Vaccino coniugato Shigella Sonnel O-SPC/rBRU

Il principio attivo di questo vaccino coniugato Shigella sonnei O-SP-core è un coniugato saccaride-proteina composto da un frammento di S. sonnei LPS. Il componente saccaridico è costituito da una media di 3,5 unità ripetute dell'O-SP più la regione centrale dell'LPS (O-SPC). L'O-SPC è legato in modo covalente all'esoproteina B ricombinante non tossica di Clostridium difficile.

L'obiettivo di questa fase dello studio è determinare se questo vaccino è sicuro e può indurre l'immunità specifica del tipo di anticorpi IgG alla shigellosi negli adulti. L'obiettivo generale è determinare se questo vaccino può suscitare livelli più elevati di anticorpi IgG rispetto ai precedenti vaccini sperimentali realizzati con l'O-SP a lunghezza intera, dimostrato di essere efficace> 70% in bambini di età pari o superiore a 3 anni, per indurre il tipo -immunità specifica alla shigellosi nei bambini più piccoli.

Sessanta adulti sani di età compresa tra 18 e 49 anni saranno reclutati in Israele. I volontari saranno vaccinati su base casuale con uno i.m. iniezione di 10 o 25 microgrammi del vaccino coniugato sperimentale. Le reazioni locali e sistemiche saranno osservate a 30 minuti, e ai volontari verrà chiesto di misurare la loro temperatura ed esaminare il sito di iniezione per arrossamento e gonfiore e compilare un questionario a 6, ore e ogni giorno per 7 giorni dopo la vaccinazione. I volontari visiteranno la clinica 24 o 48 ore dopo l'iniezione e ogni volta che lo richiedono. Lo studio comincerà con 5 volontari iniettati con la dose di 10ug da seguire, se non si verificano reazioni avverse gravi, da 5 volontari iniettati con la dose di 25ug. Se si verifica una reazione avversa grave su 1 dei 5 volontari in entrambi i gruppi, ad altri 5 verrà iniettata quella dose. Se non ci sono reazioni avverse gravi lo studio procederà. Se si verifica un'altra reazione grave, lo studio verrà interrotto e rivalutato dall'IRB e dalla FDA.

Gli anticorpi indotti dal vaccino saranno misurati a 1 e 6 mesi dopo l'immunizzazione e confrontati con quelli provocati dai nostri precedenti vaccini coniugati contro S. sonnei.

C'è un corpo di prove che un livello critico di anticorpi IgG sierici al dominio polisaccaridico O-specifico di LPS conferisce immunità tipo-specifica a S. sonnei così come ad altre Shigella:

1. La shigellosi è raramente osservata nei bambini fino all'età di 4-6 mesi. La spiegazione più ovvia di ciò è che le IgG sieriche di origine materna forniscono questa immunità;
2. Esiste uno sviluppo correlato all'età di anticorpi IgG anti-LPS che, in molti casi, non è indotto dai batteri omologhi ma da batteri enterici non patogeni che reagiscono in modo incrociato;
3. L'incidenza, la morbilità e la mortalità più elevate si verificano tra i 6 mesi ei 6 anni di età, quando l'anti-O-SP sierico di origine materna è diminuito e gli anticorpi di origine naturale non sono ancora comparsi;
4. Un'iniezione di un coniugato S. sonnei-rEPA ha mostrato una protezione significativa contro la shigellosi nei soldati delle forze di difesa israeliane. I vaccinati che hanno sviluppato la shigellosi hanno mostrato risposte IgG sieriche significativamente inferiori all'LPS omologo rispetto a quelli che non l'hanno fatto. L'alto livello di anticorpi indotto dal vaccino coniugato indica la correlazione positiva tra i livelli sierici di IgG anti-LPS e l'immunità all'infezione da S. sonnei;
5. A seguito di studi di fase 1 e di fase 2 che hanno dimostrato la sicurezza e l'immunogenicità correlata all'età, è stata effettuata una valutazione di fase 3 randomizzata in doppio cieco e controllata da vaccino dei coniugati proteici polisaccaridici O-specifici di S. sonnei e S. flexneri di tipo 2a (O-SP). condotto tra i bambini di 1-4 anni in Israele.

Per i riceventi del coniugato S. sonnei è stata dimostrata un'efficacia del 71,1% tra i riceventi di 3-4 anni, mentre non è stata dimostrata alcuna efficacia per i riceventi di S. flexneri 2a. Non c'era efficacia statisticamente significativa per nessuno dei due vaccini nei bambini di 1-3 anni. I livelli sierici di IgG anti-O-SP erano elevati in base al vaccino ricevuto dai bambini, ma G.M. i livelli sono diminuiti rapidamente diversi mesi dopo l'ultima iniezione. La nostra interpretazione è che l'efficacia correlata all'età dei coniugati di Shigella era dovuta ai livelli di anticorpi O-SP indotti dal coniugato. Di conseguenza, abbiamo sviluppato un metodo per aumentare l'immunogenicità dei coniugati per avvicinarsi ai livelli anticorpali dei soldati israeliani che hanno dimostrato di essere protetti dal nostro S. sonnei O-SP.

I frammenti O-SP-core (O-SPC) a basso peso molecolare sono stati isolati da S. sonnei LPS e legati dalle loro estremità riducenti alla proteina portatrice. I coniugati O-SPC utilizzavano legami ossimici tra i residui Kdo terminali alle estremità riducenti dei saccaridi di S. sonnei e i linker amminoossi legati al vettore. La reazione di accoppiamento è stata condotta a pH neutro e temperatura ambiente. La proteina portatrice era un'esotossina B mutante non tossica di Clostridium difficile. I livelli di anticorpi IgG indotti in giovani topi di razza da questo nuovo coniugato O-SPC di S. sonnei erano significativamente più alti di quelli provocati dai coniugati O-SP.