武装健康：可以通过上半身收缩活动来打破静坐时间来调节代谢健康。 (AYH)

- 熟悉筛选访问 -（访问 1）在参与研究之前，所有参与者将访问运动实验室进行熟悉和筛选访问，在那里他们将被带到指定的实验区域，提供书面知情同意书并进行各种测量。

所有参与者都必须从第一次访问前一天晚上 10 点开始禁食（允许饮用水）。 参与者将在抵达时获得标准化早餐（在获得同意后）。 这顿饭将根据体重开具处方，每公斤体重提供约 8 卡路里热量，由 13-14% 的蛋白质、51-52% 的碳水化合物和 35% 的脂肪组成。 这里使用的典型成分是；原味百吉饼加人造黄油和与全脂牛奶混合的蛋白粉。

将根据特殊饮食偏好（即 素食主义者）或食物过敏（即 乳糖不耐症）。

同样重要的是，参与者在第一次访问（和其余两次访问）之前的 48 小时（2 天）内避免一般运动和饮酒或咖啡，这将在参与者信息表中明确说明。 必须提前 72 小时（3 天）避免剧烈运动。

参与者将被要求记录第一次访问前一天消耗的所有食物和饮料。 然后他们将被要求在剩余访问的前一天使用他们的饮食记录来指导他们复制这种饮食。 因此，每次访问前的所有膳食都将标准化，不会混淆结果。

这次访问期间进行的测量包括：基础人体测量学（体重、腰围、体脂百分比）；血压;生化变量（HbA1c 和血脂和 CRP）；能量消耗（在静止状态下，在慢速稳态跑步机行走期间以及在手臂测力计机器上的多种强度下）；以及客观确定的自由生活体力活动、久坐行为和姿势的测量。

第 1 次访视时的人体测量学测量 将在坐位测量动脉血压。 将获得三个测量值，并将使用最后两个测量值的平均值。

体重和体脂百分比（通过生物阻抗分析测量）等基本人体测量指标将与身高和腰围（下肋缘和髂嵴之间的中点）一起测量。 这些将分别记录到最接近的 0.1kg、0.5%、0.5cm 和 0.5cm。

访问 1 时收集的生化变量 在访问 1 期间，将采集血液样本，从而测量 HbA1c（糖化血红蛋白）、CRP（C 反应蛋白）和脂质谱。 所有静脉穿刺将由经过培训的医疗保健专业人员进行，所有生化分析将在不了解治疗情况的情况下进行。 熟悉访问后，将向所有参与者发送一封强调其主要临床结果的个人结果信。 在参与者同意的情况下，所有结果将被复制到他们的 GP。 任何 Hba1c 为 6.5% 或以上的参与者都将收到一封单独的结果信，强烈建议他们尽快与他们的 GP 预约，以更详细地讨论他们的结果，因为这表明患有糖尿病。 同样，任何 HbA1c 介于 6% 和 6.4% 之间的参与者也将收到一封单独的结果信，建议他们在担心时与他们的 GP 预约，因为这表明处于糖尿病前期。 在参与者同意的情况下，GP也会被告知情况并发送结果信

访问 1 期间的能量消耗测试 在访问 1 期间，休息时的能量消耗，同时以 3 公里/小时的速度行走以及在不同强度下进行手臂测力计时，将通过使用 Cortex 或 GEM 逐次呼吸从参与者收集的呼吸气体来测量自动气体分析系统。

为了评估静息能量消耗，将要求每位参与者在戴着防毒面具/头罩的情况下静坐（不要移动）30 分钟。 一旦值稳定，将在这 30 分钟的后半段收集过期气体数据。

在此之后，将在跑步机上以 3km.hr 的速度步行 10 分钟（同时戴着防毒面具），在后 5 分钟内收集呼出气体数据。

然后将以 5 分钟的间隔（跨越许多强度）执行坐姿时的轻臂测力法，在第 2 分钟、第 3 分钟和第 4 分钟从中收集呼出气体数据，丢弃第一分钟和最后一分钟。 参与者还将在每 5 分钟的回合之间摘下面罩 5 分钟，以便让参与者恢复并使能量消耗输出恢复到下一次活动回合之前的休息水平。

因此，该数据将决定在休息时进行的手臂测功强度，因为研究人员希望这些坐着休息的能量消耗与轻步行的能量消耗非常相似。 这使得研究人员能够进一步阐明单独姿势的作用，因为能量消耗将与之前的研究保持相对一致，从而可以进行直接比较。

访问时身体活动的客观测量 1 将向参与者发放 Actigraph 加速度计，以测量在自由生活条件下久坐和中度至剧烈身体活动所花费的时间。 参与者将被要求在熟悉访问后佩戴此加速度计（放置在右前腋线上）7 天，最多 7 天导致治疗条件和整个实验条件，以监测身体活动水平的任何潜在变化并确保参与者在治疗前几天避免运动。 输出将包括每天的步数、全身运动（每天的计数）以及久坐、轻度、中度和高强度身体活动的时间，由 Freedson 等人提出的每分钟计数切点确定。 (21)

访问 1 时的姿势和久坐时间数据收集 姿势分配（坐和站）和步行将使用 activPAL 身体活动监测器（PAL Technologies，格拉斯哥，苏格兰）进行量化。 activPAL 是一种基于三轴加速度计的单体监测器，佩戴在大腿前面的中线，并使用医用敷料直接贴在皮肤上。 该监测器会产生与大腿倾斜相关的信号，并已被证明是一种有效且可靠的测量工具，可用于确定健康人群日常生活活动中的姿势 (22)。 该设备的输出包括；花在坐着、站着、走路和坐到站转换上的时间。 该设备将在熟悉访问后佩戴 7 天（与 Actigraph 一起）并贯穿整个实验条件。

- 实验治疗条件（第 2 次和第 3 次访问） 在初次熟悉访问后的几周内，参与者将被分配接受以下两种治疗条件（A：长时间坐着和 B：轻度手臂测力计休息）使用在线随机顺序随机化工具。 每种治疗条件将在一天内进行。 总的来说，该研究需要分别前往莱斯特糖尿病中心、莱斯特综合医院、莱斯特大学医院进行三次单独访问；熟悉访问，第一治疗条件和第二治疗条件。

在参与者机动交通工具有限的情况下，将提供出租车以减少每次访问往返途中涉及的走动活动。

对于男性参与者，每种治疗条件之间至少间隔 7 天。 对于女性，由于女性月经周期的不同阶段可能会影响她们对一餐的血糖反应，因此会有一个月（或尽可能接近）的间隔 (23)。 在一个月的相似时间进行测试可避免这种潜在的变化。 但是，如果女性参与者在其预筛查问卷中报告已绝经，则将在治疗条件之间至少间隔 7 天。

治疗条件A：长时间坐着在长时间坐着的情况下，参与者将被限制行走和站立。 他们将在配备椅子/桌子的指定房间内，全天都可以使用带互联网服务的电脑、书籍和杂志或电影。 允许上厕所休息，并使用轮椅将参与者推到厕所，以减少直立活动。

在每种治疗条件的前一天，参与者将被要求食用他们在熟悉访问之前记录的相同类型和数量的食物和饮料。 还将要求参与者在每次治疗前 2 天避免饮酒、咖啡因和中等强度的运动（如访问前所做的那样），因为可重复性数据表明在这些条件下胰岛素和甘油三酯对膳食摄入的反应良好（24 ). 此外，有证据表明单次锻炼对胰岛素敏感性和葡萄糖耐量的影响可能会持续长达 48 小时 (25)。 每次治疗前 3 天应避免剧烈运动，因为已发现这会增加胰岛素敏感性长达 72 小时 (26)。

从晚上 10 点开始，参与者将被要求在两种治疗条件（以及如前所述的熟悉之前）前一晚禁食。 在测试的早晨，参与者将由训练有素的医疗保健专业人员将插管插入可触及的静脉，并采集第一份血样（这代表时间点：-1 小时，根据图 1）。 将在每次采集血液样本之前立即进行血压测量，同时进行自我报告的积极情绪、情绪和嗜睡的测量（参见次要结果第 3.0 节中的描述）。 插管插入并采集第一份血样后，参与者将被要求静坐 60 分钟以达到稳定状态。 在此期间，参与者需要完成一系列持续约 25 分钟的认知功能测试（参见次要结果第 4.0 节的描述）。

在这 60 分钟后，参与者将进行另一次血压测量、积极情绪、情绪和嗜睡评估并采集血样，此时他们将获得标准化的混合早餐（09:00am）（时间点：0h ). 膳食将根据体重制定，每公斤体重提供约 8 卡路里热量，由 13-14% 的蛋白质、51-52% 的碳水化合物和 35% 的脂肪组成。 这种性质的混合餐将用于确保生态有效性，因为脂肪和碳水化合物通常在现实生活中被共同摄入。 早餐后 30、60、120 和 180 分钟将继续进行血液采样以及积极情绪、情绪、嗜睡和血压测量。 第二顿午餐（中午 12:00）（与早餐的营养成分相同）将在 15 分钟内食用。 午餐后 30、60、120 和 180 分钟将继续测量血压、积极情绪、情绪、困倦和采血（图 1）。 然后，参与者将在采集最终血样后重复进行一系列认知功能测试。 在整个测试期间，所有参与者都将保持坐姿，同时进行典型的久坐不动的活动，例如看电视/DVD/阅读。

治疗条件 B：轻度手臂测力法休息 这将与长时间坐着的情况（治疗 A）相同，但参与者将被要求通过坐着的上身收缩活动来打破他们宁静的坐着时间。 这将以早餐和午餐后每 30 分钟 5 分钟的手臂测力计休息的形式实施。 总共，个人将累积 12 次（60 分钟）光强度手臂测力计。

每 30 分钟进行 5 分钟的锻炼的主要原因是为了在频率和效用之间取得平衡，因为不得不经常中断坐着的时间在现实世界中的应用较少，尤其是在长时间坐着最为普遍的办公室环境中。 以前的研究也发现了以这种方式打断久坐时间的积极发现 (38)。

这些手臂测力计休息的强度（速度和阻力）将来自访问 1 中进行的能量消耗测试，因为研究人员旨在将手臂测力计的强度与 3 公里/小时的轻步行强度相匹配。