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Alfa defensina e gene 16S rRNA no diagnóstico de IAP

18 de outubro de 2018 atualizado por: Ayat Bakhet, Assiut University

Utilidade da Alfa Defensina e do Gene 16S rRNA no Diagnóstico de Infecção de Prótese Articular

A substituição total da articulação é considerada um dos procedimentos cirúrgicos de maior sucesso no campo da ortopedia. Apesar dessa conquista, as infecções articulares protéticas ainda são consideradas uma complicação grave, muitas vezes levando a resultados catastróficos e exigindo tratamento repetido e extenso.

A incidência de IAP (infecção de prótese articular) varia de acordo com a articulação envolvida; a taxa de artroplastias infectadas é a seguinte: 1,7% das artroplastias primárias e 3,2% das artroplastias não primárias do quadril.

O diagnóstico preciso de infecção de prótese articular geralmente envolve a combinação de vários fatores, incluindo sintomas, sinais, contagem de células do líquido sinovial, marcadores inflamatórios séricos e cultura.

A sensibilidade da cultura do líquido sinovial é de apenas 85%, portanto, uma cultura negativa não exclui a infecção. No entanto, a especificidade da cultura do líquido sinovial é de aproximadamente 95%, e as culturas positivas geralmente implicam na presença de infecção da prótese articular.

O teste de alfa-defensina no líquido sinovial é um imunoensaio desenvolvido especificamente para auxiliar no diagnóstico de infecção de prótese articular.

A sensibilidade e a especificidade do teste de imunoensaio de alfa-defensina foram relatadas acima de 96%.

Testes de diagnóstico molecular usando reação em cadeia da polimerase (PCR) estão emergindo como uma ferramenta para o diagnóstico de infecções e condições não infecciosas. A aplicação de técnicas de PCR com primers derivados de regiões altamente conservadas do gene 16S rRNA bacteriano tem sido útil na detecção de organismos bacterianos.

O uso da PCR do gene 16S rRNA de amplo alcance como uma ferramenta para identificação de bactérias é possível porque o gene 16S rRNA está presente em todas as bactérias.

Objetivo do trabalho:

.Determinar a sensibilidade e especificidade do gene de defesa alfa e 16S rRNA no diagnóstico de infecção de prótese articular.

  • Detecção de sensibilidade a antibióticos para diferentes organismos isolados do líquido sinovial

Visão geral do estudo

Descrição detalhada

A substituição total da articulação é considerada um dos procedimentos cirúrgicos de maior sucesso no campo da ortopedia, aliviando a dor e a limitação do movimento devido a danos articulares degenerativos ou traumáticos. Apesar dessa conquista, as infecções articulares protéticas ainda são consideradas uma complicação grave, muitas vezes levando a resultados catastróficos e exigindo tratamento repetido e extenso.

A infecção é um grande problema em ortopedia levando à falha do implante. É uma tarefa desafiadora tratar infecções de implantes ortopédicos que podem levar à substituição do implante e, em casos graves, podem resultar em amputação e mortalidade Fontes de bactérias infecciosas incluem o ambiente da sala de cirurgia, equipamentos cirúrgicos, roupas usadas pela equipe médica e paramédica , bactérias residentes na pele do paciente e bactérias que já residem no corpo do paciente As infecções associadas a implantes são o resultado da adesão de bactérias à superfície do implante e subsequente formação de biofilme no local de implantação .

Os estafilococos representam mais de 50% do total de infecções de próteses articulares. Aproximadamente 20% podem ser polimicrobianos, 15% causados ​​por gram-negativos e cerca de 10% são negativos para cultura.

A incidência de IAP (infecção de prótese articular) varia de acordo com a articulação envolvida; a taxa de infecção das artroplastias é a seguinte: 1,7% das primárias e 3,2% das artroplastias não primárias do quadril.

Uma terapia apropriada correta e precoce se o diagnóstico microbiológico correto e oportuno de infecções for feito dentro de 4 semanas, pode ser possível seguir uma abordagem conservadora na prótese, uma vez que os microorganismos ainda não estão organizados em biofilmes. Um diagnóstico tardio (>4 semanas) de infecções precoces e tardias envolve a necessidade de remoção da prótese devido à produção de um biofilme microbiano estruturado e maduro . A definição de PJI foi recentemente revisada pelo International Consensus Group on Periprosthetic Joint Infection

De acordo com o PJI Consensus Group, os pacientes devem ser considerados portadores de PJI se preencherem um dos critérios maiores ou pelo menos três dos critérios menores:

Os critérios principais são os seguintes:

  1. Duas culturas periprotéticas positivas com organismos fenotipicamente idênticos.
  2. Um trato sinusal comunicando-se com a articulação.

Os critérios menores são os seguintes:

  1. Proteína C reativa sérica elevada e velocidade de hemossedimentação.
  2. Contagem elevada de glóbulos brancos (WBC) no líquido sinovial ou alteração ++ na tira de teste de esterase de leucócitos.
  3. Porcentagem elevada de neutrófilos nucleares de polimorfos do líquido sinovial.
  4. análise histológica positiva de tecido periprotético.
  5. Uma única cultura positiva.

Fatores de risco:

Diferentes patologias podem aumentar o risco de infecções de próteses: infecções prévias, obesidade, diabetes mellitus, imunodeficiência, desnutrição ou terapia medicamentosa. A avaliação clínica fornece mais detalhes para a suspeita de infecção. Durante o exame físico, o cirurgião pode encontrar sinais típicos de inflamação como inchaço, vermelhidão, dor e perda de função.

o sinal mais frequente foi perda de função (95%), seguido de dor (85%) e inchaço além disso, apenas 22% dos pacientes apresentaram febre e 14% tiveram sensação de mal-estar, mas 19% tiveram fístula como sinal primário de infecção.

Diagnóstico:

O diagnóstico preciso de infecção de prótese articular geralmente envolve a combinação de vários fatores, incluindo sintomas, sinais, contagem de células do líquido sinovial, marcadores inflamatórios séricos e cultura.

A cultura é uma ferramenta importante para o diagnóstico de infecção de prótese articular. A cultura de fluido articular aspirado deve ser enviada em vários conjuntos de meios de cultura.

A sensibilidade da cultura do líquido sinovial é de apenas 85%, portanto, uma cultura negativa não exclui a infecção. No entanto, a especificidade da cultura do líquido sinovial é de aproximadamente 95%, e as culturas positivas geralmente implicam na presença de infecção da prótese articular.

Numerosos testes pré-operatórios para determinação e diagnóstico de uma artroplastia total do quadril falhada estão disponíveis. Esses testes incluem testes de triagem hematológica (medição da velocidade de hemossedimentação e do nível de proteína C-reativa, contagem de glóbulos brancos), aspiração da articulação do quadril, radiografia simples e estudos de imagem com radionuclídeos. Nenhum desses testes é 100% confiável e está sujeito a um espectro variável de resultados falsos negativos ou falsos positivos. Um diagnóstico errado tem consequências cruciais para o tratamento e para o paciente. No caso de uma infecção periprotética diagnosticada erroneamente, a revisão da prótese sem desbridamento adequado manteria uma substituição total do quadril malsucedida e arriscaria uma falha precoce. Por outro lado, uma suposição errada sobre a infecção periprotética causada por um teste falso positivo, o paciente tem que se submeter a uma cirurgia que seria altamente inadequada como uma operação de pedra cinta ou uma revisão cimentada.

O diagnóstico de IAP é baseado nos achados clínicos de artrite, análise anormal do líquido sinovial (SF) e confirmação microbiológica com coloração positiva de SF gram ou cultura. dias a partir do momento do envio para a recuperação do patógeno no meio de cultura, os resultados podem ser afetados por um pequeno inóculo, organismos fastidiosos podem exigir testes microbiológicos especializados e antibióticos prévios podem tornar a cultura negativa. um método rápido, sensível e específico no diagnóstico de IAP.

O teste de alfa-defensina do líquido sinovial é um imunoensaio desenvolvido especificamente para auxiliar no diagnóstico de infecção de prótese articular IAP .

A simplicidade do teste de alfa-defensina, combinada com sua capacidade de fornecer um resultado clínico logo após uma aspiração articular pré-operatória, torna-o uma ferramenta atraente para o diagnóstico de IAP. patógeno no líquido sinovial. Portanto, é bastante razoável questionar se esse peptídeo antimicrobiano é liberado em resposta a todos os patógenos e também se o teste de alfa-defensina pode detectar IAPs causadas por todos os organismos .

A sensibilidade e a especificidade do teste de imunoensaio de alfa-defensina foram relatadas acima de 96%.

O uso da PCR do gene 16S rRNA de ampla faixa como uma ferramenta para identificação de bactérias é possível porque o gene 16S rRNA está presente em todas as bactérias. O gene 16S rRNA consiste em sequências de nucleotídeos altamente conservadas, intercaladas com regiões variáveis ​​que são específicas de gênero ou espécie.

Testes de diagnóstico molecular usando reação em cadeia da polimerase (PCR) estão emergindo como uma ferramenta para o diagnóstico de infecções e condições não infecciosas. A aplicação de técnicas de PCR com primers derivados de regiões altamente conservadas do gene 16S rRNA bacteriano tem sido útil na detecção de organismos bacterianos.

Tipo de estudo

Observacional

Inscrição (Antecipado)

90

Contactos e Locais

Esta seção fornece os detalhes de contato para aqueles que conduzem o estudo e informações sobre onde este estudo está sendo realizado.

Locais de estudo

      • Assuit, Egito
        • Recrutamento
        • Ayat Bakhet Mostafa
        • Contato:

Critérios de participação

Os pesquisadores procuram pessoas que se encaixem em uma determinada descrição, chamada de critérios de elegibilidade. Alguns exemplos desses critérios são a condição geral de saúde de uma pessoa ou tratamentos anteriores.

Critérios de elegibilidade

Idades elegíveis para estudo

  • Filho
  • Adulto
  • Adulto mais velho

Aceita Voluntários Saudáveis

Não

Gêneros Elegíveis para o Estudo

Tudo

Método de amostragem

Amostra Não Probabilística

População do estudo

Este estudo será conduzido em 90 indivíduos informados (de acordo com as diretrizes do comitê de ética da faculdade de medicina da Universidade de Assuit)

Descrição

Critério de inclusão:

- O estudo incluirá todos os pacientes com articulação protética com suspeita de infecção por meio de manifestação clínica (febre, dor, vermelhidão da fístula, inchaço, calor e perda de função) associada a evidências radiológicas.

Critério de exclusão:

  • Qualquer paciente que iniciou tratamento com antibióticos será excluído das amostras.

Plano de estudo

Esta seção fornece detalhes do plano de estudo, incluindo como o estudo é projetado e o que o estudo está medindo.

Como o estudo é projetado?

Detalhes do projeto

  • Modelos de observação: Outro
  • Perspectivas de Tempo: Prospectivo

O que o estudo está medindo?

Medidas de resultados primários

Medida de resultado
Descrição da medida
Prazo
Valor diagnóstico da alfa defensina no diagnóstico de infecção articular protética
Prazo: 2 dias
valor da medição de alfa defensina por ensaio imunossorvente ligado a enzima (ELISA) no diagnóstico de infecção de prótese articular como um biomarcador rápido
2 dias
Valor diagnóstico do gene 16S rRNA no diagnóstico de infecção de prótese articular
Prazo: 2 dias
valor da medição do gene 16S rRNA por PCR convencional no diagnóstico de infecção articular protética como teste mais preciso
2 dias

Colaboradores e Investigadores

É aqui que você encontrará pessoas e organizações envolvidas com este estudo.

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Investigadores

  • Investigador principal: Osama Bakr Sedek, MD, Assuit Univeristy
  • Cadeira de estudo: Dalia Tarik Kamal, MD, Assuit Univeristy
  • Cadeira de estudo: Amal Mohammed Hosney, MD, Assuit Univeristy
  • Diretor de estudo: Ayat Bakhet Mostafa, Dr, Assuit Univeristy

Publicações e links úteis

A pessoa responsável por inserir informações sobre o estudo fornece voluntariamente essas publicações. Estes podem ser sobre qualquer coisa relacionada ao estudo.

Datas de registro do estudo

Essas datas acompanham o progresso do registro do estudo e os envios de resumo dos resultados para ClinicalTrials.gov. Os registros do estudo e os resultados relatados são revisados ​​pela National Library of Medicine (NLM) para garantir que atendam aos padrões específicos de controle de qualidade antes de serem publicados no site público.

Datas Principais do Estudo

Início do estudo (Antecipado)

1 de janeiro de 2019

Conclusão Primária (Antecipado)

1 de janeiro de 2020

Conclusão do estudo (Antecipado)

1 de janeiro de 2020

Datas de inscrição no estudo

Enviado pela primeira vez

18 de outubro de 2018

Enviado pela primeira vez que atendeu aos critérios de CQ

18 de outubro de 2018

Primeira postagem (Real)

22 de outubro de 2018

Atualizações de registro de estudo

Última Atualização Postada (Real)

22 de outubro de 2018

Última atualização enviada que atendeu aos critérios de controle de qualidade

18 de outubro de 2018

Última verificação

1 de outubro de 2018

Mais Informações

Termos relacionados a este estudo

Palavras-chave

Outros números de identificação do estudo

  • Diagnosis of PJI

Plano para dados de participantes individuais (IPD)

Planeja compartilhar dados de participantes individuais (IPD)?

Indeciso

Informações sobre medicamentos e dispositivos, documentos de estudo

Estuda um medicamento regulamentado pela FDA dos EUA

Não

Estuda um produto de dispositivo regulamentado pela FDA dos EUA

Não

Essas informações foram obtidas diretamente do site clinicaltrials.gov sem nenhuma alteração. Se você tiver alguma solicitação para alterar, remover ou atualizar os detalhes do seu estudo, entre em contato com register@clinicaltrials.gov. Assim que uma alteração for implementada em clinicaltrials.gov, ela também será atualizada automaticamente em nosso site .

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