Shigella Sonnel O-SPC/rBRU konjugált vakcina

Ennek a Shigella sonnei O-SP-mag konjugált vakcinának a hatóanyaga egy szacharid-fehérje konjugátum, amely az S. sonnei LPS egy fragmentumából áll. A szacharid komponens átlagosan 3,5 ismétlődő O-SP egységből és az LPS (O-SPC) magrégiójából áll. Az O-SPC kovalensen kötődik a Clostridium difficile rekombináns, nem toxikus B exoproteinjéhez.

A vizsgálat ezen szakaszának célja annak meghatározása, hogy ez a vakcina biztonságos-e, és képes-e IgG antitest-típus-specifikus immunitást kiváltani a shigellosis ellen felnőtteknél. Az általános cél annak meghatározása, hogy ez a vakcina képes-e magasabb szintű IgG antitestet kiváltani, mint a teljes hosszúságú O-SP-vel készült korábbi kísérleti vakcinák, amelyek >70%-os hatékonyságot mutattak 3 évesnél idősebb gyermekeknél, a típus indukálására. - specifikus immunitás a shigellózissal szemben fiatalabb gyermekeknél.

Hatvan 18-49 éves egészséges felnőttet toboroznak Izraelben. Az önkéntesek véletlenszerű oltásban részesülnek egy i.m. 10 vagy 25 mikrogramm vizsgálati konjugált vakcina injekciója. A helyi és szisztémás reakciókat 30 perc elteltével figyelik meg, és az önkénteseket arra utasítják, hogy mérjék meg a testhőmérsékletüket, vizsgálják meg az injekció beadásának helyét a bőrpír és duzzanat szempontjából, és töltsenek ki egy kérdőívet az oltás után 6 órával és naponta 7 napon keresztül. Az önkéntesek az injekció beadását követő 24 vagy 48 órában felkeresik a klinikát, és bármikor, amikor kérik. A vizsgálatot 5 önkéntessel kezdik, akiknek beadták a 10 ug-os adagot, és ha nem jelentkeznek súlyos mellékhatások, 5 önkéntest kell beadni a 25 ug-os adaggal. Ha súlyos nemkívánatos reakció jelentkezik bármelyik csoport 5 önkéntese közül 1-nél, további 5 személy kap injekciót ezzel az adaggal. Ha nincsenek súlyos mellékhatások, a vizsgálatot folytatják. Ha még egy súlyos reakció lép fel, a vizsgálatot leállítják, és az IRB és az FDA újraértékeli.

A vakcina által kiváltott antitesteket az immunizálás után 1 és 6 hónappal mérjük, és összehasonlítjuk a korábbi S. sonnei konjugált vakcináink által kiváltott antitestekkel.

Számos bizonyíték áll rendelkezésre arra vonatkozóan, hogy az LPS O-specifikus poliszacharid doménje elleni szérum IgG antitest kritikus szintje típusspecifikus immunitást biztosít a S. sonnei és más Shigella ellen:

1. A 4-6 hónapos korig terjedő csecsemőknél ritkán figyeltek meg Shigellosist. Ennek legnyilvánvalóbb magyarázata az, hogy az anyai eredetű szérum IgG biztosítja ezt az immunitást;
2. Az IgG anti-LPS antitestek életkorral összefüggő fejlődése zajlik, amelyet sok esetben nem a homológ baktériumok, hanem a nem patogén keresztreagáló enterális baktériumok indukálnak;
3. A legmagasabb incidencia, morbiditás és mortalitás a 6 hónapos és 6 éves kor között fordul elő, amikor az anyai eredetű szérum anti-O-SP csökkent, és a természetes eredetű antitestek még nem jelentek meg;
4. Egy S. sonnei-rEPA konjugátum egyik injekciója jelentős védelmet mutatott a shigellosis ellen az izraeli védelmi erők katonáiban. Azok a vakcinázottak, akiknél shigellózis alakult ki, szignifikánsan alacsonyabb szérum IgG választ mutattak a homológ LPS-re, mint azok, akiknél nem. A konjugált vakcina által kiváltott magas antitestszint pozitív korrelációt jelez a szérum IgG anti-LPS szintje és a S. sonnei fertőzés elleni immunitás között;
5. Az 1. és 2. fázisú vizsgálatokat követően, amelyek biztonságosságot és életkorral összefüggő immunogenitást mutattak ki, a S. sonnei és S. flexneri 2a típusú O-specifikus poliszacharid (O-SP) fehérjekonjugátumok kettős-vak, randomizált és vakcina-kontrollos fázisú 3 értékelését végezték el. 1-4 évesek körében végezték Izraelben.

Az S. sonnei konjugátumot kapók esetében 71,1%-os hatékonyságot mutattak ki a 3-4 éves recipienseknél, a S. flexneri 2a recipienseknél nem mutattak ki hatásosságot. Egyik vakcina esetében sem volt statisztikailag szignifikáns hatásosság az 1-3 éveseknél. A szérum IgG anti-O-SP szintje megemelkedett a gyermekek által kapott vakcinától függően, de a G.M. a szintek gyorsan csökkentek néhány hónappal az utolsó injekció után. Értelmezésünk szerint a Shigella konjugátumok életkorral összefüggő hatékonysága a konjugátum által kiváltott O-SP antitestszinteknek köszönhető. Ennek megfelelően kifejlesztettünk egy módszert a konjugátumok immunogenitásának növelésére, hogy megközelítse az izraeli katonák antitestszintjét, amelyet a mi S. sonnei O-SP-nk védett.

Alacsony molekulatömegű O-SP-core (O-SPC) fragmentumokat izoláltunk S. sonnei LPS-ből, és redukáló végükön keresztül a hordozófehérjéhez kötöttük. Az O-SPC konjugátumok az S. sonnei szacharidok redukáló végein lévő terminális Kdo-maradékok és a hordozóhoz kötött aminooxi-linkerek között oximkötéseket alkalmaztak. A kapcsolási reakciót semleges pH-n és szobahőmérsékleten hajtottuk végre. A hordozó fehérje egy mutáns, nem toxikus Clostridium difficile exotoxin B volt. Fiatal tenyésztett egerekben az új S. sonnei O-SPC konjugátum által indukált IgG antitestszintek szignifikánsan magasabbak voltak, mint az O-SP konjugátumok.