Shigella Sonnel O-SPC/rBRU konjugatvaccin

Den aktiva ingrediensen i detta Shigella sonnei O-SP-kärnkonjugatvaccin är ett sackarid-proteinkonjugat som består av ett fragment av S. sonnei LPS. Sackaridkomponenten består av i genomsnitt 3,5 upprepade enheter av O-SP plus kärnregionen av LPS (O-SPC). O-SPC är kovalent bunden till det rekombinanta icke-toxiska exoproteinet B från Clostridium difficile.

Syftet med denna fas av studien är att avgöra om detta vaccin är säkert och kan inducera IgG-antikroppstypspecifik immunitet mot shigellos hos vuxna. Det övergripande målet är att avgöra om detta vaccin kan framkalla högre nivåer av IgG-antikroppar än de tidigare experimentella vaccinerna gjorda med fullängds-O-SP, som visat sig vara >70 % effektivt hos barn över eller lika med 3 år gamla, för att inducera typ -specifik immunitet mot shigellos hos yngre barn.

Sextio 18-49 år gamla friska vuxna kommer att rekryteras i Israel. Volontärer kommer att vaccineras slumpmässigt med en i.m. injektion av 10 eller 25 mikrogram av undersökningskonjugatvaccinet. Lokala och systemiska reaktioner kommer att observeras efter 30 minuter, och de frivilliga kommer att instrueras att ta sin temperatur och undersöka injektionsstället för rodnad och svullnad och fylla i ett frågeformulär vid 6, timmar och dagligen i 7 dagar efter vaccination. Volontärerna kommer att besöka kliniken 24 eller 48 timmar efter injektionen och när som helst de begär det. Studien kommer att inledas med 5 frivilliga injicerade med 10 ug-dosen som ska följas, om inga allvarliga biverkningar inträffar, av 5 frivilliga injicerade med 25 ug-dosen. Om en allvarlig biverkning inträffar hos 1 av de 5 frivilliga i endera gruppen, kommer ytterligare 5 att injiceras med den dosen. Om det inte finns några allvarliga biverkningar kommer studien att fortsätta. Om det finns ytterligare en allvarlig reaktion kommer studien att stoppas och omvärderas av IRB och FDA.

Vaccininducerade antikroppar kommer att mätas 1 och 6 månader efter immunisering och jämföras med de som framkallats av våra tidigare S. sonnei-konjugatvacciner.

Det finns en mängd bevis för att en kritisk nivå av serum-IgG-antikropp mot den O-specifika polysackariddomänen av LPS ger typspecifik immunitet till S. sonnei såväl som till andra Shigella:

1. Shigellos ses sällan hos spädbarn upp till 4-6 månaders ålder. Den mest uppenbara förklaringen till detta är att serum-IgG från modern ger denna immunitet;
2. Det finns en åldersrelaterad utveckling av IgG anti-LPS-antikroppar som i många fall inte induceras av de homologa bakterierna utan av icke-patogena korsreagerande enteriska bakterier;
3. Den högsta incidensen, sjukligheten och dödligheten inträffar under 6 månader till 6 års ålder när det maternalt härledda serumet anti-O-SP har avtagit och de naturligt härledda antikropparna ännu inte har dykt upp;
4. En injektion av ett S. sonnei-rEPA-konjugat visade betydande skydd mot shigellos hos israeliska försvarsstyrkasoldater. Vaccinerade som utvecklade shigellos visade signifikant lägre serum-IgG-svar mot homolog LPS än de som inte gjorde det. Den höga antikroppsnivån som induceras av konjugatvaccinet indikerar den positiva korrelationen mellan serum-IgG-anti-LPS-nivåerna och immunitet mot S. sonnei-infektion;
5. Efter fas 1- och fas 2-studier som visade säkerhet och åldersrelaterad immunogenicitet, gjordes en dubbelblind randomiserad och vaccinkontrollerad fas 3-utvärdering av S. sonnei och S. flexneri typ 2a O-specifika polysackarid (O-SP) proteinkonjugat. genomförs bland 1-4-åringar i Israel.

För mottagare av S. sonnei-konjugatet visades 71,1 % effekt bland 3-4-åriga mottagare, ingen effekt visades för mottagare av S. flexneri 2a. Det fanns ingen statistiskt signifikant effekt för något av vaccinerna hos 1-3-åringarna. Nivåer av serum IgG anti-O-SP var förhöjda enligt vaccinet som barnen fick men G.M. nivåerna sjönk snabbt flera månader efter den senaste injektionen. Vår tolkning är att den åldersrelaterade effekten av Shigella-konjugaten berodde på de konjugatinducerade O-SP-antikroppsnivåerna. Följaktligen har vi utvecklat en metod för att öka immunogeniciteten hos konjugaten för att närma sig antikroppsnivåerna hos israeliska soldater som visat sig skyddas av vår S. sonnei O-SP.

Lågmolekylära O-SP-kärnfragment (O-SPC) isolerades från S. sonnei LPS och bands genom sina reducerande ändar till bärarproteinet. O-SPC-konjugaten använde oximbindningar mellan de terminala Kdo-resterna vid de reducerande ändarna av S. sonnei-sackariderna och aminooxilänkar bundna till bäraren. Kopplingsreaktionen utfördes vid ett neutralt pH och rumstemperatur. Bärarproteinet var ett mutant ogiftigt Clostridium difficile exotoxin B. IgG-antikroppsnivåer inducerade i unga utavlade möss av detta nya S. sonnei O-SPC-konjugat var signifikant högre än de som framkallades av O-SP-konjugaten.