Tato stránka byla automaticky přeložena a přesnost překladu není zaručena. Podívejte se prosím na anglická verze pro zdrojový text.

Identifikace hostitelských faktorů norovirových infekcí v modelu Mini-Gut

19. září 2018 aktualizováno: CHAN CHI WAI, Chinese University of Hong Kong

Skríning CRISPR pro celý genom pro hostitelské faktory spojené s norovirovými infekcemi v modelu lidského střevního enteroidu odvozeného z kmenových buněk

Primárním cílem této studie je sestavit seznam hostitelských buněčných proteinů, které zprostředkovávají norovirovou infekci.

Norovirus je jedním z nejčastějších patogenů připisovaných průjmovým onemocněním z nebezpečných potravin. Je také hlavní příčinou úmrtnosti malých dětí a dospělých na infekce přenášené potravinami. Norovirus není jen potravinová zátěž. V nedávné metaanalýze představuje norovirus téměř jednu pětinu všech příčin (včetně přenosu z člověka na člověka) akutní gastroenteritidy ve sporadických i ohniskových situacích a postihuje všechny věkové skupiny. Norovirus je nepochybně hlavním problémem veřejného zdraví v rozvinutých i rozvojových zemích. Pro cílenou intervenci bude nutné výzkumné úsilí k lepšímu pochopení patobiologie noroviru.

Od koronaviru respiračního syndromu na Středním východě po virus Zika bylo vždy prioritou výzkumu úsilí o identifikaci hostitelských faktorů důležitých pro zprostředkování virové infekce. Takové informace vrhnou světlo na potenciální terapeutické cíle při antivirové intervenci. Studie interakce mezi virem a hostitelem noroviru byly v posledních 20 letech ztíženy nedostatkem robustního modelu buněčné kultury. V roce 2016 byl norovirus konečně úspěšně kultivován v trojrozměrné struktuře podobné lidskému střevu odvozené z kmenových buněk, která se nazývá enteroid nebo mini-gut.

V této studii budou střevní kmenové buňky izolovány z duodenálních biopsií odebraných od účastníků, po kterých bude následovat diferenciace do ministřev. Genomový genetický screening esenciálních a restriktivních faktorů hostitele bude proveden na infikovaných mini-střevech pomocí knockout CRISPR a gain-of-function CRISPR SAM, v daném pořadí. Kandidáti z užšího výběru podstoupí předběžnou funkční validaci v buněčných liniích. Tato data poskytnou náhled na potenciální terapeutické cíle proti norovirové infekci.

Přehled studie

Postavení

Neznámý

Podmínky

Intervence / Léčba

Detailní popis

Návrh a přehled studie – Toto je laboratorní studie. Vyšetřovatelé plánují sestavit seznam hostitelských buněčných proteinů regulujících norovirovou infekci. Metody budou zahrnovat vytvoření lidských střevních enteroidů pocházejících z kmenových buněk specifických pro pacienta jako infekčního modelu a genetické screeningy CRISPR a CRISPR SAM pro celý genom po infekcích dvou genotypů noroviru.

***Vytvoření modelu enteroidních střev u člověka***

  1. Biopsie duodena a odběr slin – Po získání informovaného souhlasu schváleného IRB budou od každého účastníka podstupujícího endoskopii horní části gastrointestinálního traktu odebrány dva vzorky biopsie duodena bez kontraindikací pro odběr biopsie, jako jsou účastníci na antikoagulaci nebo s jinými příčinami krvácivé diatézy. Bioptické vzorky budou ponořeny do ledově vychlazeného 1xPBS a do 30 minut ihned transportovány do laboratoře k dalšímu zpracování. Kromě toho budou od každého účastníka odebrány sliny (1-2 ml) pro testování stavu sekrece pomocí ELISA.
  2. Izolace kmenových buněk krypt a diferenciace - Po příjezdu budou vzorky biopsie nejprve nasekány na menší kousky. Buňky střevních krypt budou izolovány opakovaným promytím a inkubací s 1x kompletním chelatačním roztokem (1xCCS) a EDTA pufrem. Supernatant obsahující buňky krypt pak bude pěstován v Matrigelu obsahujícím kompletní médium s růstovými faktory (CMGF+) (kondicionované médium Wnt 3 a Rspo-1, Noggin, A83, B27, EGF, N2, n-acetylcystein, gastrin, nikotinamid a SB202190) . Pučící krypty pak budou inkubovány v diferenciačním médiu (CMGF+, s výjimkou Wnt 3 kondicionovaného média, SB202190 a nikotinamidu, stejně jako se sníženým množstvím Rspo-1 kondicionovaného média a Nogginu). Tvorba trojrozměrných střevních enteroidů bude sledována denně.

Typ studie

Intervenční

Zápis (Očekávaný)

20

Fáze

  • Nelze použít

Kontakty a umístění

Tato část poskytuje kontaktní údaje pro ty, kteří studii provádějí, a informace o tom, kde se tato studie provádí.

Studijní místa

  • Čína
      • Hong Kong, Čína
        • Nábor
        • Endoscopy Centre, Prince of Wales Hospital
        • Kontakt:
        • Vrchní vyšetřovatel:
          • Chi-Wai Chan, PhD
        • Dílčí vyšetřovatel:
          • Kay-Sheung Chan, MD
        • Dílčí vyšetřovatel:
          • Hei Wong, MBChB; DPhil

Kritéria účasti

Výzkumníci hledají lidi, kteří odpovídají určitému popisu, kterému se říká kritéria způsobilosti. Některé příklady těchto kritérií jsou celkový zdravotní stav osoby nebo předchozí léčba.

Kritéria způsobilosti

Věk způsobilý ke studiu

18 let a starší (DOSPĚLÝ, OLDER_ADULT)

Přijímá zdravé dobrovolníky

Ano

Pohlaví způsobilá ke studiu

Všechno

Popis

Kritéria pro zařazení:

  • Dospělí ve věku 18 let nebo starší
  • Potenciální ambulantní pacienti podstupující gastrointestinální endoskopii pro příznaky dyspepsie na endoskopické jednotce nemocnice Prince of Wales, Shatin, Hong Kong, Čína
  • Schopný a ochotný poskytnout informovaný písemný souhlas

Kritéria vyloučení:

  • Užívání antikoagulancií a/nebo aspirinu, které mohou zvýšit riziko krvácení
  • Krvácející diatéza v anamnéze
  • Kontraindikace odběru biopsie

Studijní plán

Tato část poskytuje podrobnosti o studijním plánu, včetně toho, jak je studie navržena a co studie měří.

Jak je studie koncipována?

Detaily designu

  • Primární účel: ZÁKLADNÍ_VĚDA
  • Přidělení: NA
  • Intervenční model: SINGLE_GROUP
  • Maskování: ŽÁDNÝ

Zbraně a zásahy

Skupina účastníků / Arm
Intervence / Léčba
Experimentální: Enteroidy odvozené ze střevních kmenových buněk
Vzorky duodenální biopsie a sliny budou odebrány účastníkům a poté zpracovány v laboratoři, aby se vytvořily enteroidy odvozené ze střevních kmenových buněk.
Postup: Duodenální biopsie
Od každého účastníka budou odebrány dva vzorky duodenální biopsie
Postup: Sliny
Každému účastníkovi budou odebrány sliny (1-2 ml) pro testování stavu sekrece

Co je měření studie?

Primární výstupní opatření

Měření výsledku
Popis opatření
Časové okno
Vytvoření enteroidů pocházejících z lidských střevních kmenových buněk
Časové okno: V průměru tři měsíce
Životaschopnost enteroidů stanovená mikroskopicky
V průměru tři měsíce

Spolupracovníci a vyšetřovatelé

Zde najdete lidi a organizace zapojené do této studie.

Sponzor

Chinese University of Hong Kong

Vyšetřovatelé

  • Vrchní vyšetřovatel: Chi-Wai Chan, PhD, Chinese University of Hong Kong

Termíny studijních záznamů

Tato data sledují průběh záznamů studie a předkládání souhrnných výsledků na ClinicalTrials.gov. Záznamy ze studií a hlášené výsledky jsou před zveřejněním na veřejné webové stránce přezkoumány Národní lékařskou knihovnou (NLM), aby se ujistily, že splňují specifické standardy kontroly kvality.

Hlavní termíny studia

Začátek studia (Aktuální)

18. dubna 2018

Primární dokončení (Očekávaný)

31. prosince 2020

Dokončení studie (Očekávaný)

31. prosince 2020

Termíny zápisu do studia

První předloženo

9. listopadu 2017

První předloženo, které splnilo kritéria kontroly kvality

13. listopadu 2017

První zveřejněno (Aktuální)

17. listopadu 2017

Aktualizace studijních záznamů

Poslední zveřejněná aktualizace (Aktuální)

20. září 2018

Odeslaná poslední aktualizace, která splnila kritéria kontroly kvality

19. září 2018

Naposledy ověřeno

1. září 2018

Více informací

Termíny související s touto studií

Klíčová slova

Další relevantní podmínky MeSH

Další identifikační čísla studie

  • MIC_CHAN_GRF_17_18_v1_20160930

Plán pro data jednotlivých účastníků (IPD)

Plánujete sdílet data jednotlivých účastníků (IPD)?

NEROZHODNÝ

Informace o lécích a zařízeních, studijní dokumenty

Studuje lékový produkt regulovaný americkým FDA

Ne

Studuje produkt zařízení regulovaný americkým úřadem FDA

Ne

Tyto informace byly beze změn načteny přímo z webu clinicaltrials.gov. Máte-li jakékoli požadavky na změnu, odstranění nebo aktualizaci podrobností studie, kontaktujte prosím register@clinicaltrials.gov. Jakmile bude změna implementována na clinicaltrials.gov, bude automaticky aktualizována i na našem webu .

Klinické studie na Gastrointestinální infekce

Klinické studie na Duodenální biopsie

Prohledejte podobné pokusy

Sponzoři a spolupracovníci

Zdravotní podmínky

Drogové intervence

CROs by country

CROs in Bahamas

Podmínky

Vzácné nemoci

Drogové intervence

Doplňky stravy

Sponzor / Spolupracovníci

Místa

Předplatit