多菌株益生菌在儿童对牛奶或鸡蛋的食物过敏中的定植和持久能力。

本研究评估了三种益生菌（长双歧杆菌、短双歧杆菌和婴儿双歧杆菌）在牛奶和/或鸡蛋过敏儿童中的定植能力。

预计招募约 20 名年龄在 10 至 14 个月之间的鸡蛋和/或牛奶过敏患者，这些患者通过针对安慰剂的双盲口服耐受性试验得到证实（第 1 组）。

此外，将招募约 10 名对牛奶或鸡蛋敏感但未通过针对安慰剂的双盲口服耐受性试验确认的患者（第 2 组）和约 10 名健康个体（第 3 组）。

对于所有 40 名患者：

1. 将评估长双歧杆菌 BB536、短双歧杆菌 M-16V 和婴儿双歧杆菌 M-63 的基线存在；

   仅对于第 1 组儿童，还将评估：

2. 在施用含有长双歧杆菌 BB536、短双歧杆菌 M-16V 和婴儿双歧杆菌 M-63 的 3.5 x 109 UFC 的多菌株益生菌 30 天期间以及施用暂停后 60 天后相同菌株的存在。

B. breve、B. longum 亚种的定量。 longum 和 B. longum 亚种。 使用 Light Cycler 480 平台（Roche Diagnostics，Mannheim，Germany）通过 qRT-PCR 对粪便样本中的婴儿链球菌进行检测。 使用 20 µl PCR 扩增混合物进行测定，该混合物包含：10 µl LightCycler 480 Probe Master mix (Roche Diagnostics)、2 µl 引物和探针（优化浓度，分别为 0.5 µM 和 0.1 µM）、3 µl 分子级 H2O 和5 微升 DNA 模板。 每个样品一式两份进行测试以确保数据的可重复性。 RT-PCR 温度曲线包括 95°C 10 分钟的初始变性、95°C 10 秒、60°C 30 秒和 72°C 1 秒的 45 个扩增循环，然后是最后的冷却步骤40°C 30 秒。 使用“二阶导数最大值法”进行绝对量化

统计分析：Wilcoxon 符号秩检验用于比较时间过程中的益生菌物种浓度。