Zrychlené stárnutí, infekce HIV, antiretrovirové terapie (EP 45)

Inhibitory proteázy blokují virovou proteázu, stejně jako různé další buněčné enzymy: ZMPSTE24 odštěpuje prelamin A na zralý lamin A; alespoň jedna z Golgiho proteáz zapojených do uvolňování SREBP, řídící transkripci genů regulujících metabolismus lipidů; mitochondriální proteázy zapojené do importu a dalšího zrání proteinů kódovaných jaderným genomem; proteazom regulující transkripci několika genů prostřednictvím NF-B; cytochromy P450. Nukleosidové inhibitory virové reverzní transkriptázy vykazují toxicitu pro jadernou a mitochondriální DNA, narušují glykosylaci lipidů a proteinů a inhibují telomerázu. Antiretrovirové terapie se proto zaměřují na několik cest podílejících se na zrychleném nebo normálním stárnutí. Jejich kombinované účinky se přidávají k přímým symptomům virové infekce nebo k buněčným abnormalitám vyvolaným virovými proteiny.

Naše multicentrická (3 CISIH z Marseille, Nice a Montpellier) 3letá studie bude analyzovat 50 naivních pacientů infikovaných HIV1 (skupina A), přiřazených k 50 séronegativním kontrolním subjektům stejného věku a pohlaví (naverbováno CIC-UPCET z Marseille) a 100 pacientů infikovaných HIV1 v první linii antiretrovirové terapie po dobu nejméně 12 měsíců (skupina B). Pacienti skupiny A a B budou zařazeni do 3 klinické jednotky. Pacienti infikovaní HIV1 budou hodnoceni čtyřikrát, na začátku studie, poté každých 12 měsíců po dobu 3 let. V případě zahájení nebo změny antiretrovirové terapie budou pacienti ještě jednou vyšetřeni. Kontrolní subjekty budou hodnoceny pouze na začátku.

Biologické testy periferní krve budou následující [označení laboratoře]: i/ měření virové zátěže, izolace PBMC, extrakce DNA, měření provirové DNA, skladování buněk a DNA [Virologie, Timone CHU, Marseille]; ii/ testy CD4, CD8, glykémie, inzulinémie, HOMA, celkového-, LDL- a HDL-cholesterolu, triglyceridů [Biochemistry labs od 3 CHU]; iii/ test antiretrovirových léčiv (hmotnostní spektrometrie) [Farmakokinetika, Timone CHU, Marseille]; iv/ detekce (western blotting, imunocytochemie kombinovaná s analýzou obrazu jaderných abnormalit) jaderných, cytosolických a mitochondriálních cílů antiretrovirových léků PBMC: laminy A a B, NF-B + I-B a test aktivity proteazomu, CD36 (glykosylace), mitochondriální Hsp70 , mitochondriální produkce ROS, potenciál vnitřní membrány mitochondrií, podjednotky 2 a 4 oxidázy cytochromu C [Cell Biology, Timone CHU, Marseille]; v/ genotypizace antiretrovirových cílů: proteázy zpracovávající lamin A (ZMPSTE24) a B (Rce1), proteázy uvolňující Golgi SREBP (MBTPS1 a S2), mitochondriální deoxynukleosidové transportéry (SLC25A4 až A6), mitochondriální proteázy (MPPA) zapojené do zpracování, paraplegin jaderně kódovaných proteinů během jejich mitochondriálního importu; kvantitativní PCR měření délky telomer [Molecular Genetics, Timone CHU, Marseille]. Marseille's CIC-UPCET spolupracoval na návrhu protokolu, přijme kontrolní subjekty a bude odpovědný za statistické zpracování dat.