Estudo de Canalopatias Dolorosas (PCS)

Atualmente, muito pouco se sabe sobre as características sensoriais e o processamento central da dor em pacientes com canalopatias hereditárias. Os investigadores estudarão cuidadosamente o fenótipo desses pacientes em termos de sintomatologia de dor, processamento sensorial revelado por testes sensoriais quantitativos e correlacionarão isso com o genótipo. Em pacientes selecionados, os investigadores realizarão biópsia de pele para determinar se há alguma evidência de dano a pequenas fibras e também gostariam de gerar fibroblastos e culturas de células-tronco da crista neural para estudos futuros da base molecular da disfunção do canal.

O estudo fornecerá novos insights sobre os mecanismos do sistema nervoso periférico e central envolvidos no processamento da dor.

Os investigadores se restringirão às canalopatias que causam síndromes de dor somática e não investigarão a enxaqueca. As seguintes condições serão consideradas: Eritromelalgia, Transtorno de dor paroxística extrema, Síndrome de dor episódica familiar, pacientes com sintomas de dor episódica para os quais uma causa não pode ser encontrada e pacientes com sensibilidade reduzida à dor.

1.2.1 Teste sensorial quantitativo (QST)

O QST é um método para determinar com precisão os limiares sensoriais na pele humana e é particularmente útil para determinar a disfunção nas fibras nervosas nociceptivas de diâmetro menor, embora a utilidade precisa do QST no manejo clínico da dor neuropática de rotina talvez exija alguma avaliação adicional. Há também um interesse crescente em usar o QST em combinação com a avaliação dos descritores de dor para fornecer informações sobre os mecanismos fisiopatológicos subjacentes da dor crônica. Por exemplo, a presença de alodinia dinâmica evocada por pincel indica sensibilização no nível da coluna vertebral. Os investigadores usarão um protocolo padronizado desenvolvido pelo consórcio alemão de dor neuropática, no qual possuem grande experiência. Apenas estudos limitados foram realizados em canalopatias dolorosas hereditárias na avaliação da função sensorial. Os investigadores correlacionarão os resultados do QST com os sintomas de dor e a qualidade de vida. Os investigadores gostariam de ver se anormalidades específicas do processamento sensorial estão associadas a canalopatias específicas.

1.2.2 Biópsia de pele.

A medição da densidade das fibras nervosas intraepidérmicas (IENFD) é um ensaio relativamente simples que pode ser realizado em biópsias de pele relativamente inócuas de 3 mm, uma investigação dermatológica de rotina. Sua utilidade na avaliação da função de pequenas fibras em neuropatias periféricas é clara. Neuropatias periféricas de diversas etiologias estão associadas à redução da densidade de inervação epidérmica. Os investigadores têm vasta experiência nesta técnica que tem morbidade mínima e gostariam de estabelecer em canalopatias dolorosas se a anatomia das fibras C que inervam a pele é normal. Os pacientes podem optar por não participar e ainda assim ser incluídos no estudo. Os fibroblastos podem ser cultivados a partir de biópsia de pele de 4 mm (obtida conforme descrito acima). Estes representam uma ferramenta útil no futuro como uma fonte de células cujo fenótipo pode ser modulado, por exemplo, para gerar células-tronco pluripotentes induzidas seguidas pela indução da diferenciação da crista neural para entender a base molecular da percepção alterada da dor. Outra abordagem é isolar as células-tronco da crista neural diretamente dos folículos pilosos, uma técnica pioneira do Prof. Sieber-Blum, da Universidade de Newcastle. Posteriormente, os pesquisadores pretendem gerar neurônios sensoriais a partir dessas células e comparar o comportamento dos neurônios sensoriais de indivíduos de controle com aqueles gerados por pacientes com síndromes de dor hereditária.

1.2.3 Testes de eletrodiagnóstico

Testes eletrodiagnósticos: avaliam a integridade das grandes fibras nervosas periféricas. Os estudos de condução nervosa (NCS) são amplamente utilizados na prática clínica para diagnosticar neuropatias periféricas e são procedimentos seguros nos quais a integridade do axônio e sua bainha de mielina são testadas por meio de estímulos elétricos externos. Técnicas de rastreamento de limiar, o limiar elétrico no qual o nervo responde à estimulação elétrica, também serão usadas para estudar os nervos periféricos.

Se o NCS tiver sido realizado como parte dos cuidados médicos de rotina do paciente, esses resultados serão registrados.

Microneurografia: Os estudos tradicionais de condução nervosa detectam apenas a atividade nas fibras nervosas maiores. Para registrar desde as menores fibras nervosas, os investigadores podem realizar microneurografia. Esta é uma técnica minimamente invasiva na qual a atividade de uma única fibra nervosa é registrada a partir dos nervos periféricos e serve para detectar diretamente a função das fibras de dor nos nervos periféricos em humanos. Neste teste, um fino microeletrodo é colocado próximo às fibras nervosas. Isso fornece o único meio direto para registrar diretamente a atividade da fibra C em humanos. J Serra co-investigador neste estudo e tem um longo histórico no uso de microneurografia.

1.2.4 Desafios químicos para medir o reflexo axônico e condicionar o sistema nervoso sensorial

Como outro meio de avaliar a integridade fisiológica das fibras C periféricas em pacientes que sofrem de síndromes dolorosas incomuns ou sensibilidade reduzida à dor, os investigadores irão provocar um reflexo axônico. Esse reflexo envolve a aplicação transcutânea de agentes como a histamina via iontoforese. A histamina estimulará as terminações nervosas periféricas das fibras C de pequeno diâmetro. Sua estimulação induz uma vasodilatação, que é visível como uma resposta de erupção da pele. A avaliação da extensão da resposta de flare é usada como uma indicação da integridade da população de fibras C de pequeno diâmetro. Se o indivíduo tiver alguma alergia, será excluído deste teste.

Desafios de condicionamento são intervenções que sensibilizam o sistema nociceptivo periférico de tal forma que o sistema nociceptivo responde mais vigorosamente a estímulos nocivos (hiperalgesia) ou responde a estímulos não nocivos (alodinia). A maneira pela qual esse sistema nociceptivo periférico responde fornece informações importantes sobre o funcionamento fisiológico do sistema nociceptor periférico. Os investigadores aplicarão desafios de condicionamento estabelecidos à pele dos sujeitos. A aplicação tópica de capsaicina e óleo de mostarda são desafios de condicionamento bem validados, estabelecidos e seguros que sensibilizam os nociceptores periféricos. O grupo do Prof. David Bennett tem uma vasta experiência no uso de ambos os desafios de condicionamento. No único estudo até o momento que investigou a alteração das fibras periféricas após um desafio de condicionamento em síndromes de dor hereditária, o óleo de mostarda causou um aumento da área de hiperalgesia em indivíduos com Síndrome de Dor Episódica Familiar em comparação com indivíduos não afetados. A aplicação desses estímulos pode levar a uma pequena irritação da pele e, portanto, eles não serão usados ​​se houver histórico de alergia/sensibilidade da pele. Na prática, tendo realizado tais testes centenas de vezes, isso não foi um problema.

1.2.5 Geração de imagens do cérebro humano com dor

O advento das técnicas de imagem funcional permitiu que os pesquisadores começassem a olhar dentro do cérebro humano para observar como é a dor no cérebro. Inicialmente, a pesquisa de imagem da dor determinou que a dor não é processada por uma única região do cérebro, mas envolve várias áreas corticais distribuídas. O grupo de regiões do cérebro que são mais ativas durante a dor são comumente referidos como a 'matriz da dor'. Isso inclui: córtices somatossensoriais primários e secundários (SI, SII), córtices insular, cingulado anterior e pré-frontal e o tálamo.

No entanto, a dor não é puramente um evento sensorial, mas também reflete como a pessoa se sente em relação à sua dor. Fatores que variam amplamente em uma população, como memórias, emoção, patologia, genética e fatores cognitivos, todos afetam diretamente como um indivíduo experimenta a dor. Além disso, a maneira como uma pessoa responde à dor é fortemente modificada pelo que é apropriado para a situação. Por exemplo, uma pessoa com dor pode esconder o quão desagradável é a sensação se ela se sentir desconfortável em seu ambiente. Por causa disso, a matriz da dor fornece uma imagem incompleta do que está acontecendo no cérebro durante a dor. Estudos de imagem da dor começaram a validar essa perspectiva. Por exemplo, Derbyshire e colaboradores mostraram ativação das principais regiões da matriz de dor mesmo quando os indivíduos não estavam com dor. A partir de um estudo sobre pessoas que sofrem de dor crônica, foi demonstrado que uma série de outras regiões-chave do cérebro estavam ativas fora da matriz da dor. É essencial para a pesquisa de imagens cerebrais atualizar a noção de 'matriz da dor' para explicar essas inconsistências.

1.2.6 Comorbidade psicológica, qualidade de vida e dor

Embora alguns estudos tenham examinado aspectos da dor no contexto de lesão nervosa (e muito raramente em relação a canalopatias hereditárias), eles não vão além da simples medição da intensidade da dor ou características sensoriais e há apenas uma literatura limitada que explorou as interações entre dor, estado psicológico e qualidade de vida. A dor neuropática em geral está associada a múltiplos problemas psicológicos que impactam na qualidade de vida. Estes incluem distúrbios do ritmo circadiano (p. dificuldade para dormir: moderada a grave em 60% dos pacientes), falta de energia (55%), sonolência (39%) e dificuldade de concentração (36%); achados semelhantes foram documentados especificamente na eritromelalgia. Percepção de saúde ruim, funcionamento físico ruim, alta prevalência de limitação de papel (física e emocional), bem como sintomas depressivos (com base na escala de catastrofização da dor e na Escala de Depressão do Centro de Estudos Epidemiológicos) foram encontrados em pacientes com Eritromelalgia. Em geral, crenças e medos sobre a dor e suas implicações contribuem substancialmente para determinar o humor e o comportamento. Uma vez que a dor neuropática é relativamente comum no contexto da neuropatia periférica, surge a questão de até que ponto a dor é a causa dessas comorbidades - a resposta para isso não é conhecida, mas grandes estudos randomizados controlados de intervenções analgésicas em estados de dor neuropática indicam que, à medida que a intensidade da dor diminui, também diminui a gravidade dessas comorbidades. Para responder a esta pergunta, os investigadores precisarão primeiro identificar ferramentas específicas para a medição da comorbidade da dor neuropática no contexto de canalopatias dolorosas, este é um dos objetivos desta proposta e eles irão avaliar uma variedade de ferramentas de avaliação existentes. Outra questão é que é provável que a comorbidade psicológica influencie o auto-relato da intensidade da dor, que é uma medida de resultado primário usual em ensaios clínicos de agentes analgésicos para dor neuropática.

Os investigadores usarão uma bateria de instrumentos psicológicos para determinar o psicológico e a qualidade de vida dos indivíduos com canalopatias dolorosas.

1.2.7 Amostras de sangue

Os investigadores irão coletar amostras de sangue (30mls) de cada indivíduo, que serão armazenadas a -80 graus Celsius em um freezer trancado. Eles irão sequenciar genes conhecidos associados a canalopatias dolorosas: SCN9a e TRPA1. Os investigadores irão armazenar DNA para que seja possível que outros genes candidatos associados à dor possam ser testados.