Konjugovaná vakcína Shigella Sonnel O-SPC/rBRU

Aktivní složkou této konjugované vakcíny Shigella sonnei O-SP-core je konjugát sacharid-protein složený z fragmentu S. sonnei LPS. Sacharidová složka sestává v průměru z 3,5 opakujících se jednotek O-SP plus oblasti jádra LPS (O-SPC). O-SPC je kovalentně vázán na rekombinantní netoxický exoprotein B Clostridium difficile.

Cílem této fáze studie je určit, zda je tato vakcína bezpečná a může u dospělých indukovat typově specifickou imunitu protilátek IgG proti shigelóze. Celkovým cílem je určit, zda tato vakcína může vyvolat vyšší hladiny IgG protilátek než předchozí experimentální vakcíny vyrobené s plnou délkou O-SP, u nichž se ukázalo, že jsou > 70 % účinné u dětí starších nebo rovných 3 letům, k vyvolání typu -specifická imunita vůči shigelóze u mladších dětí.

V Izraeli bude přijato 60 zdravých dospělých ve věku 18–49 let. Dobrovolníci budou namátkově očkováni jednou i.m. injekci 10 nebo 25 mikrogramů hodnocené konjugované vakcíny. Místní a systémové reakce budou pozorovány po 30 minutách a dobrovolníci budou instruováni, aby si změřili teplotu a prozkoumali místo vpichu na zarudnutí a otok a vyplnili dotazník v 6 hodin a denně po dobu 7 dnů po vakcinaci. Dobrovolníci navštíví kliniku 24 nebo 48 hodin po injekci a kdykoli o to požádají. Studie bude zahájena s 5 dobrovolníky, kterým byla injekčně podána dávka 10 ug, která bude následovat, pokud nedojde k závažným nežádoucím reakcím, 5 dobrovolníkům, kterým bude injekčně podána dávka 25 ug. Pokud se u 1 z 5 dobrovolníků v kterékoli skupině objeví závažná nežádoucí reakce, bude tato dávka injikována 5 dalším. Pokud se nevyskytnou žádné závažné nežádoucí reakce, studie bude pokračovat. Pokud dojde k jedné závažnější reakci, studie bude zastavena a přehodnocena IRB a FDA.

Protilátky vyvolané vakcínou budou měřeny 1 a 6 měsíců po imunizaci a porovnány s těmi, které byly vyvolány našimi předchozími konjugovanými vakcínami S. sonnei.

Existuje řada důkazů, že kritická hladina sérových IgG protilátek proti O-specifické polysacharidové doméně LPS propůjčuje typově specifickou imunitu S. sonnei i dalším Shigella:

1. Shigellóza je zřídka pozorována u kojenců do věku 4-6 měsíců. Nejzřejmějším vysvětlením je, že sérový IgG získaný z matky poskytuje tuto imunitu;
2. Existuje vývoj IgG anti-LPS protilátek související s věkem, který v mnoha případech není indukován homologními bakteriemi, ale nepatogenními zkříženě reagujícími střevními bakteriemi;
3. K nejvyšší incidenci, morbiditě a mortalitě dochází během 6 měsíců až 6 let věku, kdy anti-O-SP z mateřského séra ubylo a přirozeně se ještě neobjevily protilátky;
4. Jedna injekce konjugátu S. sonnei-rEPA ukázala významnou ochranu proti šigelóze u vojáků izraelských obranných sil. Vakcíny, u kterých se vyvinula shigelóza, vykazovaly významně nižší sérové ​​IgG odpovědi na homologní LPS než ty, které neměly. Vysoká hladina protilátek indukovaná konjugovanou vakcínou ukazuje na pozitivní korelaci mezi hladinami IgG anti-LPS v séru a imunitou vůči infekci S. sonnei;
5. Po studiích fáze 1 a fáze 2, které prokázaly bezpečnost a imunogenicitu související s věkem, bylo dvojitě zaslepené randomizované a vakcínou kontrolované hodnocení fáze 3 konjugátů O-specifických polysacharidů (O-SP) S. sonnei a S. flexneri typu 2a. prováděné mezi 1-4letými dětmi v Izraeli.

U příjemců konjugátu S. sonnei byla prokázána 71,1% účinnost u příjemců ve věku 3–4 let, u příjemců S. flexneri 2a nebyla prokázána žádná účinnost. Nebyla zjištěna statisticky významná účinnost ani u jedné vakcíny u dětí ve věku 1-3 let. Hladiny IgG anti-O-SP v séru byly zvýšeny podle vakcíny, kterou děti dostaly, ale G.M. hladiny rychle klesly několik měsíců po poslední injekci. Naše interpretace je, že účinnost konjugátů Shigella související s věkem byla způsobena hladinami protilátek O-SP vyvolaných konjugátem. V souladu s tím jsme vyvinuli metodu pro zvýšení imunogenicity konjugátů, aby se přiblížily hladinám protilátek izraelských vojáků, u kterých se ukázalo, že jsou chráněni naším S. sonnei O-SP.

Nízkomolekulární fragmenty jádra O-SP (O-SPC) byly izolovány z LPS S. sonnei a navázány svými redukujícími konci na nosný protein. O-SPC konjugáty používaly oximové vazby mezi koncovými Kdo zbytky na redukujících koncích sacharidů S. sonnei a aminooxy linkery navázanými na nosič. Spojovací reakce byla prováděna při neutrálním pH a teplotě místnosti. Nosným proteinem byl mutantní netoxický exotoxin B Clostridium difficile. Hladiny IgG protilátek indukované u mladých outbredních myší tímto novým O-SPC konjugátem S. sonnei byly významně vyšší než hladiny vyvolané O-SP konjugáty.