Przyspieszone starzenie się, zakażenie wirusem HIV, terapie antyretrowirusowe (EP 45)

Inhibitory proteazy blokują wirusową proteazę, jak również różne inne enzymy komórkowe: ZMPSTE24 odcina prelaminę A do dojrzałej laminy A; co najmniej jedną z proteaz Golgiego zaangażowanych w uwalnianie SREBP, kontrolujących transkrypcję genów regulujących metabolizm lipidów; proteazy mitochondrialne biorące udział w imporcie i dalszym dojrzewaniu białek kodowanych w genomie jądrowym; proteasom regulujący transkrypcję kilku genów poprzez NF-B; cytochromy P450. Nukleozydowe inhibitory wirusowej odwrotnej transkryptazy wykazują toksyczność jądrową i mitochondrialną DNA, zakłócają glikozylację lipidów i białek oraz hamują telomerazę. Dlatego terapie antyretrowirusowe ukierunkowane są na kilka szlaków zaangażowanych w przyspieszone lub normalne starzenie. Ich połączone efekty są dodawane do bezpośrednich objawów infekcji wirusowej lub do nieprawidłowości komórek wywołanych przez białka wirusowe.

Nasze wieloośrodkowe (3 CISIH z Marsylii, Nicei i Montpellier) trwające 3 lata badanie przeanalizuje 50 zakażonych HIV-1 naiwnych pacjentów (grupa A), porównanych z 50 dobranymi pod względem wieku i płci seronegatywnymi osobami kontrolnymi (rekrutowanymi przez CIC-UPCET z Marsylia) i 100 pacjentów zakażonych HIV1 w pierwszej linii terapii przeciwretrowirusowej przez co najmniej 12 miesięcy (grupa B). Pacjenci z grupy A i B będą rekrutowani w 3 oddziale klinicznym. Pacjenci zakażeni HIV1 będą oceniani czterokrotnie, na początku badania, a następnie co 12 miesięcy przez 3 lata. W przypadku rozpoczęcia lub zmiany terapii antyretrowirusowej pacjenci będą poddani ponownej ocenie. Osoby kontrolne będą oceniane tylko na początku badania.

Badania biologiczne krwi obwodowej będą następujące [Oznaczenie laboratorium]: i/ pomiar wiremii, izolacja PBMC, ekstrakcja DNA, pomiar prowirusowego DNA, przechowywanie komórek i DNA [Virology, Timone CHU, Marsylia]; ii/ oznaczenia CD4, CD8, glikemii, insulinemii, HOMA, cholesterolu całkowitego, LDL i HDL, triglicerydów [Laboratoria Biochemii z 3 CHU]; iii/ oznaczenie leku przeciwretrowirusowego (spektrometria masowa) [Pharmacokinetics, Timone CHU, Marsylia]; iv/ detekcja (western blotting, immunocytochemia połączona z analizą obrazu nieprawidłowości jądrowych) PBMC jądrowe, cytozolowe i mitochondrialne cele leków antyretrowirusowych: laminy A i B, NF-B + I-B i test aktywności proteasomu, CD36 (glikozylacja), mitochondrialny Hsp70 , produkcja mitochondriów ROS, potencjał błony wewnętrznej mitochondriów, podjednostki 2 i 4 oksydazy cytochromu C [Cell Biology, Timone CHU, Marsylia]; v/ genotypowanie celów antyretrowirusowych: proteaz przetwarzających laminę A (ZMPSTE24) i B (Rce1), proteazy uwalniające SREBP Golgiego (MBTPS1 i S2), mitochondrialne transportery dezoksynukleozydów (SLC25A4 do A6), proteazy mitochondrialne (MPPA, paraplegin) biorące udział w przetwarzaniu białek kodowanych w jądrze podczas ich importu do mitochondriów; ilościowy pomiar PCR długości telomerów [Molecular Genetics, Timone CHU, Marseille]. CIC-UPCET z Marsylii współpracował przy projektowaniu protokołu, będzie rekrutował osoby kontrolne i będzie odpowiedzialny za statystyczną obróbkę danych.