Investigação da neuroserpina como um gene candidato ao autismo

Propõe-se realizar um estudo piloto para perguntar se a variação genética em SERPINI1 está contribuindo para o autismo idiopático. Para maximizar a chance de encontrar tais variantes, os endofenótipos de perseveração e atraso de linguagem (traços intermediários mais simples) serão usados ​​para selecionar vinte famílias autistas multiplex (e, se necessário, singleplex) com pacientes autistas idiopáticos que foram avaliados com o Autism Diagnostic Interview-revised (ADI-R) e suas famílias nucleares (irmãos e seus pais) serão identificados pelo Dr. Liptak e Dr. Lebel com a ajuda da Sra. Klausner e recrutados. Serão excluídos pacientes com autismo sindrômico devido a causas conhecidas, como síndrome do X frágil, esclerose tuberosa, síndrome de Down e neurofibromatose tipo I. Toda a região codificadora do SERPINI1 (nove éxons), uma quilobase da região promotora (Chen, 2007) e pelo menos 200 pb de íntron flanqueando cada éxon serão sequenciados em um caso índice e a segregação das mutações identificadas investigada dentro das famílias. Todas as mutações que parecem ser boas candidatas funcionais serão comparadas em frequência entre populações autistas e de controle, a fim de determinar se pode ser feito um caso de que SERPINI1 poderia estar contribuindo para o autismo. Além disso, SNPs de neuroserpina conhecidos identificados através do projeto Hapmap (www.hapmap.org) serão investigados e testados quanto à evidência de distorção/desequilíbrio de transmissão por análise de ligação/associação. Dependendo dos resultados desta experiência inicial, propõe-se subsequentemente sequenciar até mais 80 pacientes com autismo local (máximo de 100 pacientes). Estudos adicionais seriam realizados como estudos de acompanhamento para sequenciar de forma semelhante os genes de outras serpinas expressas no cérebro; Ativador de plasminogênio 1, PA1, SERPINE1 localizado no pico de ligação MLS em 7q22.1 visto no estudo IMGSAC (Lamb, 2002) enquanto Proteinase nexin 1, PN1 SERPINE2 em 2q36.1, próximo a picos de ligação previamente identificados (Autism Genome Project consortium, 2007) e potencialmente seus possíveis alvos de serina protease (tPA em 8p11.21 e uPA em 10q22.2) e os ativadores de neuroserpina upstream (ALK6, AMH e BMP2) (Lebeurrier, 2008). A expressão do tPA é aumentada por eventos que requerem plasticidade sináptica (Yepes, 2002) e aumenta a sinalização do receptor NMDA pela clivagem de sua subunidade NR1 (Pawlack, 2002). Todas as pistas interessantes serão perseguidas pela obtenção de amostras adicionais do Autism Genetic Resource Exchange (AGRE) (www.agre.org), um recurso publicamente disponível de dados fenotípicos e biomateriais que fornece informações de diagnóstico e DNA de 100 famílias de ASD multiplex .