志贺氏菌 O-SPC/rBRU 结合疫苗

这种宋内志贺氏菌 O-SP 核心结合疫苗的活性成分是由宋内志贺氏菌 LPS 片段组成的糖蛋白结合物。 糖类成分由平均 3.5 个重复单元的 O-SP 加上 LPS (O-SPC) 的核心区域组成。 O-SPC 与艰难梭菌的重组无毒胞外蛋白 B 共价结合。

本阶段研究的目的是确定这种疫苗是否安全以及是否可以诱导成人对志贺氏菌病的 IgG 抗体类型特异性免疫。 总体目标是确定该疫苗是否可以引发比以前用全长 O-SP 制备的实验疫苗更高水平的 IgG 抗体，在大于或等于 3 岁的儿童中显示 >70% 有效，以诱导类型-年幼儿童对志贺菌病的特异性免疫。

将在以色列招募 60 名 18-49 岁的健康成年人。 志愿者将随机接种一剂疫苗。注射 10 或 25 微克的研究性结合疫苗。 将在 30 分钟观察局部和全身反应，并指导志愿者测量体温并检查注射部位是否发红和肿胀，并在接种疫苗后 6 小时和每天填写问卷，持续 7 天。 志愿者将在注射后 24 或 48 小时以及他们要求的任何时间访问诊所。 该研究将从注射 10ug 剂量的 5 名志愿者开始，如果没有发生严重的不良反应，则由注射 25ug 剂量的 5 名志愿者开始。 如果任一组的 5 名志愿者中有 1 人出现严重的不良反应，则将再注射 5 名该剂量的志愿者。 如果没有严重的不良反应，研究将继续进行。 如果出现更严重的反应，IRB 和 FDA 将停止研究并重新评估。

疫苗诱导的抗体将在免疫后 1 个月和 6 个月进行测量，并与我们之前的 S. sonnei 结合疫苗引起的抗体进行比较。

有大量证据表明，针对 LPS 的 O 特异性多糖结构域的血清 IgG 抗体达到临界水平可赋予 S. sonnei 以及其他志贺氏菌类型特异性免疫力：

1. 志贺氏菌病很少见于 4-6 个月大的婴儿。 对此最明显的解释是母体来源的血清 IgG 提供了这种免疫力；
2. IgG 抗 LPS 抗体随着年龄的增长而发展，在许多情况下，这种抗体不是由同源细菌引起的，而是由非致病性交叉反应的肠道细菌引起的；
3. 最高的发病率、发病率和死亡率发生在 6 个月至 6 岁期间，此时母源性血清抗 O-SP 已经减弱并且天然源性抗体尚未出现；
4. 一次 S. sonnei-rEPA 偶联物注射显示出对以色列国防军士兵志贺氏菌病的显着保护作用。 发生志贺氏菌病的疫苗接种者对同源 LPS 的血清 IgG 反应明显低于未发生志贺氏菌病的疫苗接种者。结合疫苗诱导的高抗体水平表明血清 IgG 抗 LPS 水平与 S. sonnei 感染的免疫力呈正相关；
5. 在显示安全性和与年龄相关的免疫原性的第 1 期和第 2 期研究之后，对 S. sonnei 和 S. flexneri 2a 型 O 特异性多糖 (O-SP) 蛋白偶联物进行了双盲随机和疫苗对照的第 3 期评估在以色列的 1-4 岁儿童中进行。

对于 S.sonnei 偶联物的接受者，在 3-4 岁的接受者中显示出 71.1% 的功效，而对于 S. flexneri 2a 的接受者则没有显示出功效。 两种疫苗在 1-3 岁儿童中的疗效均无统计学意义。 根据儿童接种的疫苗，血清 IgG 抗 O-SP 水平升高，但 G.M.最后一次注射后数月，水平迅速下降。 我们的解释是，志贺氏菌偶联物的年龄相关功效是由于偶联物诱导的 O-SP 抗体水平。 因此，我们开发了一种方法来增加偶联物的免疫原性，以接近显示受我们的 S. sonnei O-SP 保护的以色列士兵的抗体水平。

从 S. sonnei LPS 中分离出低分子量 O-SP 核心 (O-SPC) 片段，并通过其还原端与载体蛋白结合。 O-SPC 偶联物在 S. sonnei 糖类还原末端的末端 Kdo 残基和与载体结合的氨氧基接头之间使用肟键。 偶联反应在中性pH值和室温下进行。 载体蛋白是一种突变体无毒艰难梭菌外毒素 B。这种新的 S. sonnei O-SPC 偶联物在年轻远交小鼠中诱导的 IgG 抗体水平显着高于 O-SP 偶联物引起的水平。