Envelhecimento Acelerado, Infecção por HIV, Terapias Antirretrovirais (EP 45)

Os inibidores de protease bloqueiam a protease viral, bem como várias outras enzimas celulares: ZMPSTE24 cortando a pré-lâmina A na lâmina A madura; pelo menos uma das proteases de Golgi envolvidas na liberação de SREBP, controlando a transcrição de genes reguladores do metabolismo lipídico; proteases mitocondriais envolvidas na importação e posterior maturação de proteínas codificadas no genoma nuclear; proteassoma regulando a transcrição de vários genes através do NF-B; citocromos P450. Os inibidores de nucleosídeos da transcriptase reversa viral exibem toxicidade do DNA nuclear e mitocondrial, interrompem a glicosilação de lipídios e proteínas e inibem a telomerase. Portanto, as terapias antirretrovirais visam várias vias envolvidas no envelhecimento acelerado ou normal. Seus efeitos combinados são adicionados aos sintomas diretos da infecção viral ou às anormalidades celulares induzidas por proteínas virais.

Nosso estudo multicêntrico (o 3 CISIH de Marselha, Nice e Montpellier) de 3 anos analisará 50 pacientes virgens de infecção por HIV1 (grupo A), comparados a 50 indivíduos soronegativos pareados por idade e sexo (recrutados pelo CIC-UPCET de Marselha) e 100 pacientes infectados pelo HIV1 em primeira linha de terapia antirretroviral por pelo menos 12 meses (grupo B). Os pacientes dos grupos A e B serão recrutados na unidade clínica 3. Os pacientes infectados pelo HIV1 serão avaliados quatro vezes, no início do estudo, e depois a cada 12 meses durante 3 anos. Em caso de início ou mudança de terapia antirretroviral, os pacientes serão avaliados novamente. Os sujeitos de controle serão avaliados apenas na linha de base.

Os testes biológicos de sangue periférico serão os seguintes [Designação laboratorial]: i/ medição da carga viral, isolamento de PBMC, extracção de ADN, medição de ADN proviral, armazenamento de células e ADN [Virologia, Timone CHU, Marselha]; ii/ dosagens de CD4, CD8, glicemia, insulinemia, HOMA, colesterol total, LDL e HDL, triglicerídeos [Laboratórios de bioquímica do 3 CHU] ; iii/ ensaio de drogas antirretrovirais (espectrometria de massa) [Pharmacokinetics, Timone CHU, Marseille]; iv/ detecção (western blotting, imunocitoquímica combinada com análise de imagem de anormalidades nucleares) de PBMC alvos nucleares, citosólicos e mitocondriais de drogas antirretrovirais: laminas A e B, NF-B + I-B e ensaio de atividade de proteassoma, CD36 (glicosilação), Hsp70 mitocondrial , produção mitocondrial de ROS, potencial de membrana interna mitocondrial, subunidades 2 e 4 da citocromo C oxidase [Cell Biology, Timone CHU, Marseille] ; v/ genotipagem dos alvos antirretrovirais: lamin A (ZMPSTE24) e B (Rce1) proteases de processamento, Golgi SREBP-releasing proteases (MBTPS1 e S2), transportadores de desoxinucleosídeos mitocondriais (SLC25A4 a A6), proteases mitocondriais (MPPA, paraplegina) envolvidas no processamento de proteínas codificadas no núcleo durante sua importação mitocondrial; medição quantitativa por PCR do comprimento dos telômeros [Genética Molecular, Timone CHU, Marselha]. O CIC-UPCET de Marselha colaborou na concepção do protocolo, recrutará sujeitos de controlo e será responsável pelo tratamento estatístico dos dados.