Vieillissement accéléré, infection par le VIH, thérapies antirétrovirales (EP 45)

Les inhibiteurs de protéase bloquent la protéase virale, ainsi que diverses autres enzymes cellulaires : ZMPSTE24 écrêtant la prélamine A en lamine A mature ; au moins une des protéases de Golgi impliquée dans la libération de SREBP, contrôlant la transcription des gènes régulateurs du métabolisme des lipides ; les protéases mitochondriales impliquées dans l'importation et la maturation ultérieure des protéines codées du génome nucléaire ; le protéasome régulant la transcription de plusieurs gènes via NF-B ; cytochrome P450. Les inhibiteurs nucléosidiques de la transcriptase inverse virale présentent une toxicité de l'ADN nucléaire et mitochondrial, perturbent la glycosylation des lipides et des protéines et inhibent la télomérase. Les thérapies antirétrovirales ciblent donc plusieurs voies impliquées dans le vieillissement accéléré ou normal. Leurs effets combinés s'ajoutent aux symptômes directs de l'infection virale ou aux anomalies cellulaires induites par les protéines virales.

Notre étude multicentrique (les 3 CISIH de Marseille, Nice et Montpellier) d'une durée de 3 ans analysera 50 patients naïfs infectés par le VIH1 (groupe A), appariés à 50 sujets témoins séronégatifs appariés selon l'âge et le sexe (recrutés par le CIC-UPCET de Marseille) et 100 patients infectés par le VIH1 en première ligne de traitement antirétroviral depuis au moins 12 mois (groupe B). Les patients du groupe A et B seront recrutés dans la 3 unité clinique. Les patients infectés par le VIH1 seront évalués quatre fois, au départ, puis tous les 12 mois pendant 3 ans. En cas d'initiation ou de changement de traitement antirétroviral, les patients seront évalués une fois de plus. Les sujets témoins ne seront évalués qu'au départ.

Les analyses biologiques du sang périphérique seront les suivantes [Appellation du Laboratoire] : i/ mesure de la charge virale, isolement des PBMC, extraction de l'ADN, mesure de l'ADN proviral, conservation des cellules et de l'ADN [Virologie, Timone CHU, Marseille] ; ii/ dosages CD4, CD8, glycémie, insulinémie, HOMA, cholestérol total, LDL et HDL, triglycérides [Laboratoires de biochimie des 3 CHU] ; iii/ dosage des médicaments antirétroviraux (spectrométrie de masse) [Pharmacocinétique, Timone CHU, Marseille] ; iv/ détection (western blotting, immunocytochimie couplée à l'analyse d'images d'anomalies nucléaires) des PBMC cibles nucléaires, cytosoliques et mitochondriales des antirétroviraux : lamines A et B, NF-B + I-B et dosage de l'activité du protéasome, CD36 (glycosylation), Hsp70 mitochondriale , production mitochondriale de ROS, potentiel de membrane interne mitochondriale, sous-unités 2 et 4 de la cytochrome C oxydase [Biologie Cellulaire, Timone CHU, Marseille] ; v/ génotypage des cibles antirétrovirales : protéases de traitement des lamines A (ZMPSTE24) et B (Rce1), protéases de Golgi SREBP (MBTPS1 et S2), transporteurs de désoxynucléosides mitochondriaux (SLC25A4 à A6), protéases mitochondriales (MPPA, paraplégine) impliquées dans le traitement des protéines codées au niveau nucléaire lors de leur import mitochondrial ; mesure quantitative par PCR de la longueur des télomères [Génétique Moléculaire, Timone CHU, Marseille]. Le CIC-UPCET de Marseille a collaboré à la conception du protocole, recrutera des sujets témoins et sera responsable du traitement statistique des données.