Szczepionka skoniugowana Shigella Sonnel O-SPC/rBRU

Substancją czynną tej skoniugowanej szczepionki Shigella sonnei O-SP-core jest koniugat sacharyd-białko składający się z fragmentu LPS S. sonnei. Składnik sacharydowy składa się średnio z 3,5 powtarzających się jednostek O-SP plus region rdzeniowy LPS (O-SPC). O-SPC jest kowalencyjnie związany z rekombinowaną, nietoksyczną egzoproteiną B Clostridium difficile.

Celem tej fazy badania jest ustalenie, czy ta szczepionka jest bezpieczna i czy może indukować swoistą dla typu przeciwciała IgG odporność na shigellozę u dorosłych. Ogólnym celem jest ustalenie, czy ta szczepionka może wywołać wyższy poziom przeciwciał IgG niż poprzednie szczepionki eksperymentalne wykonane z pełnej długości O-SP, które okazały się > 70% skuteczne u dzieci w wieku co najmniej 3 lat, w celu wywołania typu -specyficzna odporność na shigellozę u młodszych dzieci.

Sześćdziesięciu zdrowych dorosłych w wieku 18-49 lat zostanie zatrudnionych w Izraelu. Chętni zostaną zaszczepieni w sposób losowy jedną i.m. wstrzyknięcie 10 lub 25 mikrogramów badanej szczepionki skoniugowanej. Reakcje miejscowe i ogólnoustrojowe będą obserwowane po 30 minutach, a ochotnicy zostaną poinstruowani, aby zmierzyli sobie temperaturę i zbadali miejsce wstrzyknięcia pod kątem zaczerwienienia i obrzęku oraz wypełnili kwestionariusz o godzinie 6 i codziennie przez 7 dni po szczepieniu. Wolontariusze odwiedzą klinikę 24 lub 48 godzin po wstrzyknięciu i zawsze, gdy o to poproszą. Badanie rozpocznie się od 5 ochotników, którym wstrzyknie się dawkę 10 μg, a następnie, jeśli nie wystąpią żadne poważne działania niepożądane, 5 ochotników, którym wstrzyknie się dawkę 25 μg. Jeśli ciężka reakcja niepożądana wystąpi u 1 z 5 ochotników w którejkolwiek grupie, 5 kolejnych zostanie wstrzykniętych w tej dawce. Jeśli nie wystąpią żadne poważne działania niepożądane, badanie będzie kontynuowane. Jeśli wystąpi jeszcze jedna poważna reakcja, badanie zostanie wstrzymane i ponownie ocenione przez IRB i FDA.

Przeciwciała indukowane szczepionką będą mierzone po 1 i 6 miesiącach po immunizacji i porównywane z przeciwciałami wywołanymi przez nasze poprzednie skoniugowane szczepionki S. sonnei.

Istnieje wiele dowodów na to, że krytyczny poziom przeciwciał IgG w surowicy przeciwko domenie polisacharydowej specyficznej dla O LPS nadaje odporność specyficzną dla S. sonnei, jak również na inne Shigella:

1. Shigellozę rzadko obserwuje się u niemowląt do 4-6 miesiąca życia. Najbardziej oczywistym wyjaśnieniem tego jest to, że przeciwciała IgG pochodzące od matki zapewniają tę odporność;
2. Istnieje związany z wiekiem rozwój przeciwciał IgG anty-LPS, który w wielu przypadkach nie jest indukowany przez bakterie homologiczne, ale przez niepatogenne reagujące krzyżowo bakterie jelitowe;
3. Najwyższa zachorowalność, zachorowalność i śmiertelność występują w wieku od 6 miesięcy do 6 lat, kiedy poziom przeciwciał anty-O-SP pochodzących od matki zanikł, a przeciwciała pochodzenia naturalnego jeszcze się nie pojawiły;
4. Jedno wstrzyknięcie koniugatu S. sonnei-rEPA wykazało znaczną ochronę przed shigellozą u żołnierzy Sił Obronnych Izraela. Osoby zaszczepione, u których rozwinęła się shigelloza, wykazywały znacznie niższe odpowiedzi IgG w surowicy na homologiczny LPS niż osoby, które tego nie robiły. Wysoki poziom przeciwciał indukowany przez szczepionkę skoniugowaną wskazuje na dodatnią korelację między poziomami IgG anty-LPS w surowicy a odpornością na infekcję S. sonnei;
5. Po badaniach fazy 1 i fazy 2, które wykazały bezpieczeństwo i immunogenność związaną z wiekiem, podwójnie zaślepiona, randomizowana i kontrolowana szczepionką ocena koniugatów białka O-specyficznego polisacharydu (O-SP) S. sonnei i S. flexneri typu 2a została przeprowadzone wśród dzieci w wieku 1-4 lat w Izraelu.

Dla biorców koniugatu S. sonnei wykazano skuteczność 71,1% wśród 3-4-letnich biorców, brak skuteczności u biorców S. flexneri 2a. Nie stwierdzono statystycznie istotnej skuteczności żadnej ze szczepionek u dzieci w wieku 1-3 lat. Poziomy surowicy IgG anty-O-SP były podwyższone zgodnie ze szczepionką, którą otrzymały dzieci, ale G.M. poziom gwałtownie spadał kilka miesięcy po ostatnim wstrzyknięciu. Nasza interpretacja jest taka, że ​​związana z wiekiem skuteczność koniugatów Shigella wynikała z indukowanych przez koniugat poziomów przeciwciał O-SP. W związku z tym opracowaliśmy metodę zwiększania immunogenności koniugatów, aby zbliżyć się do poziomu przeciwciał izraelskich żołnierzy chronionych przez nasz S. sonnei O-SP.

Fragmenty rdzenia O-SP (O-SPC) o niskiej masie cząsteczkowej wyizolowano z LPS S. sonnei i związano ich końcami redukującymi z białkiem nośnikowym. Koniugaty O-SPC wykorzystywały wiązania oksymowe między końcowymi resztami Kdo na redukujących końcach sacharydów S. sonnei i linkerami aminooksy związanymi z nośnikiem. Reakcję sprzęgania prowadzono w obojętnym pH iw temperaturze pokojowej. Białkiem nośnikowym była zmutowana, nietoksyczna egzotoksyna B Clostridium difficile. Poziomy przeciwciał IgG indukowane u młodych niekrewnych myszy przez ten nowy koniugat O-SPC S. sonnei były znacząco wyższe niż te wywoływane przez koniugaty O-SP.