Monikannan probioottien kolonisaatio- ja pysyvyyskapasiteetti lasten ruoka-aineallergioissa maidolle tai munalle.

Tässä tutkimuksessa arvioidaan kolmen probiootin (Bifidobacterium longum, Bifidobacterium breve ja Bifidobacterium infantis) kolonisaatiokykyä maito- ja/tai munaallergisilla lapsilla.

On odotettavissa, että noin 20 muna- ja/tai maitoallergista potilasta, joiden ikä on 10–14 kuukautta, on varmistettu kaksoissokkoutetulla lumelääkettä vastaan ​​tehdyllä toleranssitestillä (ryhmä 1).

Lisäksi rekrytoidaan noin 10 potilasta, jotka ovat herkkiä maidolle tai kananmunalle, mutta joita ei ole vahvistettu kaksoissokkoutetulla oraalisen toleranssitestillä lumelääkettä vastaan ​​(ryhmä 2), ja noin 10 tervettä henkilöä (ryhmä 3).

Kaikille 40 potilaalle:

1. Bifidobacterium longum BB536:n, Bifidobacterium breve M-16V:n ja Bifidobacterium infantis M-63:n esiintyminen lähtötilanteessa arvioidaan;

   Vain ryhmän 1 lapsille arvioidaan myös:

2. Samojen kantojen läsnäolo 30 päivän ajan annettaessa monikantaisia ​​probiootteja, jotka sisälsivät 3,5 x 109 UFC:tä Bifidobacterium longum BB536:sta, Bifidobacterium breve M-16V:stä ja Bifidobacterium infantis M-63:sta ja 60 päivän kuluttua annon keskeyttämisestä.

B. breven, B. longum subsp. longum ja B. longum subsp. infantis ulostenäytteissä suoritettiin qRT-PCR:llä käyttäen Light Cycler 480 -alustaa (Roche Diagnostics, Mannheim, Saksa). Määritykset suoritettiin 20 µl:n PCR-amplifikaatioseoksella, joka sisälsi: 10 µl LightCycler 480 Probe Master -seosta (Roche Diagnostics), 2 µl alukkeita ja koettimia (optimoidut pitoisuudet, 0,5 µM ja 0,1 µM, vastaavasti), 3 µl H2O-gradea ja 0,1 µM. 5 µl DNA-templaattia. Jokainen näyte testattiin kahtena kappaleena tietojen toistettavuuden varmistamiseksi. RT-PCR-lämpötilaprofiili koostui ensimmäisestä denaturaatiosta 95 °C:ssa 10 minuutin ajan, 45 amplifikaatiosyklistä 95 °C:ssa 10 sekuntia, 60 °C:ssa 30 sekuntia ja 72 °C:ssa 1 sekunnin ajan, mitä seurasi viimeinen jäähdytysvaihe 40°C 30 sekunnin ajan. Absoluuttinen kvantifiointi suoritettiin käyttämällä "toisen derivaatan maksimimenetelmää"

Tilastolliset analyysit: Wilcoxon signed-rank -testiä käytettiin vertailemaan probioottisten lajien pitoisuuksia ajan kuluessa.