstawie testu przyrostowego aż do dobrowolnego wyczerpania z jednominutowymi interwałami pracy (od 85% do 165% maksymalnej mocy wyjściowej z wcześniej wykonanego testu VO2max [Wmax] i z 10% przyrostami) oddzielonymi 1,5-minutowymi przerwami (przy 20% Wmax).

Program składał się z 3-minutowej rozgrzewki z pierwszymi 2 minutami przy 20% i ostatnią minutą przy 40% TL, po czym następowało 10 serii trwających 1 minutę przy 90% TL, z 1 minutą odpoczynku między seriami przy 40% TL i zakończeniem 2-minutowym schłodzeniem przy 20% TL (szacowany całkowity czas sesji: 25 minut). 5% wzrost obciążenia zastosowano, gdy przez dwie kolejne sesje pierwsze trzy interwały nie przekroczyły 85%, a ostatnie pięć nie osiągnęło 90% maksymalnego HR. Uczestników poproszono o utrzymanie kadencji powyżej 80 obr./min.

Behawioralne: Interwencja żywieniowa

Interwencja żywieniowa była prowadzona poprzez odbywające się co dwa tygodnie (± 3 dni) konsultacje osobiste z dietetykiem przez cały okres 12 tygodni. Po pierwsze, przeanalizowano dietę pacjenta. Następnie uczestnicy byli kierowani do stosowania diety opartej na wzorcu śródziemnomorskim i lekko ograniczonej kalorycznie, z głównym celem osiągnięcia 5% redukcji masy ciała i obniżenia poziomu glukozy we krwi. Plany żywieniowe zostały stworzone przy użyciu oprogramowania Nutrium®, spersonalizowane do stylu życia i preferencji żywieniowych każdego uczestnika, i były przeglądane podczas każdej konsultacji co dwa tygodnie. Plan żywieniowy obejmował co najmniej 4 posiłki dziennie, zapewniając dobrze rozłożone spożycie węglowodanów, zrównoważony rozkład makro- i mikroelementów oraz włączenie żywności bogatej w prebiotyki i probiotyki. Ponadto, udzielono niektórych sugestii dotyczących łączenia żywności i technik kulinarnych. Tylko jedna sesja w trakcie interwencji mogła być przeprowadzona telefonicznie.

Próbki biopsji mięśni: zdolność oddechowa mitochondriów

Skóra została miejscowo znieczulona, a następnie wykonano nacięcie o długości około 6-7 mm na powierzchni skóry właściwej. Przy użyciu wysterylizowanych igieł Bergstrom pobrano około 3-6 mg mięśni szkieletowych z mięśnia obszernego bocznego i umieszczono je w buforze BIOPS do natychmiastowej analizy oddychania mitochondrialnego (MR) za pomocą wysokorozdzielczej respirometrii. Przed tym włókna zostały mechanicznie rozdzielone w buforze BIOPS przy użyciu wysterylizowanych igieł i chemicznie permeabilizowane za pomocą roztworu saponiny o stężeniu 50 μg/ml.

MR mierzono w określonym buforze (Mir05) w duplikacie w komorach hiperoksygenowanych (250-450 mM tlenu) w Oxygraph-2k w temperaturze 37°C (Oroboros, Innsbruck, Austria). Zastosowano protokół miareczkowania substrat-uncoupler przez dodanie (końcowe stężenie): jabłczanu (2 mM), pirogronianu (5 mM), glutaminianu (2 mM), MgCl2 (3 mM) i ADP (5 mM), cytochromu C (10 μM), bursztynianu (10 mM) oraz p-trifluorometoksyfenylohydrazonu. Przepływ tlenu przedstawiono jako specyficzny dla masy (pmol·s/mg masy wilgotnej) i znormalizowano do aktywności CS.

Ocenione zmiany w stresie oksydacyjnym

Poziom stresu oksydacyjnego oceniano na podstawie stężenia 8-OHdG jako biomarkera utleniania DNA. W próbkach surowicy zastosowano konkurencyjną metodę wykrywania ELISA. W skrócie, standard i próbkę dodano do wstępnie pokrytej mikropłytki wraz z biotynylowanym przeciwciałem detekcyjnym. Po przemyciu dodano HRP-Streptawidynę. Następnie dodano substrat TMB, a reakcję zatrzymano za pomocą roztworu kwasowego. Produkcję koloru mierzono spektrofotometrycznie przy długości fali 450 nm. Wartości gęstości optycznej próbek porównano z wartościami krzywej standardowej w celu określenia stężenia 8-OHdG (ng/ml).

Próbka biopsji mięśnia: aktywność syntazy cytrynianowej

2-5 mg zamrożonego mięśnia homogenizowano w rozcieńczeniu 1:20 CelLytic™ MT Tissue Lysis (C3228, Sigma-Aldrich, Dorset, Wielka Brytania) z 1% koktajlem inhibitorów proteaz (P8340, Sigma-Aldrich, Dorset, Wielka Brytania) w temperaturze 4 °C. Lizat odwirowywano przy 12 000 × g przez 10 minut w temperaturze 4 °C w celu osadzenia pozostałości, a supernatant przechowywano w temperaturze -80 °C. Aktywność CS oznaczano w duplikatach przy użyciu zestawu testowego zgodnie z instrukcjami producenta (CS0720: Sigma-Aldrich, Dorset, Wielka Brytania). W skrócie, aktywność endogenną rejestrowano poprzez emisję barwy przez DTNB, a całkowitą aktywność obliczano po dodaniu szczawiooctanu. Stężenie białka oznaczano w duplikatach przy użyciu zestawu testowego kwasu biureinowego (BCA1: Sigma-Aldrich, Dorset, Wielka Brytania), umożliwiając normalizację wartości aktywności CS do całkowitej zawartości białka (µmol/g/min). Aktywność CS i stężenie białka mierzono w płytkach 96-dołkowych przy użyciu czytnika mikropłytek odpowiednio przy 412 nm i 562 nm (MQX200R2, Biotek instruments, Burlington, USA).

Ocena zmian w delcie wysycenia hemoglobiny

Do pomiaru zmian w mięśniach szkieletowych dotyczących utlenowanej, odtlenowanej i całkowitej hemoglobiny (μmol/L) wykorzystano urządzenie NIRO-200NX za pomocą spektroskopii w bliskiej podczerwieni (NIRS) i zmodyfikowanego prawa Beera-Lamberta. Czujnik NIRS (odległość nadajnik-czujnik 4 cm) umieszczono w 2/3 odległości między krętarzem większym a nadkłykciem bocznym dominującej nogi. Dla parametrów określonych przez MBLL, punkt odniesienia ustalono po pięciu minutach odpoczynku w pozycji leżącej. Dane NIRS były ciągle rejestrowane podczas 30-minutowego testu spoczynkowego wydatku energetycznego, testu maksymalnego utleniania tłuszczów (MFO) na cykloergometrze oraz testu maksymalnego poboru tlenu (VO2max) na cykloergometrze. W skrócie, test MFO polegał na zadaniu przyrostowym z 3-minutowymi fazami rozpoczynającymi się od 15W i zwiększającymi o 15W każdą fazę aż do osiągnięcia współczynnika wymiany oddechowej równego 1. Po 5-minutowym odpoczynku, test VO2max rozpoczęto przy ostatnim obciążeniu MFO z 15W zwiększeniami co minutę aż do określenia VO2max.

Ocenione zmiany w wskaźniku utlenowania tkanek

Do pomiaru wskaźnika utlenowania tkanki mięśni szkieletowych (%) wykorzystano urządzenie NIRO-200NX poprzez spektroskopię w bliskiej podczerwieni (NIRS), zmodyfikowane prawo Beera-Lamberta (MBLL) oraz spektroskopię przestrzenną.
Czujnik NIRS (odległość emiter-czujnik 4 cm) umieszczono w 2/3 odległości między krętarzem większym a nadkłykciem bocznym nogi dominującej.
Dla parametrów określonych przez MBLL, punkt odniesienia ustawiono po pięciu minutach spoczynku w pozycji leżącej.
Dane NIRS były ciągle rejestrowane podczas 30-minutowego testu spoczynkowego wydatku energetycznego, testu maksymalnego utlenowania tłuszczów (MFO) na cykloergometrze oraz testu maksymalnego poboru tlenu (VO2max) na cykloergometrze.
W skrócie, test MFO składał się z zadania przyrostowego z 3-minutowymi etapami, zaczynając od 15W i zwiększając o 15W na każdym etapie aż do wskaźnika wymiany oddechowej równego 1.
Po 5-minutowej przerwie, test VO2max rozpoczęto od ostatniego obciążenia MFO z 15W wzrostami co minutę aż do określenia VO2max.

Oceniane zmiany w stężeniu glukozy

Stężenie glukozy (mg/dL) mierzono z próbek krwi pobranych z żyły łokciowej po co najmniej 8 godzinach postu oraz po 30, 60, 90, 120 i 180 minutach od spożycia 75 gramów glukozy (Nuter-tec, 75 g/200 mL, smak pomarańczowy). Uczestników poinstruowano dzień przed badaniem, aby utrzymali swój zwykły styl życia, powstrzymali się od spożywania alkoholu lub kofeiny przez 24 godziny oraz unikali intensywnej aktywności fizycznej przez 72 godziny. Próbki krwi wirowano przy 4000 obr./min przez 7 minut, a surowicę analizowano. Stężenia glukozy oznaczono metodą kolorymetryczną przeprowadzoną na systemie Alinity CI (Abbott Laboratories, Abbott Park, IL, USA).

Ocenione zmiany w stężeniu insuliny

Stężenie insuliny (µU/mL) mierzono z próbek krwi pobranych z żyły odłokciowej do probówek z separatorem surowicy po co najmniej 8 godzinach postu oraz po 30, 60, 90, 120 i 180 minutach od spożycia 75 gramów glukozy (Nuter-tec, 75 g/200 mL, smak pomarańczowy).
Uczestnikom polecono dzień przed badaniem, aby utrzymali swój zwykły tryb życia, powstrzymali się od spożywania alkoholu lub kofeiny przez 24 godziny i unikali intensywnej aktywności fizycznej przez 72 godziny.
Próbki krwi odwirowano przy 4000 obr./min przez 7 minut, a surowicę poddano analizie.
Stężenia insuliny oznaczono za pomocą chemiluminescencyjnych testów immunologicznych wykonanych na systemie Alinity CI (Abbott Laboratories, Abbott Park, IL, USA).

Ocena zmian w insulinooporności: HOMA-IR

Oporność na insulinę szacowano za pomocą modelu oceny homeostazy oporności na insulinę (HOMA-IR), obliczanego jako insulina na czczo (µU/mL) pomnożona przez glukozę na czczo (mg/dL) podzielona przez 405.

Ocena zmian w wrażliwości na insulinę: wskaźnik Matsudy

Wrażliwość na insulinę całego ciała została oszacowana za pomocą wskaźnika Matsudy, obliczanego jako 10 000 / √[(glukoza na czczo (mg/dL) × insulina na czczo (µU/mL)) × (średnia glukoza podczas doustnego testu tolerancji glukozy (mg/dL) × średnia insulina podczas doustnego testu tolerancji glukozy (µU/mL))].

Ocenione zmiany w wrażliwości na insulinę: Quicki

Wrażliwość na insulinę została oszacowana za pomocą Wskaźnika Ilościowej Kontroli Wrażliwości na Insulinę (QUICKI), obliczanego jako 1 / [log(insulina na czczo (µU/mL)) + log(glukoza na czczo (mg/dL))].

Ocenione zmiany masy ciała

Masę ciała (kilogramy, kg) mierzono za pomocą wieloczęstotliwościowego urządzenia do bioelektrycznej impedancji (TANITA-MC780MA, Tanita Corp., Tokio, Japonia) po co najmniej 8 godzinach postu. Uczestników poinstruowano dzień przed badaniem, aby utrzymali swój zwykły tryb życia, powstrzymali się od spożywania alkoholu lub kofeiny przez 24 godziny oraz unikali intensywnej aktywności fizycznej przez 72 godziny. Uczestnicy nosili lekkie ubrania i poproszono ich, aby oddali mocz bezpośrednio przed pomiarem.

Ocenione zmiany wskaźnika masy ciała

Wskaźnik masy ciała (BMI) w kilogramach na metr kwadratowy (kg/m²) został obliczony jako masa ciała (kg) podzielona przez wzrost do kwadratu (m²).

Ocenione zmiany w masie tłuszczowej (kilogramy masy tłuszczowej)

Masę tłuszczową (kilogramy, kg) oszacowano za pomocą wieloczęstotliwościowej impedancji bioelektrycznej z urządzeniem 8-elektrodowym (TANITA-MC780MA, Tanita Corp., Tokio, Japonia) po co najmniej 8 godzinach postu. Uczestników poinstruowano dzień przed badaniem, aby utrzymali swój zwykły tryb życia, powstrzymali się od spożywania alkoholu lub kofeiny przez 24 godziny i unikali intensywnej aktywności fizycznej przez 72 godziny. Uczestnicy nosili lekkie ubrania i poproszono ich, aby oddali mocz bezpośrednio przed pomiarem.

Ocenione zmiany w masie tłuszczowej (procent masy tłuszczowej)

Masa tłuszczowa (procent całkowitej masy ciała, %) została oszacowana przy użyciu wieloczęstotliwościowej impedancji bioelektrycznej z urządzeniem 8-elektrodowym (TANITA-MC780MA, Tanita Corp., Tokio, Japonia) po co najmniej 8 godzinach postu. Uczestnicy zostali poinstruowani dzień przed badaniem, aby utrzymać swój zwykły tryb życia, powstrzymać się od spożywania alkoholu lub kofeiny przez 24 godziny oraz unikać intensywnej aktywności fizycznej przez 72 godziny. Uczestnicy nosili lekkie ubrania i zostali poproszeni o oddanie moczu bezpośrednio przed pomiarem.

Ocenione zmiany w masie beztłuszczowej (kilogramy masy beztłuszczowej)

Beztłuszczową masę ciała (kilogramy, kg) szacowano przy użyciu wieloczęstotliwościowej impedancji bioelektrycznej z urządzeniem 8-elektrodowym (TANITA-MC780MA, Tanita Corp., Tokio, Japonia) po co najmniej 8 godzinach postu. Uczestnicy zostali poinstruowani dzień przed badaniem, aby utrzymać swój zwykły tryb życia, powstrzymać się od spożywania alkoholu lub kofeiny przez 24 godziny oraz unikać intensywnej aktywności fizycznej przez 72 godziny. Uczestnicy nosili lekkie ubrania i poproszono ich, aby oddali mocz bezpośrednio przed pomiarem.

Ocenione zmiany w masie beztłuszczowej (procent masy beztłuszczowej)

Beztłuszczowa masa ciała (procent całkowitej masy ciała, %) była szacowana przy użyciu wieloczęstotliwościowej bioelektrycznej impedancji z urządzeniem 8-elektrodowym (TANITA-MC780MA, Tanita Corp., Tokio, Japonia) po co najmniej 8 godzinach postu. Uczestnicy zostali poinstruowani dzień przed badaniem, aby utrzymać swój zwykły styl życia, powstrzymać się od spożywania alkoholu lub kofeiny przez 24 godziny oraz unikać intensywnej aktywności fizycznej przez 72 godziny. Uczestnicy nosili lekkie ubrania i zostali poproszeni o oddanie moczu bezpośrednio przed pomiarem.

Ocena zmian w antropometrii: Obwody

Obwód talii (cm) mierzono w punkcie środkowym między dolnym bocznym brzegiem 10 żebra a grzebieniem kości biodrowej, prostopadle do podłużnej osi tułowia. Obwód brzucha (cm) mierzono na poziomie pępka, prostopadle do podłużnej osi tułowia. Obwód bioder (cm) mierzono na poziomie największego tylnego uwypuklenia pośladków, prostopadle do podłużnej osi tułowia. Obwód uda (cm) mierzono w punkcie środkowym między krętarzem większym a bocznym kłykciem kości piszczelowej. Wszystkie pomiary wykonano z uczestnikiem stojącym wyprostowanym i rozluźnionym. Każdy pomiar wykonano dwukrotnie, a trzeci pomiar przeprowadzono, jeśli różnica przekroczyła 1%. Zarejestrowano średnią z dwóch najbardziej zbliżonych wyników.

Ocena zmian w antropometrii: stosunek talii do bioder

Wskaźnik talia-biodro (WHR) był obliczany jako obwód talii (cm) podzielony przez obwód bioder (cm).

Ocenione zmiany w antropometrii: Grubość fałdu skórno-tłuszczowego

Grubość fałdu skórnego na udzie mierzono w dwóch trzecich odległości od punktu biodrowo-kolcowego (najniższa część przedniego kolca biodrowego górnego) do górno-bocznej krawędzi rzepki, nad brzuścem mięśnia obszerniego bocznego. Pomiary wykonano na nodze dominującej. Uzyskano dwa pomiary, a trzeci wykonano, jeśli różnica między pierwszymi dwoma przekroczyła 5%. Zarejestrowano średnią z dwóch najbardziej podobnych zapisów.

Ocenione zmiany w składzie ciała: masa tłuszczowa i masa beztłuszczowa.

Skład ciała oszacowano przy użyciu wieloczęstotliwościowej bioimpedancji z 8 elektrodami, wcześniej zwalidowanej (TANITA-MC780MA, Tanita Corp., Tokio, Japonia) przy co najmniej 8 godzinach postu, oraz przestrzegając następujących zaleceń dzień wcześniej: 1) utrzymanie zwyczajnego stylu życia, 2) powstrzymanie się od spożywania alkoholu lub kofeiny przez 24 godziny, oraz 3) unikanie intensywnej aktywności fizycznej przez 72 godziny przed badaniem. Dodatkowo, uczestników poproszono o oddanie moczu tuż przed pomiarem.

Pacjenci nosili lekkie ubrania i przyjmowali postawę zgodnie z instrukcjami producenta.

Dodatkowo, zmierzono masę ciała tym samym urządzeniem oraz wzrost za pomocą stadiometru ściennego (TANITA-LEICESTER HR-001, Tanita Corp., Tokio, Japonia) w celu obliczenia wskaźnika masy ciała.

Zmierzony wzrost

Wysokość (metry, m) mierzono za pomocą stadiometru ściennego (TANITA-LEICESTER HR-001, Tanita Corp., Tokio, Japonia), przy czym uczestnicy stali zgodnie z instrukcjami producenta.