Tato stránka byla automaticky přeložena a přesnost překladu není zaručena. Podívejte se prosím na anglická verze pro zdrojový text.

Identifikace hostitelských faktorů norovirových infekcí v modelu Mini-Gut

19. září 2018 aktualizováno: CHAN CHI WAI, Chinese University of Hong Kong

Skríning CRISPR pro celý genom pro hostitelské faktory spojené s norovirovými infekcemi v modelu lidského střevního enteroidu odvozeného z kmenových buněk

Primárním cílem této studie je sestavit seznam hostitelských buněčných proteinů, které zprostředkovávají norovirovou infekci.

Norovirus je jedním z nejčastějších patogenů připisovaných průjmovým onemocněním z nebezpečných potravin. Je také hlavní příčinou úmrtnosti malých dětí a dospělých na infekce přenášené potravinami. Norovirus není jen potravinová zátěž. V nedávné metaanalýze představuje norovirus téměř jednu pětinu všech příčin (včetně přenosu z člověka na člověka) akutní gastroenteritidy ve sporadických i ohniskových situacích a postihuje všechny věkové skupiny. Norovirus je nepochybně hlavním problémem veřejného zdraví v rozvinutých i rozvojových zemích. Pro cílenou intervenci bude nutné výzkumné úsilí k lepšímu pochopení patobiologie noroviru.

Od koronaviru respiračního syndromu na Středním východě po virus Zika bylo vždy prioritou výzkumu úsilí o identifikaci hostitelských faktorů důležitých pro zprostředkování virové infekce. Takové informace vrhnou světlo na potenciální terapeutické cíle při antivirové intervenci. Studie interakce mezi virem a hostitelem noroviru byly v posledních 20 letech ztíženy nedostatkem robustního modelu buněčné kultury. V roce 2016 byl norovirus konečně úspěšně kultivován v trojrozměrné struktuře podobné lidskému střevu odvozené z kmenových buněk, která se nazývá enteroid nebo mini-gut.

V této studii budou střevní kmenové buňky izolovány z duodenálních biopsií odebraných od účastníků, po kterých bude následovat diferenciace do ministřev. Genomový genetický screening esenciálních a restriktivních faktorů hostitele bude proveden na infikovaných mini-střevech pomocí knockout CRISPR a gain-of-function CRISPR SAM, v daném pořadí. Kandidáti z užšího výběru podstoupí předběžnou funkční validaci v buněčných liniích. Tato data poskytnou náhled na potenciální terapeutické cíle proti norovirové infekci.

Přehled studie

Postavení

Postavení

Označuje aktuální stav náboru nebo stav rozšířeného přístupu.
Neznámý

Podmínky

Podmínky

Nemoc, porucha, syndrom, nemoc nebo zranění, které je studováno. Na webu ClinicalTrials.gov mohou podmínky zahrnovat i další problémy související se zdravím, jako je délka života, kvalita života a zdravotní rizika.

Intervence / Léčba

Intervence / Léčba

Proces nebo akce, na které se klinická studie zaměřuje. Intervence zahrnují léky, zdravotnická zařízení, postupy, vakcíny a další produkty, které jsou buď zkoušené nebo již dostupné. Intervence mohou také zahrnovat neinvazivní přístupy, jako je edukace nebo úprava stravy a cvičení.

Detailní popis

Návrh a přehled studie – Toto je laboratorní studie. Vyšetřovatelé plánují sestavit seznam hostitelských buněčných proteinů regulujících norovirovou infekci. Metody budou zahrnovat vytvoření lidských střevních enteroidů pocházejících z kmenových buněk specifických pro pacienta jako infekčního modelu a genetické screeningy CRISPR a CRISPR SAM pro celý genom po infekcích dvou genotypů noroviru.

***Vytvoření modelu enteroidních střev u člověka***

  1. Biopsie duodena a odběr slin – Po získání informovaného souhlasu schváleného IRB budou od každého účastníka podstupujícího endoskopii horní části gastrointestinálního traktu odebrány dva vzorky biopsie duodena bez kontraindikací pro odběr biopsie, jako jsou účastníci na antikoagulaci nebo s jinými příčinami krvácivé diatézy. Bioptické vzorky budou ponořeny do ledově vychlazeného 1xPBS a do 30 minut ihned transportovány do laboratoře k dalšímu zpracování. Kromě toho budou od každého účastníka odebrány sliny (1-2 ml) pro testování stavu sekrece pomocí ELISA.
  2. Izolace kmenových buněk krypt a diferenciace - Po příjezdu budou vzorky biopsie nejprve nasekány na menší kousky. Buňky střevních krypt budou izolovány opakovaným promytím a inkubací s 1x kompletním chelatačním roztokem (1xCCS) a EDTA pufrem. Supernatant obsahující buňky krypt pak bude pěstován v Matrigelu obsahujícím kompletní médium s růstovými faktory (CMGF+) (kondicionované médium Wnt 3 a Rspo-1, Noggin, A83, B27, EGF, N2, n-acetylcystein, gastrin, nikotinamid a SB202190) . Pučící krypty pak budou inkubovány v diferenciačním médiu (CMGF+, s výjimkou Wnt 3 kondicionovaného média, SB202190 a nikotinamidu, stejně jako se sníženým množstvím Rspo-1 kondicionovaného média a Nogginu). Tvorba trojrozměrných střevních enteroidů bude sledována denně.

Typ studie

Typ studie

Popisuje povahu klinické studie. Typy studií zahrnují intervenční studie (také nazývané klinické studie), observační studie (včetně registrů pacientů) a rozšířený přístup.
Intervenční

Zápis (Očekávaný)

Zápis

Počet účastníků klinické studie. „Očekávaný“ zápis je cílový počet účastníků, které výzkumníci pro studii potřebují.
20

Fáze

Fáze

Fáze klinické studie studující lék nebo biologický produkt na základě definic vyvinutých americkým Úřadem pro kontrolu potravin a léčiv (FDA). Fáze je založena na cíli studie, počtu účastníků a dalších charakteristikách. Existuje pět fází: časná fáze 1 (dříve uváděná jako fáze 0), fáze 1, fáze 2, fáze 3 a fáze 4. Nepoužitelný se používá k popisu zkoušek bez fází definovaných FDA, včetně zkoušek zařízení nebo behaviorálních intervencí.
  • Nelze použít

Kontakty a umístění

Tato část poskytuje kontaktní údaje pro ty, kteří studii provádějí, a informace o tom, kde se tato studie provádí.

Studijní kontakt

Studijní kontakt

Jméno a kontaktní údaje osoby, která může odpovědět na otázky týkající se registrace do klinické studie. Každé místo, kde se studie provádí, může mít také konkrétní kontakt, který může lépe odpovědět na tyto otázky.

Studijní místa

  • Čína
      • Hong Kong, Čína
        • Nábor
        • Endoscopy Centre, Prince of Wales Hospital
        • Kontakt:
        • Vrchní vyšetřovatel:
          • Chi-Wai Chan, PhD
        • Dílčí vyšetřovatel:
          • Kay-Sheung Chan, MD
        • Dílčí vyšetřovatel:
          • Hei Wong, MBChB; DPhil

Kritéria účasti

Výzkumníci hledají lidi, kteří odpovídají určitému popisu, kterému se říká kritéria způsobilosti. Některé příklady těchto kritérií jsou celkový zdravotní stav osoby nebo předchozí léčba.

Kritéria způsobilosti

Kritéria způsobilosti

Klíčové požadavky, které musí lidé, kteří se chtějí zúčastnit klinické studie, splňovat nebo vlastnosti, které musí mít. Kritéria způsobilosti se skládají jak z kritérií pro zařazení (která jsou vyžadována pro účast osoby ve studii), tak z kritérií vyloučení (která brání osobě v účasti). Typy kritérií způsobilosti zahrnují, zda studie přijímá zdravé dobrovolníky, má požadavky na věk nebo věkovou skupinu nebo je omezena pohlavím.

Věk způsobilý ke studiu

18 let a starší (DOSPĚLÝ, OLDER_ADULT)

Přijímá zdravé dobrovolníky

Ano

Pohlaví způsobilá ke studiu

Všechno

Popis

Kritéria pro zařazení:

  • Dospělí ve věku 18 let nebo starší
  • Potenciální ambulantní pacienti podstupující gastrointestinální endoskopii pro příznaky dyspepsie na endoskopické jednotce nemocnice Prince of Wales, Shatin, Hong Kong, Čína
  • Schopný a ochotný poskytnout informovaný písemný souhlas

Kritéria vyloučení:

  • Užívání antikoagulancií a/nebo aspirinu, které mohou zvýšit riziko krvácení
  • Krvácející diatéza v anamnéze
  • Kontraindikace odběru biopsie

Studijní plán

Tato část poskytuje podrobnosti o studijním plánu, včetně toho, jak je studie navržena a co studie měří.

Jak je studie koncipována?

Detaily designu

  • Primární účel: ZÁKLADNÍ_VĚDA
  • Přidělení: NA
  • Intervenční model: SINGLE_GROUP
  • Maskování: ŽÁDNÝ

Zbraně a zásahy

Skupina účastníků / Arm

Skupina účastníků / Arm

Skupina nebo podskupina účastníků klinické studie, která podle protokolu studie dostává konkrétní intervenci/léčbu nebo žádnou intervenci.
Intervence / Léčba

Intervence / Léčba

Proces nebo akce, na které se klinická studie zaměřuje. Intervence zahrnují léky, zdravotnická zařízení, postupy, vakcíny a další produkty, které jsou buď zkoušené nebo již dostupné. Intervence mohou také zahrnovat neinvazivní přístupy, jako je edukace nebo úprava stravy a cvičení.
Experimentální: Enteroidy odvozené ze střevních kmenových buněk
Vzorky duodenální biopsie a sliny budou odebrány účastníkům a poté zpracovány v laboratoři, aby se vytvořily enteroidy odvozené ze střevních kmenových buněk.
Postup: Duodenální biopsie
Od každého účastníka budou odebrány dva vzorky duodenální biopsie
Postup: Sliny
Každému účastníkovi budou odebrány sliny (1-2 ml) pro testování stavu sekrece

Co je měření studie?

Primární výstupní opatření

Primární výstupní opatření

V protokolu klinické studie je plánovaná výsledná míra, která je nejdůležitější pro hodnocení účinku intervence/léčby. Většina klinických studií má jedno primární měřítko výsledku, ale některé mají více než jedno.
Měření výsledku
Popis opatření
Časové okno
Vytvoření enteroidů pocházejících z lidských střevních kmenových buněk
Časové okno: V průměru tři měsíce
Životaschopnost enteroidů stanovená mikroskopicky
V průměru tři měsíce

Spolupracovníci a vyšetřovatelé

Zde najdete lidi a organizace zapojené do této studie.

Sponzor

Sponzor

Organizace nebo osoba, která iniciuje studii a která má autoritu a kontrolu nad studií.
Chinese University of Hong Kong

Vyšetřovatelé

Vyšetřovatelé

Výzkumník zapojený do klinické studie. Související pojmy zahrnují hlavní řešitel, dílčí řešitel, vedoucí studie, vedoucí studie a hlavní řešitel studie.
  • Vrchní vyšetřovatel: Chi-Wai Chan, PhD, Chinese University of Hong Kong

Termíny studijních záznamů

Tato data sledují průběh záznamů studie a předkládání souhrnných výsledků na ClinicalTrials.gov. Záznamy ze studií a hlášené výsledky jsou před zveřejněním na veřejné webové stránce přezkoumány Národní lékařskou knihovnou (NLM), aby se ujistily, že splňují specifické standardy kontroly kvality.

Hlavní termíny studia

Začátek studia (Aktuální)

Začátek studia

Skutečné datum, kdy byl první účastník zařazen do klinické studie. „Očekávané“ datum zahájení studie je datum, o kterém si vědci myslí, že bude datem zahájení studie.
18. dubna 2018

Primární dokončení (Očekávaný)

Primární dokončení

Datum, kdy byl poslední účastník klinické studie vyšetřen nebo obdržel intervenci ke sběru konečných dat pro primární měření výsledku. Zda byla klinická studie ukončena podle protokolu nebo byla ukončena, toto datum neovlivňuje. U klinických studií s více než jedním primárním výstupním měřením s různými daty dokončení se tento termín vztahuje k datu, kdy je dokončen sběr dat pro všechna primární výsledná měření. „Očekávané“ datum primárního dokončení je datum, o kterém si vědci myslí, že bude primárním datem dokončení studie.
31. prosince 2020

Dokončení studie (Očekávaný)

Dokončení studie

Datum, kdy byl poslední účastník klinické studie vyšetřen nebo dostal intervenci/léčbu za účelem shromáždění konečných dat pro měření primárního výsledku, sekundárního měření výsledku a nežádoucí příhody (tj. poslední návštěva posledního účastníka). „Očekávané“ datum dokončení studie je datum, o kterém si vědci myslí, že bude datem dokončení studie.
31. prosince 2020

Termíny zápisu do studia

První předloženo

První předloženo

Datum, kdy zadavatel studie nebo zkoušející poprvé předložil záznam studie na ClinicalTrials.gov. Mezi prvním odeslaným datem a dostupností záznamu na ClinicalTrials.gov (první zveřejněné datum) je obvykle několik dní.
9. listopadu 2017

První předloženo, které splnilo kritéria kontroly kvality

První předloženo, které splnilo kritéria kontroly kvality

Datum, kdy zadavatel studie nebo zkoušející poprvé předloží záznam studie, který je v souladu s kritérii kontroly kvality (QC) Národní lékařské knihovny (NLM). Sponzor nebo zkoušející může potřebovat revidovat a předložit záznam studie jednou nebo vícekrát, než budou splněna kritéria kontroly kontroly kvality NLM. Je odpovědností sponzora nebo zkoušejícího zajistit, aby byl záznam studie v souladu s kritérii kontroly kontroly kvality NLM.
13. listopadu 2017

První zveřejněno (Aktuální)

První zveřejněno

Datum, kdy byl záznam studie poprvé k dispozici na webu ClinicalTrials.gov poté, co byla dokončena kontrola kontroly kvality (QC) National Library of Medicine (NLM). Mezi datem, kdy zadavatel studie nebo zkoušející předložil záznam studie, a prvním zveřejněným datem je typicky několik dní zpoždění.
17. listopadu 2017

Aktualizace studijních záznamů

Poslední zveřejněná aktualizace (Aktuální)

Poslední zveřejněná aktualizace

Nejnovější datum, kdy byly změny záznamu studie zpřístupněny na ClinicalTrials.gov. Mezi okamžikem, kdy byly změny odeslány na ClinicalTrials.gov sponzorem nebo zkoušejícím studie (datum poslední předložení aktualizace), a datem zveřejnění poslední aktualizace může nastat zpoždění.
20. září 2018

Odeslaná poslední aktualizace, která splnila kritéria kontroly kvality

Odeslaná poslední aktualizace, která splnila kritéria kontroly kvality

Nejnovější datum, kdy zadavatel studie nebo zkoušející předložil změny záznamu studie, které jsou v souladu s kritérii kontroly kvality (QC) National Library of Medicine (NLM). Je odpovědností sponzora nebo zkoušejícího zajistit, aby byl záznam studie v souladu s kritérii kontroly kontroly kvality NLM.
19. září 2018

Naposledy ověřeno

Naposledy ověřeno

Nejnovější datum, kdy zadavatel studie nebo zkoušející potvrdil informace o klinické studii na webu ClinicalTrials.gov jako přesné a aktuální. Pokud jde o studii s náborovým statusem náboru; ještě nenabírá nábor; nebo aktivní, nebyl nábor potvrzen během posledních 2 let, status náboru studie je uveden jako neznámý.
1. září 2018

Více informací

Termíny související s touto studií

Klíčová slova

Další relevantní podmínky MeSH

Další identifikační čísla studie

Další identifikační čísla studie

Identifikátory nebo ID čísla jiná než číslo NCT, které klinické studii přiděluje zadavatel studie, financující subjekty nebo jiní. Tato čísla mohou zahrnovat jedinečné identifikátory z jiných registrů studií a čísla grantů National Institutes of Health.
  • MIC_CHAN_GRF_17_18_v1_20160930

Plán pro data jednotlivých účastníků (IPD)

Plánujete sdílet data jednotlivých účastníků (IPD)?

NEROZHODNÝ

Informace o lécích a zařízeních, studijní dokumenty

Studuje lékový produkt regulovaný americkým FDA

Ne

Studuje produkt zařízení regulovaný americkým úřadem FDA

Ne

Tyto informace byly beze změn načteny přímo z webu clinicaltrials.gov. Máte-li jakékoli požadavky na změnu, odstranění nebo aktualizaci podrobností studie, kontaktujte prosím register@clinicaltrials.gov. Jakmile bude změna implementována na clinicaltrials.gov, bude automaticky aktualizována i na našem webu .

Nastavení souborů cookie

Používáme cookies, abychom zajistili, že vám poskytneme nejlepší zážitek z našich webových stránek. Pro více informací si pečlivě přečtěte naše Zásady ochrany osobních údajů a cookies. ...>>>Svou preference můžete kdykoli změnit nebo svůj souhlas odvolat odstraněním cookies z vašeho webu nebo počítače, jak je popsáno v zásadách. Přijměte to a vyberte své předvolby zaškrtnutím příslušných polí v části „Správa nastavení“ níže. Než budete pokračovat v používání jakékoli části tohoto webu, pozorně si prosím přečtěte naše Podmínky služby.
«Spravovat nastavení