Альфа-дефенсин и ген 16S рРНК в диагностике ППИ

Тотальная замена сустава считается одной из самых успешных хирургических процедур в области ортопедии, облегчающей боль и ограничение движений вследствие дегенеративного или травматического повреждения сустава. Несмотря на это достижение, инфекции протезированных суставов по-прежнему считаются тяжелым осложнением, часто приводящим к катастрофическим результатам и требующим повторного и обширного лечения.

Инфекция является серьезной проблемой в ортопедии, приводящей к отторжению имплантата. Лечение инфекции ортопедических имплантатов представляет собой сложную задачу, которая может привести к замене имплантата, а в тяжелых случаях может привести к ампутации и летальному исходу. Источниками инфекционных бактерий являются окружающая среда операционной, хирургическое оборудование, одежда, которую носит медицинский и средний медицинский персонал. , резидентные бактерии на коже пациента и бактерии, уже обитающие в организме пациента Инфекции, связанные с имплантатом, являются результатом адгезии бактерий к поверхности имплантата и последующего образования биопленки в месте имплантации.

Стафилококки составляют более 50% всех инфекций протезированных суставов. Приблизительно 20 % могут быть полимикробными, 15 % вызваны грамотрицательными и около 10 % культурально-отрицательными.

Заболеваемость ПИС (инфекцией протезного сустава) варьируется в зависимости от пораженного сустава; частота инфицирования эндопротезов следующая: 1,7% первичных и 3,2% непервичное эндопротезирование тазобедренного сустава.

Правильная и своевременная адекватная терапия при правильной и своевременной микробиологической диагностике инфекций в течение 4 нед позволяет придерживаться консервативного подхода к протезу, так как микроорганизмы еще не организованы в биопленки. Запоздалая диагностика (>4 недель) ранних и поздних инфекций связана с необходимостью удаления протеза из-за образования структурированной и зрелой микробной биопленки. Определение ПИС недавно было пересмотрено Международной группой консенсуса по перипротезным инфекциям суставов.

Согласно консенсусной группе ППИ, пациентов следует считать имеющими ППИ, если они соответствуют одному из основных критериев или по крайней мере трем второстепенным критериям:

Основные критерии следующие:

1. Две положительные перипротезные культуры с фенотипически идентичными микроорганизмами.
2. Синусовый тракт, сообщающийся с суставом.

Второстепенные критерии следующие:

1. Повышенный С-реактивный белок сыворотки и скорость оседания эритроцитов.
2. Повышенное количество лейкоцитов в синовиальной жидкости (WBC) или изменение ++ на тест-полоске для определения лейкоцитарной эстеразы.
3. Повышенный процент полиморфно-ядерных нейтрофилов в синовиальной жидкости.
4. положительный гистологический анализ перипротезной ткани.
5. Единая позитивная культура.

Факторы риска:

Различные патологии могут увеличить риск инфекций протеза: перенесенные ранее инфекции, ожирение, сахарный диабет, иммунодефицит, недоедание или медикаментозная терапия. Клиническая оценка дает более подробную информацию о подозрении на инфекцию. Во время физического осмотра хирург может обнаружить типичные признаки воспаления, такие как отек, покраснение, боль и потеря функции.

наиболее частым признаком была потеря функции (95%), затем боль (85%) и отек, кроме того, только у 22% пациентов была лихорадка и у 14% было недомогание, но у 19% первичным признаком инфекции был свищ.

Диагноз:

Точный диагноз инфекции протезированных суставов часто включает сочетание нескольких факторов, включая симптомы, признаки, количество клеток синовиальной жидкости, маркеры воспаления в сыворотке и посев.

Культура является важным инструментом для диагностики инфекции протезного сустава. Культуру аспирированной суставной жидкости следует отправлять в нескольких наборах питательных сред.

Чувствительность посева синовиальной жидкости составляет всего 85%, поэтому отрицательный результат посева не исключает инфекции. Однако специфичность посева синовиальной жидкости составляет примерно 95%, а положительный результат часто свидетельствует о наличии инфекции протезированного сустава.

Доступны многочисленные предоперационные тесты для определения и диагностики неудачного тотального эндопротезирования тазобедренного сустава. Эти тесты включают гематологические скрининговые тесты (измерение скорости оседания эритроцитов и уровня С-реактивного белка, количество лейкоцитов), аспирацию тазобедренного сустава, обзорную рентгенографию и радионуклидные исследования. Ни один из этих тестов не является на 100 % надежным и подвержен различному спектру ложноотрицательных или ложноположительных результатов. Ошибочный диагноз имеет важные последствия для лечения и для пациента. В случае неправильно диагностированной перипротезной инфекции ревизия протеза без надлежащей обработки оставит неудавшийся тотальный эндопротез тазобедренного сустава и риск преждевременной неудачи. С другой стороны, неверное предположение о перипротезной инфекции, вызванной ложноположительным тестом, означает, что пациент должен пройти операцию, которая была бы крайне неадекватной, например, операция по удалению опоясывающего камня или цементная ревизия.

Диагноз ППИ основывается на клинических признаках артрита, аномальном анализе синовиальной жидкости (СЖ) и микробиологическом подтверждении положительным окрашиванием по грамму СЖ или посевом. дней с момента отправки для выделения возбудителя на культуральной среде на результаты может повлиять небольшой инокулят, привередливые микроорганизмы могут потребовать специализированного микробиологического исследования, а предварительное введение антибиотиков может сделать посев отрицательным. быстрый, чувствительный и специфический метод диагностики ППИ.

Анализ синовиальной жидкости на альфа-дефензин представляет собой иммуноанализ, специально разработанный для помощи в диагностике инфекций протезов суставов, вызванных ПИС.

Простота теста на альфа-дефензин в сочетании с его способностью давать клинический результат вскоре после предоперационной аспирации сустава делает его привлекательным инструментом для диагностики ППИ. возбудителя в синовиальной жидкости. Поэтому очень разумно задаться вопросом, высвобождается ли этот противомикробный пептид в ответ на все патогены, а также может ли тест на альфа-дефензин обнаруживать ППИ, вызванные всеми микроорганизмами.

Сообщается, что чувствительность и специфичность иммуноферментного анализа на альфа-дефензин превышают 96%.

Использование широкодиапазонной ПЦР гена 16S рРНК в качестве инструмента для идентификации бактерий возможно, поскольку ген 16S рРНК присутствует во всех бактериях. Ген 16S рРНК состоит из высококонсервативных нуклеотидных последовательностей, перемежающихся вариабельными областями, специфичными для рода или вида.

Молекулярные диагностические тесты с использованием полимеразной цепной реакции (ПЦР) появляются как инструмент для диагностики инфекций и неинфекционных состояний. Применение методов ПЦР с праймерами, полученными из высококонсервативных областей бактериального гена 16S рРНК, оказалось полезным для обнаружения бактериальных организмов.